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百日咳毒素、丝状血凝素和百日咳黏附素精制抗原纯度的SDS-PAGE检测方法的验证: 2024年; 目的采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)方法检测百日咳毒素(pertussis toxin,PT)、丝状血凝素(filamentous hemagglutinin,FHA)和百日咳黏附素(pertactin,PRN)精制抗原纯度,并进行验证。方法对样品进行SDS-PAGE电泳、考马斯亮蓝染色后,使用凝胶成像系统拍照并用Image Lab软件进行分析,获得样品各蛋白条带的光密度值。对建立的方法进行系统适用性、线性、准确度、重复性、中间精密度、灵敏度和耐用性验证。结果对应2套分子量标准蛋白,PT、FHA和PRN精制抗原分别在10.00~50.00μg/mL的低质量浓度范围和50.00~600.00μg/mL的高质量浓度范围内,蛋白浓度和对应条带光密度值之间具有良好的线性关系,相关系数(coefficient of correlation,r)≥0.99。3种精制抗原杂质水平准确度和重复性回收率均在80%~120%,且重复性验证相对标准差(relative standard deviation,RSD)≤10%;抗原水平准确度和重复性回收率均在90%~110%,重复性验证RSD≤10%;灵敏度12.50μg/mL的回收率均在80%~120%,RSD≤10%;中间精密度验证RSD≤10%。结论建立的测定PT、FHA和PRN精制抗原纯度的SDS-PAGE法,其系统适用性、准确度、重复性、中间精密度和灵敏度均良好,可用于以上精制抗原的纯度检测。; 陈丝丝夏芙蓉於洋何鹏王玲张娜赵芳圆范天一李世慧; 关键词：百日咳毒素丝状血凝素 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

乳及乳制品中乳铁蛋白含量的快速SDS-PAGE荧光检测方法被引量：1: 2024年; 该研究采用新型的Chromeo P503(P503)染料替代考马斯亮蓝染色方法,以克服脱色染色步骤繁琐、耗时长(≥5 h)的不足,建立一种乳及乳制品中乳铁蛋白的快速简便十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis,SDS-PAGE)检测方法。P503染料标记蛋白产生强烈的红色荧光发射,在30 min内一步操作即可完成,并且进行脱铁处理后消除乳铁蛋白铁饱和度对于荧光信号的干扰,保证定量的准确性。根据凝胶成像图中78 ku蛋白条带是否存在及其灰度值的大小,实现乳铁蛋白的定性与定量检测。在优化的实验条件下,线性范围为15~75μg/mL,检出限为5.11μg/mL,加标回收率在75.79%~108.09%之间,表明该方法具有较高的灵敏度和准确性。SDS-PAGE和P503结合无需进行肝素亲和柱前处理,便可直接应用于乳及乳制品中乳铁蛋白快速简便的准确定量检测,P503染料标记还可以用于其它乳蛋白的SDS-PAGE快速低成本定量检测,从而为乳品质量控制和营养评价及加工工艺研究提供有力工具。; 李汉芳黄珍路梦凡孙娜娜徐丹徐秦峰; 关键词：乳铁蛋白

一种辅助SDS-PAGE凝胶快速染、脱色夹具: 本实用新型公开了一种辅助SDS‑PAGE凝胶快速染、脱色夹具，包括上下分布的夹板，所述夹板上开设有均匀间隔分布的通孔，上下两层所述夹板之间呈对齐叠放状态，且上下两层所述夹板的侧边中部均卡设有呈C型的弹性夹座，处于同一平面...; 黄小惠温伟星李伟文邱飞鹏李凌霄黄裕立

一种双特异性抗体SDS-PAGE的检测方法: 本发明提供了一种双特异性抗体SDS‑PAGE的检测方法，包括以下步骤：S1，双特异性抗体SDS的前处理：将样品稀释适当浓度，加入上样Buffer，配置成电泳上样体系；将配置好的样品，短时离心；金属浴或水浴70℃加热时间为...; 孙利燕赵焕荣王烨张璇

一种弹簧式SDS-PAGE跑胶用电泳槽: 本实用新型公开了一种弹簧式SDS‑PAGE跑胶用电泳槽，涉及电泳槽技术领域，包括电泳槽主体、封盖单元，以及定位单元，还包括电连接单元及卡扣单元；电连接单元包括固定连接在电泳槽主体顶部的两个导电片，以及设置在两个导电片上方...; 刘玲周道亮刘勇谢可史志明

内蒙古地区传统发酵酸马奶不同发酵时期乳清蛋白SDS-PAGE分析被引量：4: 2023年; [目的]探究内蒙古地区传统酸马奶发酵过程中乳清蛋白的变化情况。[方法]以从内蒙古锡林郭勒盟镶黄旗采集的马奶为原料制备传统发酵酸马奶,发酵温度为(22±2)℃,人工捣拌频率5次/d,每次300下;每隔12 h采集1次发酵0~96 h的酸马奶样品;离心提取酸马奶乳清蛋白样品,利用条件优化后的SDS-PAGE电泳技术分析酸马奶乳清蛋白在发酵过程中变化情况。[结果]优化后的SDS-PAGE电泳分析条件为:分离胶浓度12%,浓缩胶浓度5%,分离胶电泳电压180 V、电泳时间300 min,上样浓度0.5μg/μL,上样体积16μL,改良考马斯亮蓝法染色、脱色各12 h。在发酵0~12 h内,酸马奶乳清蛋白含量增加,在12 h时达到最高值(5.12μg/μL),之后随发酵时间延长呈下降趋势,发酵96 h时降低至3.92μg/μL。SDS-PAGE电泳图谱分析显示,在分子量10~70 kDa区间内共获得乳清蛋白有效条带13个。在发酵过程中,β-乳球蛋白、溶酶菌C和α-乳白蛋白3种蛋白质含量呈现不同程度的波动,发酵72 h时三者含量之和最高,占乳清蛋白总含量的85.73%,并且在发酵过程中始终保持较高水平,是传统发酵酸马奶发酵96 h内乳清蛋白的主要组分,其中,β-乳球蛋白含量最高,平均占乳清蛋白总含量的38.92%。分子量在20~40 kDa的酪蛋白含量在发酵24 h之后开始下降,至60 h时条带消失。分子量为10.33 kDa的蛋白质在发酵12 h内被消耗,60 h时再次出现且含量随发酵时间延长逐渐增加,在84 h时达到峰值,占乳清蛋白总含量的9.84%。分子量为49.80 kDa的蛋白质在发酵72 h之后开始出现,含量在96 h时达到乳清蛋白总含量的4.11%。与其他乳清蛋白组分相比,β-乳球蛋白和免疫球蛋白含量在发酵过程中变化较小。[结论]内蒙古地区传统发酵酸马奶在发酵96 h内,分子量为10~70 kDa的乳清蛋白含量表现出有规律的消长,主要被消化分解的蛋白质是酪蛋白。不同发酵阶段酸马奶乳清蛋白组成�; 红梅包艳青芒来布仁其其格; 关键词：酸马奶传统发酵乳清蛋白

SDS-PAGE凝胶电泳对驴皮胶及常见伪品胶中的蛋白分析研究: 2023年; 目的:研究驴皮胶及常见伪品胶马皮胶和牛皮胶的蛋白凝胶电泳行为。方法:自制3种皮胶,计算出胶率,BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白含量,计算上样量,使上样量为20~30μg。垂直电泳仪进行SDS-PAGE凝胶电泳,采用考马斯亮蓝及银染法显色。结果:3种皮胶的凝胶电泳行为相似,蛋白成分主要集中在分子量大于25 kDa段上,银染法灵敏度更高,可显示较多条带。结论:3种皮胶分子量分布宽泛,具有共同的条带,进一步可用多肽蛋白质谱鉴定技术对各混合物组分进行更深入分析。; 张小慧王世伟席啸虎李志强; 关键词：驴皮胶蛋白质

SDS-PAGE电泳蛋白染色方法研究进展: 2023年; SDS-PAGE电泳结束后,蛋白质条带染色是其中一个重要的步骤。目前蛋白质染色方法主要有考马斯亮蓝染色法、银染法、荧光染色法、负染法等,其中考马斯亮蓝染色法又分为传统考染和胶体考染;银染又分为银染A法和银染B法;每种方法各有利弊,目前,对染色方法改进主要集中在如何提高蛋白质染色的灵敏度,缩短染色时间,用无毒的化学物质去替换现在凝胶电泳中常用的有毒物等方面。如何在保持方法高灵敏度的同时,又能够有效地降低染色背景是亟待解决的问题,也是未来的发展方向。; 迟玲玲王京燕于娜盖维娜申欣宜; 关键词：考马斯亮蓝

SDS-PAGE凝胶拍摄装置: 本实用新型公开了一种SDS‑PAGE凝胶拍摄装置，包括LED观片灯，还包括罩在LED观片灯上的外框，所述外框可拆卸设置在LED观片灯上，在外框上还设置有移动机构和夹持拍摄手机的手机夹持机构，所述移动机构能带动手机夹持机构...; 黄治中陈星宇陈园力曹凌波

一种新型蛋白sds-page电泳仪: 本实用新型涉及蛋白电泳仪技术领域，且公开了一种新型蛋白sds‑page电泳仪，包括蛋白电泳仪本体，所述蛋白电泳仪本体的侧面设置有散热装置，所述蛋白电泳仪本体的侧面设置有冷却装置，所述散热装置包括放置架、驱动电机、连接轴承...; 崔明哲

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