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一种细胞色素P450酶及其应用: 本发明公开了一种细胞色素P450酶及其应用，涉及药用植物基因工程技术领域。编码细胞色素P450酶蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明细胞色素P450基因GpCYP450_65是参与绞股蓝皂苷合成途径的关...; 孙超郭宝林郓玲玲李紫琴沈晓凤李滢

恶臭假单胞菌F1表达P450酶催化柠檬烯生物合成紫苏醇: 2024年; 紫苏醇是一种天然存在的单萜类化合物,在医药、日化、食品等行业具有广阔应用前景,但利用柠檬烯生物合成中的过程中存在选择性不强、底物对宿主菌株有毒性等问题。为此该文选择恶臭假单胞菌F1这种对环境具有高耐受度的菌株,构建在大肠杆菌和恶臭假单胞菌中皆可扩增并表达目的基因的广宿主载体,过表达选择性羟化酶CymAa、CymAb,异源表达特异性氧化柠檬烯生成紫苏醇的P450酶CYP153A6,并在表达P450酶的基础上对柠檬烯底物添加浓度进行了调整,与大肠杆菌BL21(DE3)一同进行柠檬烯生物合成紫苏醇实验,并使用紫外可见分光光度计和GC-MS分别测量菌株生长状况和紫苏醇产量。最终证明了恶臭假单胞菌F1在柠檬烯浓度为10 mmol/L内的环境中具有高耐受度,且添加1 mmol/L柠檬烯底物发酵48 h后获得最高产量75.6 mg/L,最高转化率达到49.66%,缩小了生物合成紫苏醇的底物添加范围,并获得对柠檬烯具有高耐受度的发酵宿主。; 底心怡刘春立刘秀霞刘秀霞白仲虎; 关键词：细胞色素P450 恶臭假单胞菌萜类化合物

南沙链霉菌来源细胞色素P450酶CYP154C34的表征及生物转化被引量：1: 2024年; 【目的】P450酶作为一种多功能生物催化剂,可在温和条件下高区域和立体选择性地催化复杂化合物中未活化的C-H键,因此P450酶在化工原料合成、环境污染物降解及药物合成等领域都具有重要作用。本文对南沙链霉菌基因组中的一个新颖的P450酶CYP154C34进行研究,通过构建异源表达和全细胞生物转化重组菌探究其功能。【方法】构建2种全细胞生物转化BL21(DE3)重组菌(含p ET28a-CYP154C34-RhFRED和pET28a-CYP154C34+pACYCDuet-Pdx/PdR)和1种异源表达BL21(DE3)重组菌(含pET28a-CYP154C34)。通过全细胞生物转化的方式筛选底物,分析催化功能及产物结构。比较2种全细胞生物转化重组菌和体外酶反应对底物的转化率。分析CYP154C34和不同底物及底物类似物的亲和力。【结果】通过底物筛选和产物鉴定发现CYP154C34可催化包括孕酮、睾酮、雄烯二酮在内的9种甾体化合物16α位羟基化。通过2种不同还原伴侣的全细胞体系及体外酶反应对底物转化率的比较,发现含有pET28a-CYP154C34-RhFRED的BL21(DE3)重组菌的转化率最高,可对孕酮、睾酮、雄烯二酮等7种底物实现超过90%的转化率。通过亲和力分析发现CYP154C34对底物化合物的亲和力比类似物高。【结论】本研究构建了2种CYP154C34的全细胞生物转化重组菌并鉴定其功能。CYP154C34催化的底物谱宽并且具有极高的区域和立体选择性及较高的转化率,具有良好的工业应用前景。; 高齐霖杨建李蓉赖刚许莲花; 关键词：P450 生物转化甾体雌二醇

细胞色素P450酶在植物次生代谢产物生物合成中的研究进展被引量：2: 2024年; 细胞色素P450 (cytochrome P450, CYP450)是一类广泛存在于自然界的超基因家族单加氧酶,参与多种植物次生代谢产物的生物合成,被誉为“万能的生物催化剂”。近年来,随着高通量测序技术和分子生物学的发展,越来越多植物CYP450酶的功能被揭示,相关生物合成研究取得了令人瞩目的成果。本研究结合CYP450的结构特点、作用机制,重点介绍植物CYP450在次生代谢产物生物合成中的研究进展,为植物CYP450酶的挖掘及功能研究提供参考,也为基于此的植物次生代谢产物生物合成与代谢调控提供依据。; 李永康马雪祺冯婧娴陈万生孙连娜肖莹; 关键词：细胞色素P450酶植物次生代谢产物生物合成蛋白结构

一种细胞色素P450酶、核酸分子、甘草次酸衍生物及其应用: 本发明公开了一种细胞色素P450酶、核酸分子、甘草次酸衍生物及其应用。本发明通过利用CYP161H12构建的体外催化转化系统，在甘草次酸骨架分子的B环和/或D环实现了选择性C‑H键活化，具备明显优势。本发明利用酶催化技术...; 董廖斌张晓维林小栩王增援李芳茹

来源于粉防己的细胞色素P450酶及其在阿朴菲生物碱化合物生物合成中的应用: 本发明公开了来源于粉防己的细胞色素P450酶及其在阿朴菲生物碱化合物生物合成中的应用。本发明首次表征了参与粉防己中阿朴菲生物碱亚甲基二氧桥结构形成的关键P450，为其他物种中阿朴菲生物碱生物合成途径的解析提供了重要参考，...; 郭娟李琦爽李心怡史汶龙马莹王健焦翔陈云黄璐琦

中药复方双参宁心胶囊及其配伍组分对大鼠细胞色素P450酶的影响: 2024年; 目的:为预防药物相互作用可能导致的临床合并用药隐患,初步探讨中药复方双参宁心胶囊及其组方药物对大鼠细胞色素P450酶的影响。方法:30只大鼠随机分为空白对照组、丹参组、人参组、延胡索组及双参宁心组,每组6只,连续灌胃14d,给予大鼠混合探针药:咖啡因、氯沙坦、奥美拉唑、右美沙芬和咪达唑仑,分别对应大鼠体内5种CYP450s酶亚型CYP1A2、CYP2C6、CYP2C11、CYP2D2和CYP3A1/2。检测探针药及特异代谢物不同时间点的血药浓度,比较探针药及代谢物的药代参数及代谢率的变化,评价重复给予双参宁心胶囊对大鼠CYP450酶活性的影响。结果:与空白对照组比较,双参宁心胶囊和各组方药对5种探针药的体内代谢率均没有显著性影响。同时双参宁心组咖啡因代谢物PXT达峰时间显著推迟(P<0.05),奥美拉唑的末端消除半衰期显著延后(P<0.05),右美沙芬代谢物的峰浓度和AUC值显著增加(P<0.05,P<0.01),这与人参和延胡索给药后趋势较一致;丹参组和延胡索组咖啡因表观分布容积均显著升高(P<0.01,P<0.05);人参和延胡索组氯沙坦及其代谢物的峰浓度和AUC值均升高(P<0.05,P<0.01)。结论:重复给予复方双参宁心胶囊对大鼠体内CYP1A2、CYP2C6、CYP2C11、CYP2D2和CYP3A1/2酶活性不存在显著诱导或抑制作用,是3个组方药对代谢酶作用的综合结果,初步提示临床上应用双参宁心胶囊出现药物相互作用引起不良反应的可能性较小。; 苗兰彭勍张颖孙明谦任常英林晓斐刘建勋林力; 关键词：药代动力学

五味子丙素生物合成关键P450酶基因鉴定及功能表征: 五味子丙素(schisandrin C)属于联苯环辛二烯(dibenzocyclooctadiene,DBCOD)型木脂素,是华中五味子(Schisandra sphenanthera)中最重要的活性成分之一,因其结构独...; 付瀚钰; 关键词：华中五味子生物合成途径细胞色素P450

细胞色素P450酶g4875和g4164在灵芝三萜合成中的功能研究: 灵芝(Ganoderma lingzhi)是名贵药用真菌,三萜是其关键药效成份。三萜生物合成起始于乙酰辅酶A,通过甲羟戊酸途径合成羊毛甾醇,进一步在细胞色素P450(CYP450)作用下合成结构多样的三萜化合物,但CYP...; 刘欢; 关键词：灵芝细胞色素P450 三萜化合物

细胞色素P450酶突变体及其用途: 本申请实施例提出一种细胞色素P450酶突变体及其用途。本申请实施例以SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列为模板，对该模板的关键活性位点进行突变改造，构建了突变体库，并筛选得到一系列催化活性和/或选择性显著提高的突变体；...; 李杉林春燕张雷

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