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刘农乐
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- 所属机构:军事医学科学院基础医学研究所
- 所在地区:北京市
- 研究方向:医药卫生
- 发文基金:国家自然科学基金
相关作者
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- 重组人骨形态发生蛋白-2生物学活性测定新方法的建立被引量：3
- 2007年
- 目的:采用小鼠异位成骨技术及甲基麝香草酚蓝比色法检测重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)的生物学活性。方法:将rhBMP-2埋入小鼠肌间隙内,14d后取出新生组织,采用血清钙试剂盒检测其钙含量。结果:随着给药组剂量递增,相应地钙含量也增加,二者具有较强的量效关系。结论:此方法为本实验室独创,较传统的血清碱性磷酸酶方法更为方便、快捷,是一种能够定量检测rhBMP-2活性的新方法。
- 丁红梅刘农乐王芳李少华邵宁生王会信
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- 一种毫微克水平的蛋白质定量方法
- 1991年
- 本文报道了一种利用胶体金与蛋白质结合后光吸收波长改变的原理,进行毫微克水平的蛋白质定量方法。该法样品用量少、操作简便、灵敏度高,最少检测量为20ng,标准曲线范围是20～200ng。以牛血清白蛋白(BSA)为标准,与Lowry法比较,有些蛋白质测定值两法接近,也有些蛋白的测定值相差较多。但本法在蛋白质提取纯化过程中可提供相对蛋白质含量,故在微量活性蛋白质的研究中不失为有用的方法。
- 刘农乐蒋滋慧王芳王会信
- 关键词：蛋白胶体金
- 一种肝癌药物治疗的靶标及其应用
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- 文献传递
- 重组人胰岛素样生长因子Ⅰ的纯化及鉴定被引量：2
- 2001年
- 目的 :纯化在大肠杆菌中表达的重组人胰岛素样生长因子Ⅰ (rhIGF Ⅰ ) ,并对其性质进行鉴定。方法 :发酵表达菌株 ,提取包涵体 ,采用离子交换和凝胶过滤两步纯化 ,从相对分子质量、免疫学性质、荧光光谱、N端 15个氨基酸的序列分析等方面进行鉴定。另外 ,对重组蛋白进行了复性和生物学功能的检测。结果与结论 :纯化后rhIGF Ⅰ纯度可达 99%以上 ,相对分子质量、免疫印迹、荧光光谱及N端 15个氨基酸的分析结果与预计的相同 ,rhIGF Ⅰ促细胞生长的ED50 为 3～ 10ng/ml。
- 聂尚海刘宝英王芳刘农乐杜清友丁红梅王会信
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- 邵宁生孙卫国刘农乐王芳李少华赵强李洁丁红梅夏伟
- 文献传递
- 人β神经生长因子基因稀有密码子及mRNA二级结构对其在大肠杆菌中表达的影响被引量：3
- 2011年
- 目的:研究人β神经生长因子(β-NGF)基因中稀有密码子及其mRNA二级结构对其在大肠杆菌中表达量的影响。方法:根据对人β-ngf中稀有密码子及其mRNA二级结构的研究,同义突变人β-ngf基因,通过PCR得到人β-ngf的5'端同义突变基因rh-β-ngfp32和全同义突变基因rh-β-ngfmu,将这2个序列克隆入载体pET3a中,得到重组质粒pET3a-ngfp32和pET3a-ngfmu,分别转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态,IPTG诱导表达,收集菌体,SDS-PAGE检测其表达量的改变。结果:构建的pET3a-ngfp32和pET3a-ngfmu表达载体酶切和测序结果正确,SDS-PAGE结果显示,与在重组菌pET3a-NGF总蛋白中的表达量相比,目的蛋白rh-β-NGF在重组菌pET3a-NGFP32和pET3a-NGFmu中的表达量均明显增高,并且在重组菌pET3a-NGFmu中的表达量高于重组菌pET3a-NGFP32。结论:目的蛋白rh-β-NGF在重组菌pET3a-NGFP32和pET3a-NGFmu中表达量的增高,说明人β-ngf基因中稀有密码子和mRNA的二级结构对其在大肠杆菌中的表达有较为明显的影响,结果为构建rh-β-NGF的大肠杆菌工程菌株奠定了基础。
- 欧晓敏李少华刘农乐孙卫国赵强丁红梅王芳邵宁生
- 关键词：稀有密码子MRNA二级结构大肠杆菌
- 赤芍治疗热毒血瘀证的血清蛋白质组变化的初步研究被引量：62
- 2005年
- 目的研究赤芍对大鼠热毒血瘀证的血清蛋白质组变化的影响。方法用双向电泳(two-di-mensionalelectrophoresis,2DE)分析正常组、内毒素组〔用脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)静脉注射〕、赤芍组(灌胃给药)、LPS(静脉注射)+赤芍(灌胃给药)组之间的血清蛋白质组表达差异。结果(1)LPS致热毒血瘀证大鼠的血清在2DE胶上13个蛋白点(xPr)出现非常明显的含量变化,与正常组比较,LPS组的xPr16、xPr19的点容量值均显著降低,xPr1、xPr2、xPr3、xPr4、xPr6、xPr7、xPr8、xPr9、xPr11、xPr12、xPr23的点容量值均显著增高。(2)LPS+赤芍组与LPS组比较,LPS引起增高的xPr1、xPr2、xPr3、xPr4、xPr9的点容量值均显著降低,LPS引起降低的xPr16的点容量值显著增高,但xPr16的点容量值仍显著低于正常组,xPr1、xPr4、xPr9的点容量值均显著高于正常组;LPS+赤芍组的xPr2、xPr3两个蛋白点已被明显调节到正常状态;赤芍组除xPr2、xPr4外,在xPr1,xPr3,xPr9,xPr16点均表现对LPS显著的交互作用。(3)对xPr19,赤芍和LPS两因素显著的交互作用有协同性。(4)赤芍组xPr13、xPr14的点容量值均显著高于正常组,xPr15、xPr17的点容量值均显著低于正常组,这4个蛋白点LPS组与正常组比较差异均无显著性。结论通过调节xPr1、xPr2、xPr3、xPr4、xPr9、xPr16蛋白点,可能是赤芍治疗热毒血瘀证的疗效的分子基础。
- 谢文光马晓昌邵宁生丁勤学赵馨刘农乐魏钰书王会信陈可冀
- 关键词：血清蛋白质组热毒血瘀证赤芍灌胃给药正常组分子基础
- 重组人骨形态发生蛋白-2的基础与应用基础研究
- 王会信刘农乐邵宁生赵明丁红梅王芳薛沿宁杨光
- 该项目研究了重组人骨形态发生蛋白-2（rhBMP-2）的基因表达、表达产物的复性、纯化、单克隆抗体的制备、中试规模的生产工艺以及作为国家1类新药申报所需要的各项技术数据，其中包括药学、药理学、毒理学、药代动力学等方面的实...
- 关键词：
- 关键词：重组人骨形态发生蛋白-2骨缺损
