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基于MTT比色和响应面法优化侧孢短芽孢杆菌最大活菌数培养条件
2024年
目的:探索获得侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)最大活菌数的最佳培养基成分及培养条件。方法:在建立MTT比色法与平板计数法的相关回归方程基础上,对获得最大活菌数的侧孢短芽孢杆菌最适培养基成分(碳源、氮源、无机盐)和培养条件(初始pH、温度、接种量、磷酸二氢钾)进行优化。结果:MTT比色法与平板计数法对活菌数测定结果表现出显著的线性关联(R^(2)>0.999);麦芽糖、氯化钙、初始pH、磷酸二氢钾为显著影响因子,最佳发酵条件为麦芽糖8.75 g/L,氯化钙0.17 g/L,初始pH 7.07、磷酸二氢钾3.73 g/L,此条件下活菌数为8.12×10^(8)CFU/mL,与理论活菌数(8.25×10^(8)CFU/mL)无显著差异。结论:基于MTT比色和响应面法优化侧孢短芽孢杆菌最大活菌数培养条件,优化后的活菌数较优化前提高了3.02倍。
宋鹏李理想赵彪王泽乐孙兴鑫
关键词:MTT比色法响应面法侧孢短芽孢杆菌活菌数
MTT比色法检测苦瓜MAP30蛋白对5637细胞增殖、MALAT1、HOTAIR及UCA1的影响被引量:1
2021年
目的探讨噻唑蓝(MTT)比色法检测苦瓜MAP30蛋白对5637细胞增殖、肺腺癌转移相关转录因子1(MALAT1)、长链非编码RNA HOX转录反义RNA(HOTAIR)基因及尿路上皮癌相关1(UCA1)的影响。方法按MTT法的相关操作原则与相关流程提取膀胱癌患者的苦瓜MAP30蛋白后进行克隆、表达及纯化处理,接着提取其处理膀胱癌5637细胞并进行MTT检测。探析苦瓜MAP30蛋白对5637细胞增殖和对MALAT1、HOTAIR及UCA1表达的相关性。结果抑制率:膀胱癌5637细胞增殖时所产生的抑制率越高时,MAP30蛋白浓度也越高,且时间越长,即MAP30蛋白浓度与膀胱癌5637细胞增殖呈正比(P<0.05)。凋亡率:膀胱癌5637细胞凋亡随MAP30浓度递增而逐渐上升,且MAP30浓度(培养48 h)为400μg/mL时,膀胱癌5637细胞凋亡率达到最高,MAP30浓度与膀胱癌5637细胞凋亡呈正比(P<0.05)。膀胱癌5637细胞lncRNA MALAT-1、HOTAIR、UCA1表达水平随苦瓜MAP30蛋白浓度的递增而逐渐降低,检测时间为48 h且苦瓜MAP30蛋白浓度为400μg/mL时上述三项指标的表达水平均显著低于48、24 h的其他苦瓜MAP30蛋白浓度(P<0.05)。结论苦瓜MAP30蛋白对膀胱癌5637细胞增殖的抑制和凋亡诱导方面有较好的效果,且可下调MALAT-1、HOTAIR、UCA1表达水平。
杨海霞张鹏陆伦邓秀英陈艳梅
关键词:MTT比色法
MTT比色法测定烟酰胺类化合物对植物病原细菌的抑菌活性被引量:7
2019年
【目的】探究MTT比色法用于合成化合物对植物病原细菌抑菌活性筛选的可行性。【方法】将7个烟酰胺类化合物分别用MTT比色法和平板扩散法对番茄疮痂病菌(Xanthomonas vesicatoria)、烟草青枯病菌(Ralstonia solanacearum)和丁香假单胞杆菌(Pseudomonas syringae)的抑菌活性进行筛选并测定其有效中浓度EC50。【结果】采用平板扩散法进行抑菌活性初筛时,未能筛选出有活性的化合物;采用MTT比色法筛选出N-(3-三氟甲基)-苯基烟酰胺具有抑菌活性,其对番茄疮痂病菌(X. vesicatoria)、烟草青枯病菌(R. solanacearum)和丁香假单胞杆菌(P. syringae)的EC50分别为3.87、2.05、10.33 mg/mL。【结论】MTT比色法能更加准确地评价脂溶性化合物对细菌的抑菌活性,并具有广泛的应用前景。
普特杨云海王凯博叶敏范黎明付立新苏发武查友贵
关键词:MTT比色法抑菌活性
MTT比色法观察加味阳和汤对SD乳鼠成骨细胞增殖的影响被引量:9
2019年
目的:采用MTT(四唑盐)比色法观察加味阳和汤含药血清对SD乳鼠成骨细胞增殖能力的影响。方法:使用SD大鼠制备加味阳和汤含药血清及空白血清,干预成骨细胞,在第1、3、5、7、9天时采用MTT比色法在A490(酶标仪波长为490nm)处测定OD值(光密度值),绘制细胞增值曲线图。结果:加味阳和汤观察组细胞在第1、3、5、7、9天增殖度高于对照组(P<0.05)。结论:加味阳和汤含药血清可促进成骨细胞增殖,具有潜在抗骨质疏松作用,但尚需进一步研究明确其效应。
曹端广杨凤云夏汉庭杨文龙杨佛李威王书豪
关键词:MTT比色法加味阳和汤成骨细胞骨质疏松
MTT比色法及ATP生物发光法在鸡蛋蛋壳表面细菌总数检测中的应用
鸡蛋作为一种重要的膳食原料,产出后在运输、贮存、加工及消费的过程中均会受到不同程度的微生物污染。鸡蛋蛋壳表面的微生物会造成一定的危害,首先,鸡蛋蛋壳表面的微生物直接对人体的健康构成严重的威胁;其次,在食品的加工过程中,蛋...
李旋
关键词:MTT比色法ATP生物发光法
MTT比色法在细胞生物学实验教学中的实验安排与效果分析被引量:2
2015年
MTT比色法是一种检测细胞增殖与细胞活力的最常用方法。但因该方法用时偏长,无法在高校基础细胞生物学实验课完成。为了解决这一难题,以小鼠腹水瘤细胞为材料,建立了"权宜之MTT比色法"。该法通过调整向细胞悬液中加入MTT溶液的时间,使实验可以在3 h内完成。结果显示,"权宜之MTT比色法"可以替代常规MTT比色法用于基础细胞生物学实验教学。
薛雅蓉庄重钟昭昭高倩倩
关键词:MTT法细胞生物学实验教学
MTT比色法与相对增殖度法对输液用包装材料的细胞毒性检测结果的比较被引量:16
2015年
目的比较四唑盐(MTT)比色法和相对增殖度法对4种输液用包装材料细胞毒性检查结果的相关性,评价2种方法在检测药包材体外细胞毒性作用上的优缺点。为建立快速有效的药包材检测新标准提供有力依据。方法 L-929细胞分别采用MTT法和细胞增殖度法对4种包装材料的浸提液进行细胞毒性研究,比较材料对细胞的毒性等级,算出细胞的相对增殖度,分析比较2种方法相关性。结果在同样实验条件下,4种药品包材表现出对L-929细胞不同的细胞毒性。与细胞增殖度法比较,MTT法与细胞增殖法检测结果具有很好的相关性r=0.966(P<0.05)。结论与相对增殖度法相比,MTT比色法由于实际检测所需的细胞量相对较少、试验步骤相对简便、检测周期短,因此具有一定的优越性,值得推荐作为细胞毒性检测方法。
桑晶朱社敏匡荣
关键词:细胞毒性作用MTT法细胞计数法
重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子生物学活性测定TF-1细胞/MTT比色法的优化及其验证被引量:1
2015年
目的对检测重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte macrophage colony stimulating factor,rh GM-CSF)生物学活性的TF-1细胞/MTT比色法进行优化及验证。方法以rh GM-CSF依赖细胞株TF-1为靶细胞,采用MTT比色法测定rh GM-CSF生物学活性,对比色法中裂解液种类、裂解时间、细胞浓度、MTT作用时间等进行优化,并对优化后的方法进行准确度和精密度验证。结果优化后的TF-1细胞/MTT比色法:将供试品及标准品稀释至18 IU/ml,做2倍系列稀释,共8个稀释度,50μl/孔;加入6×10^5个/ml TF-1细胞悬液,50μl/孔,37℃培养48-52 h;加入MTT溶液,20μl/孔,37℃培养5 h;加入15%SDS裂解液,150μl/孔,裂解过夜,检测A570值。3种不同浓度的rh GM-CSF标准品活性测定结果回收率为104%;rh GM-CSF标准品6次检测活性平均值为18.6 IU/ml,变异系数为5.37%;rh GM-CSF标准品3 d活性检测结果的平均变异系数为5.18%。结论采用优化后MTT比色法检测rh GM-CSF生物学活性,准确度和精密度均较高,可应用于rh GM-CSF活性的检测。
许国杰周丽红李丹田云蕾于丽娟刘英华严永男李利
关键词:粒细胞巨噬细胞集落刺激因子生物学活性
MTT比色法研究应用进展被引量:37
2013年
MTT比色法又称四甲基偶氮噻唑蓝比色法,是一种能够快速地量化检测活细胞数量及增值状态的方法,因具有工作量小、操作简便、快速、重复性好等优点而被广泛应用于细胞毒性、细菌活力检测及抗癌药物筛选等领域.文章就MTT比色法原理及近年来应用进展作一简介与综述.
李上标裴淑艳蒋超马玉郭忠
关键词:MTT比色法细胞毒性
应用MTT比色法测定瑶药定心藤挥发油对肿瘤细胞的抑制作用被引量:3
2013年
目的:探讨分析定心藤挥发油对人胃癌细胞SGC-7901、人白血病细胞K562的抑制作用。方法:应用超临界CO2法从瑶药定心藤中提取出挥发油,以半数抑制浓度(IC50)作为评价抗肿瘤活性强度的指标,采用MTT比色法测定定心藤挥发油的抗肿瘤活性,并将测定结果进行回顾性的分析。结果:定心藤挥发油对两种癌细胞均具有一定的抗肿瘤活性。相对于人胃癌细胞SGC-7901而言,定心藤挥发油对人白血病细胞K562的抑制作用更加显著,其IC50=13.95μg·mL-1。结论:定心藤超临界CO2提取挥发油对人白血病细胞K562的抑制作用显著,值得在临床上推广应用。
钟海微彭小勇武晶晶胡蓉马哲
关键词:MTT法抗肿瘤活性

相关作者

耿明
作品数:160被引量:476H指数:10
供职机构:济南军区总医院
研究主题:减压病 胃肿瘤 胃癌 免疫组化 免疫组织化学
祝其锋
作品数:160被引量:628H指数:15
供职机构:广东医学院检验医学研究所
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曹永成
作品数:99被引量:421H指数:11
供职机构:济南军区总医院
研究主题:胃癌 免疫组织化学 减压病 表达及意义 化疗药物
景洪标
作品数:53被引量:201H指数:9
供职机构:济南军区总医院
研究主题:免疫组化 文献复习 肌上皮细胞 化疗药物 免疫组织化学
李祥瑞
作品数:446被引量:1,507H指数:20
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