朱中元
作品数： 62被引量：225H指数：8
  • 所属机构:海南农垦总局医院
  • 所在地区:海南省
  • 研究方向:医药卫生
  • 发文基金:海南省自然科学基金

相关作者

王海波
作品数：34被引量：120H指数：5
供职机构：海南农垦总局医院
研究主题：结核分枝杆菌 结核分支杆菌 耐药性 蛋白 DNA疫苗
谢勇
作品数：13被引量：61H指数：4
供职机构：海南医学院附属新华医院
研究主题：DNA疫苗 免疫保护 结核分枝杆菌 疫苗构建 结核
陈允凤
作品数：17被引量：107H指数：5
供职机构：海南农垦总局医院
研究主题：耐药性 基因突变 结核分支杆菌 ESBLS INHA
张春发
作品数：28被引量：111H指数：6
供职机构：中国热带农业科学院热带生物技术研究所
研究主题：DNA疫苗 免疫保护 巴西橡胶树 包涵体 疫苗构建
王海波
作品数：8被引量：62H指数：3
供职机构：海南农垦总局医院
研究主题：结核分枝杆菌 基因突变 多耐药 结核分支杆菌 耐药性
作品列表
结核分枝杆菌耐异烟肼katG基因LiPA检测研究被引量：1
2009年
目的利用LiPA技术检测结核分枝杆菌耐异烟肼katG基因,评价LiPA技术临床应用的可行性。方法应用比例法确定80株结核分枝杆菌临床分离株其耐药性,用katG基因PCR扩增产物进行DNA测序,然后用LiPA检测技术检测结核分枝杆菌katG基因的突变,对比3种方法的检测结果,评估LiPA检测技术的准确性。结果在80株结核分枝杆菌中,35株为异烟肼敏感株,45株为异烟肼耐药株。敏感株katG基因扩增阳性率为100%,耐药株为91.1%(41/45)。耐异烟肼菌株katG的缺失率为8.9%。41株扩增阳性耐药株中有26株检测到315位密码子的突变,分别为ACC(60.97%,25/41),ATC(2.44%,1/41),无突变(36.58%,15/41)。LiPA技术检测、药物敏感性试验和基因测序的结果基本一致。结论结核分枝杆菌katG基因突变的LiPA技术敏感性高,特异性强,可用于结核分枝杆菌的快速药物敏感性试验评价。
曾涛朱中元张荣意
关键词：结核分枝杆菌异烟肼KATG
结核分枝杆菌ESAT-6蛋白的表达及纯化研究被引量：1
2008年
目的构建表达结核分枝杆菌ESAT-6蛋白的表达系统,建立表达及纯化方法,为其应用打下基础。方法根据ESAT-6的基因序列设计引物,从结核菌基因组DNA中扩增基因,酶切后插入表达载体,测序证实后转入大肠杆菌JM109菌株,经IPTG诱导表达,产物经谷胱甘肽-琼脂糖凝胶法纯化。结果ESAT基因产物大小、酶切片断大小和载体的大小与设计一致、ESAT-6基因测序的结果与目的基因完全符合。表达纯化的蛋白的大小与蛋白质分子量标准比较一致。结论构建结核分枝杆菌ESAT-6蛋白的表达载体成功,纯化出目的蛋白。
马宏伟朱中元罗越华王海波黄惜刘贤杰
关键词：结核分枝杆菌纯化
TB16.3重组蛋白在结核感染中的诊断价值研究被引量：3
2013年
目的通过构建结核分枝杆菌蛋白TB16.3的原核表达载体并表达纯化,对其检测抗体的性能进行评价。方法用PCR法从结核菌H37Rv基因组DNA扩增TB16.3基因,连接到表达载体PET-30a上,在大肠杆菌中表达;组氨酸标签镍柱层析纯化重组蛋白。结果建立ELISA方法检测116份TB患者和96份健康对照者血清中的抗结核菌TB16.3抗体。构建了表达TB16.3的大肠杆菌工程菌,发现目的蛋白主要以可溶形式存在。诱导剂IPTG浓度为1mmol/L,37℃培养5h可获得最大量表达。而在28℃时重组蛋白为可溶形式表达。用重组TB16.3蛋白,ELISA方法检测118份TB患者和96份健康者血清,敏感性、特异性和调整一致率分别为72.9%、86.5%和79.6%。抗TB15.3抗体的敏感性、特异性和调整一致率分别为46.6%、99.0%和76.0%。抗CFP-10的敏感性、特异性和调整一致率分别为75.4%、55.2%和65.7%。结核病患者抗Rv2626C抗体阳性率(44.1%)显著低于其在正常对照的阳性率(75.0%,χ2=20.8,P<0.01)。TB15.3和TB16.3等量包被检测,敏感性、特异性和一致率分别达69.4%、96.9%和83.7%,检测非TB肺部疾病患者,其抗体阳性率仅为9.6%,特异性为90.4%。TB15.3和TB16.3混合后同时包被检测,结合TB15.3单独检测的结果,则敏感性、特异性和一致率分别达82.2%、95.9%和88.9%,一致率为最高。结论目的基因克隆入宿主菌中并表达成功,获得制备上述4种蛋白的最适条件。获得的重组TB16.3、CFP-10和TB15.3蛋白可能成为结核病血清学诊断的抗原或者抗原组合。Rv2626C抗体可能被用于结核患者恢复期的评估。
朱中元刘元王海波肖劲逐邱一帆颜磊陈德刘爱国杨欣
关键词：结核分枝杆菌血清学诊断
表达结核分枝杆菌融合蛋白的DNA疫苗构建及免疫保护被引量：5
2006年
目的评价构建的结核DNA疫苗pVS3in1免疫的小鼠体外产生细胞因子能力和抵抗结核分枝杆菌H37Rv攻击的效果。方法将结核菌mtb8.4、Mr38 000和ag85b插入pVAX1载体,构建表达结核菌Mtb8.4-Mr38 000 CTL表位-Ag85B融合蛋白的DNA疫苗pVS3in1。将雌性C57BL/6小鼠分成5组,每组20只,分别用pVS3in1、pVAX1、pIL2S和PBS免疫3次,每隔2周。另一组用BCG(105CFU)皮内免疫1次。每组10只鼠在最后1次免疫后,培养脾细胞,检测上清液细胞因子。另10只用结核菌H37Rv经静脉攻击,2周后取脾、肝和肺培养结核菌并计数。结果pVS3in1组鼠脾细胞培养上清液mIL-2和mIFN-γ含量分别为(379.6±58.2)pg/mL和(529.7±63.7)pg/mL,显著高于3个阴性对照组(P<0.001),与BCG组无显著性差异(P>0.05)。5组的mIL-6和mIL-10无显著性差异。pVS3in1组的脾、肝和肺结核菌载量分别为(17 443.6±3 202.5),(19 047.2±3 395.5)和(14 822.2±2 882.2)CFU/g,低于pVAX1、pIL2S和PBS等3组相应器官的载量(P<0.001),仅脾菌落数显著高于BCG组。结论pVS3in1能够刺激机体产生抗结核菌所需的Th1型免疫应答,诱导小鼠抵抗H37Rv攻击的能力与BCG相当。
朱中元王海波谢勇陈英兰郑冰冰张春发张颖
关键词：结核DNA疫苗融合蛋白细胞因子免疫保护
透析对慢性肾功能衰竭患者免疫功能的影响
1994年
免疫功能受损是慢性肾功能衰竭(CRF)患者易招致继发性感染的重要原因。为此,我们观察了CRF患者的几项细胞免疫和体液免疫指标,并与透析后自身和正常人进行对比。
唐文琏孙道昆朱中元屈燧林姚平
关键词：肾功能衰竭血液透析免疫功能
结核杆菌融合蛋白DNA疫苗构建及免疫保护研究
2006年
目的:评价结核DNA疫苗免疫鼠产生细胞因子和抵抗结核分枝杆菌攻击的能力。方法:将结核菌Mtb8.4基因和谷胱甘肽S转移酶基因插入pVAX1载体,构建表达Mtb8.4和GST融合蛋白的DNA疫苗pVS8.4G。小鼠分成5组,用pVS8.4G、pVAX1、pIL2S 100μg和PBS 0.1mL各免疫3次,间隔2w。另一组用BCG免疫1次。每组10只鼠在加强后,无菌取脾培养。另外10只小鼠用H37Rv攻击,2w后取脾、肝和肺培养结核菌并计数。结果:pVS8.4G免疫鼠脾细胞培养上清mIL-2和mIFN-γ平均为380.9和422.1pg/mL,显著高于阴性对照组,与BCG组无显著差异。5个组的平均mIL-6和mIL-10无显著差异。pVS8.4G免疫小鼠脾、肝和肺的平均结核菌载量分别为42 093.2、43 264.1和37 264.8CFU/g,低于pVAX1、pIL2S和PBS组相应器官的载量。结论:DNA疫苗pVS8.4G能刺激产生Th1型免疫应答,免疫鼠抵抗H37Rv攻击的能力增强。
朱中元王海波谢勇陈英兰郑冰冰张春发张颖
关键词：结核DNA疫苗免疫保护
比较GGT-H亚型和AFP检测对评估原发性肝癌根治术后生存的价值被引量：1
2011年
目的:比较谷氨酰转肽酶(γ-glutamyl trasnpeptidase,GGT)-H亚型和甲胎蛋白(Alpha-fetoprotein,AFP)检测对评估原发性肝癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)根治术后生存的价值。方法:67例HCC患者于手术当日晨起空腹抽外周静脉血10ml,应用PCR法检测GGT mRNA-H亚型的表达,并采用放射免疫测定法检测AFP水平,评估两者对评估HCC根治术后生存的预测价值。结果6:7例患者1、3、5年累积生存率分别为71.5%、35.1%和18.7%,其中GGT mRNA-H亚型表达阴性者为79.5%、42.3%和22.1%,而表达阳性者为65.5%、24.1%和11.7%(χ2=3.014,P=0.021)。而AFP<400μg/L的HCC患者术后1、3、5年累积生存率分别为76.3%、44.6%和23.9%,AFP>400μg/L的1年、3年、5年累积生存率分别为62.1%、21.1%和13.2%(χ2=2.697,P=0.035)。Cox模型显示GGT mRNA-H对预后的影响也较AFP大(OR=1.672 vs OR=1.145)。结论:外周血细胞GGTmRNA-H亚型表达的检测是评估HCC术后预后的可靠指标,并要优于AFP的检测。
王莹莹曹虹朱中元谢勇
关键词：原发性肝癌
结核分枝杆菌Mtb81蛋白的表达及应用研究被引量：3
2013年
目的克隆结核分枝杆菌Mtb81蛋白的编码基因Rv1837c,并在大肠杆菌中表达、纯化,获得重组蛋白Mtb81。方法以结核分枝杆菌H37Rv基因组为模板,PCR扩增Rv1837c基因序列,克隆入原核表达载体pET-28a,构建重组表达质粒,转化大肠杆菌后用IPTG诱导表达,纯化表达产物,获得重组Mtb81。ELISA检测重组Mtb81蛋白的敏感性和特异性。结果重组质粒pETRv1837c测序表明具有正确的编码序列,质粒构建成功,重组蛋白Mtb81在大肠杆菌中以包涵体和可溶性形式稳定表达。以Mtb81为抗原ELISA检测结核病患者血清抗体总敏感性为20.83%,特异性为95.83%。结论结核分枝杆菌Mtb81重组蛋白能在大肠杆菌工程菌种成功表达,为进一步的应用研究奠定基础。
朱中元杨倩王海波肖劲逐刘爱国邱一帆颜磊陈德杨欣
关键词：结核分枝杆菌克隆
海南黎族人肺结核耐药性分析被引量：1
2011年
目的:探讨海南黎族人肺结核分枝杆菌的耐药性,针对海南黎族人肺结核患者耐药性发生的情况提出相应的措施和建议。方法:分析海南黎族人肺结核患者痰标本分离结核分枝杆菌对异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(SM)、乙胺丁醇(EMB)的敏感性。结果:海南黎族人的耐药率为52.3%,多耐药的菌株显著多于单耐药的菌株(P<0.05)。结论:海南黎族人的结核耐药较为严重,特别是耐多药结核病,所以有效控制耐药结核病是我们工作的紧迫任务。
林容郭禹标陈海朱中元
关键词：结核分枝杆菌耐药性海南黎族
抗结核分枝杆菌抗体检测蛋白芯片的临床应用被引量：6
2005年
目的　验证抗结核分枝杆菌多种抗原的抗体检测蛋白芯片的临床应用价值。　方法　结核病人和正常对照者的血清经芯片识别仪和ELISA同时检测,分析其敏感性、特异性和总符合率。　结果　结核芯片系统检测的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和诊断指数分别为69 .91%、84 .85%、90. 80%、55. 56%和154. 76%。而ELISA法检测的敏感性、特异性分别为66 .81%和86 .14%。两者检测的总符合率为81 .04%。检测结果间差异无显著性(χ2=1. 5,P >0. 05)。　结论　芯片系统检测的敏感性和特异性符合临床检验要求,具有简便、快速和单人份操作的优点,可用于临床辅助诊断结核病人。
王海波朱中元谢勇
关键词：抗结核蛋白芯片分枝杆菌抗体检测预测值
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