沈玄艺
所属机构: 宁波市疾病预防控制中心 所在地区: 浙江省 宁波市 研究方向: 医药卫生 发文基金: 宁波市自然科学基金
相关作者
徐景野 作品数:225 被引量:728 H指数:12 供职机构:宁波市疾病预防控制中心 研究主题:耐药性 食物中毒 副溶血性弧菌 毒力基因 金黄色葡萄球菌 章丹阳 作品数:48 被引量:246 H指数:9 供职机构:宁波市疾病预防控制中心 研究主题:副溶血性弧菌 毒力基因 耐药性 脉冲场凝胶电泳 基因分型 宋启发 作品数:81 被引量:217 H指数:8 供职机构:宁波市疾病预防控制中心 研究主题:副溶血性弧菌 铜绿假单胞菌 耐药 毒力基因 耐药性分析 金春光 作品数:93 被引量:273 H指数:7 供职机构:宁波市疾病预防控制中心 研究主题:铜绿假单胞菌 脉冲场凝胶电泳 耐药性 O139群霍乱弧菌 检出 郑剑 作品数:57 被引量:188 H指数:7 供职机构:宁波市疾病预防控制中心 研究主题:铜绿假单胞菌 脉冲场凝胶电泳 耐药性 基因分型 辛基酚
应用筛检方法快速检测小海产品中副溶血性弧菌 被引量:20 2011年 目的:研究筛检海产品中副溶血弧菌方法,提高检出率和检测速度。方法:用PCR快速筛检,GB法寻找目标菌,以生化分步筛检作出初步确定,再经系统生化鉴定确认之。结果:356份海产品经筛检检出副溶血弧菌141株,检出率为39.61%,其中PCR一次性检出了141株副溶血性弧菌阳性基因,GB法分离到115株副溶血性弧菌,26株通过二次增菌才分离到,生化筛检与系统特殊化一致率达100%,检出带TDH毒力基因副溶血性弧菌5株,未检出TRH毒力基因。结论:应用发现PCR、GB和典型生化分步联合的筛检方法,可用于筛检食品中副溶血弧菌,具有快捷、大容量、方便的优点,为进一步开展食品多病原污染物监测工作打下了基础。 周伟艳 徐景野 章丹阳 沈玄艺 朱国良 胡荣华关键词:副溶血弧菌 海产品 筛检方法 毒力基因 宁波副溶血性弧菌临床株毒力基因与多位点序列分型研究 被引量:4 2015年 目的了解宁波地区副溶血性弧菌临床分离株毒力基因分布以及分子分型特征。方法收集来源于食物中毒和散发腹泻患者副溶血弧菌菌株,利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测耐热直接溶血素基因(tdh)和耐热直接溶血素相关溶血素基因(trh),利用多位点序列分型(multi-locus sequence typing,MLST)进行分子分型。结果2006—2012年共分离临床株248株,选择48株进行毒力基因和MLST分型研究。42株tdh+,为93.75%;11株trh+,为22.92%。48株菌株可分为9个ST型和一个未分型,ST3有32株,占66.67%;ST265有5株,占10.42%;ST120有3株,占6.25%。ST3克隆群中tdh+/trh-菌株有25株,占78.16%。与全国其他地区比较,在宁波临床株中发现ST262。结论 tdh+型是宁波地区副溶血性弧菌优势菌株。有9种ST型,以ST3克隆为主,其次为ST265和ST120。ST3克隆中以tdh+/trh-型为主。另发现1个独特的ST262菌株。 高红 宋启发 徐景野 郑剑 沈玄艺关键词:副溶血性弧菌 多位点序列分型 金黄色葡萄球菌肠毒素与脉冲场凝胶电泳分型分析 被引量:2 2020年 目的了解不同来源金黄色葡萄球菌(AS)携带葡萄球菌肠毒素(SE)基因种类与同源性,为防控AS性食物中毒提供依据。方法AS分离、鉴定和确认采用GB/T 4789.10方法;9种SE测定采用PCR法;PFGE分型采用CDC Pulse Net USA方法;药敏试验采用ABTGP-67卡法。结果63株AS检出9个SE基因型。中毒组检出a、b、d、e、h和j型6个SE;食品和院感组检出除d型外的8个SE基因,以b型检出最多,达74.60%。PFGE分型中毒组AS(包括食品分离株)其条带100%相同,食品和院感组分为12个PFGE型,有8株AS的PFGE带型与中毒组的带型相同。3种来源AS对青霉素G抗生素均有较高的耐药性。中毒组AS仅对青霉素G耐药;食品和院感组对7种抗生素耐药率超过50%,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分别为12.00%和42.31%,以院感株耐药性最强,其次为食品株和中毒株。结论SE和PFGE对AS食物中毒病因关联性追踪有重要的意义,能快速查明食物中毒原因,提高食物中毒调查的查明率。 周伟艳 郑剑 高红 叶硕 沈玄艺 许小敏关键词:金黄色葡萄球菌 脉冲场凝胶电泳分型 宁波地区腹泻患者细菌性病原检测与分析 被引量:12 2014年 目的了解宁波地区腹泻患者病原菌构成和耐药性,为防控感染性腹泻提供依据。方法病原菌检测采用直接分离与增菌分离相结合的方法;细菌筛检和鉴定采用生化和生化鉴定试剂条API等法,鉴定到种、群;病原菌血清分型采用血清凝集法;药敏试验采用K-B法;耐药基因检测采用PCR法,统计学分析采用SPSS 11.0软件包进行,率的比较采用χ2检验和F分析。结果 9 256份标本中检出8类16种3 473株病原菌,检出率为37.52%,其中,副溶血性弧菌、沙门菌和气单胞菌的检出率分别为16.13%(1 493/9 256)、3.99%(369/9 256)和3.44%(318/9 256),副溶血性弧菌的检出率明显高于其他病原菌(χ2=21.68,P<0.01);血清分型发现副溶血性弧菌的O3群(349/480)、沙门菌的甲型副伤寒菌(168/369)、志贺菌的褔氏志贺菌(117/175)、致病性大肠埃希菌O119(28/66)为各病原菌的优势菌,检出了褔氏1C、2C和4C志贺菌新亚型;药敏试验显示病原菌对大多数抗生素敏感,但有45株为多重耐药菌,其中气单胞菌23株、志贺菌8株、致泻性大肠埃希菌8株、金黄色葡萄球菌3株、变形杆菌2株、沙门菌1株,占总菌数的2.45%,检出了bla-TEM、sull和aacc等3种耐药基因。结论宁波地区感染性腹泻病原构成复杂,副溶血性弧菌是最主要的流行病原菌;检出褔氏C型志贺菌提示其血清型可能或正在转换,需加强对志贺菌变迁的监测,以预防疾病的暴发;致病性不强的气单胞菌和类志贺邻单胞菌检出率较高,应引起关注;耐药菌株中有2.45%的病原菌为超广谱β-内酰胺酶(ESBL)菌株,涉及多个菌属,提示临床治疗中合理用药是减少耐药菌的传播和扩散的关键。 周伟艳 郑剑 沈玄艺 徐景野关键词:感染性腹泻 病原菌 药敏 浙江省宁波市多重耐药肯塔基沙门菌的检出及病原学分析 被引量:9 2018年 目的研究浙江省宁波市市售鸡肉与腹泻患者粪便中分离到的多重耐药肯塔基沙门菌的分子分型及耐药谱特征。方法采用经典血清学方法鉴定肯塔基沙门菌的血清学分型。微量肉汤稀释法检测肯塔基沙门菌对12种抗生素的敏感性。脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析不同来源的2株肯塔基沙门菌的分子分型特征。聚合酶链式反应(PCR)检测菌株的耐药基因gyrA、bla_(CTX-M14-like)、bla_(CTX-M15-like)、bla_(TEM)与bla_(OXA)。结果 2株不同来源的肯塔基沙门菌耐药谱完全相同,均对9种抗生素耐药,为多重耐药沙门菌,且均为ESBLs表型阳性。2株肯塔基沙门菌双酶切(XbaⅠ与BlnⅠ)PFGE分型指纹图完全相同,具有相同PFGE分型。喹诺酮耐药基因gyrA发生83、87位氨基酸密码子点突变;ESBLs决定基因bla_(CTX-M14-like)、bla_(CTX-M15-like)、bla_(TEM)均阳性,bla_(OXA)阴性。结论在宁波市售鸡肉样品和临床腹泻患者粪便样品中检出含环丙沙星高水平耐药在内的多重耐药肯塔基沙门菌,PFGE分子型别一致,说明该型多重耐药肯塔基沙门菌已造成散发病例感染。应该加强多重耐药肯塔基沙门菌在禽类养殖业与健康人群中传播的监测。必须规范禽类养殖业对于禽用抗生素的合理使用,防止出现更多的多重耐药沙门菌。 杨元斌 高红 章丹阳 闫鹏 沈玄艺 宋启发关键词:多重耐药 脉冲场凝胶电泳 药物敏感性试验 环丙沙星 副溶血性弧菌多位点序列分型方法的建立与应用 被引量:8 2016年 目的应用多位点序列分型(multi-locus sequence typing,MLST)技术对副溶血性弧菌进行基因分型,探讨菌株间的内在联系与同源性,分析其优势型。方法收集2006-2012年,宁波市食物中毒和散发腹泻患者副溶血性弧菌48株,用生化鉴定确定其表型;用MLST方法对菌株进行基因分型。结果 48株副溶血性弧菌分出9个ST型和1个未定型,其中ST3 32株(66.67%);ST265 5株(10.42%);ST1203株(6.25%);ST8 2株(4.17%);ST262 1株(2.08%);ST199 1株(2.08%);ST332 1株(2.08%);ST527 1株(2.08%);ST189 1株(2.08%);未定型1株(2.08%)。1株副溶血性弧菌的等位基因分别为dnaE234、gyrB4、recA162、dtdS222、pntA、pyrC184和tnaA79,与MLST数据库中无匹配,为1个国内新的副溶血性弧菌ST型(ST262)。结论宁波市副溶血性弧菌流行株以ST3克隆群为主。首次从国内副溶血性弧菌中分离出ST262型,有进一步分析研究意义。MLST分型能发现副溶血性弧菌间的关联,并与国内外菌株进行比较,发现新的ST型,是一种较好的分型方法。 闫鹏 高红 林文凭 周伟艳 沈玄艺 徐景野关键词:多位点序列分型 副溶血性弧菌 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌基因分型及耐药性研究 被引量:6 2009年 目的:研究医院重症监护病房(ICU)、烧伤病房环境中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的分子流行病学特征。方法:采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型技术对MRSA进行同源性分析,K-B纸片扩散法进行药敏试验。结果:28株MRSA的PFGE指纹图谱显示7个基因型(A-G),以A型(8株)和E型(6株)为主,分别来自烧伤病房和ICU。其对青霉素、氨苄青霉素、阿莫西林、苯唑西林、红霉素、环丙沙星、诺氟沙星、氧氟沙星等8种抗生素耐药率均为100%,对头孢西丁、庆大霉素、四环素、氯霉素、复方新诺明耐药率分别为96.4%、67.9%、64.3%、42.9%、14.3%,仅对万古霉素100%敏感。结论:MRSA耐药性较为严重,其PFGE基因分型阐述了烧伤病房和ICU分别存在MRSA单克隆流行趋势。 林辉 金春光 郑剑 闫鹏 章丹阳 沈玄艺关键词:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 脉冲场凝胶电泳 基因分型 耐药性 浙江省宁波地区腹泻患者中副溶血性弧菌检测与分析 被引量:7 2012年 目的了解腹泻患者中副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)携带、消长情况,建立分子溯源方法,发现流行优势型,分析疾病诱发因素,为控制副溶血性弧菌引起的食物中毒提供依据。方法腹泻患者中副溶血性弧菌分离采用筛检法;采用API生化鉴定系统进行菌株鉴定;用血清凝集试验对菌株进行血清分群;药敏试验采用K-B法;利用脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)进行分子分型;聚合酶链反应(polymerase chainreaction,PCR)检测细菌毒力基因。结果从6216份腹泻患者标本中检出副溶血性弧菌901株,占检出致病菌的63.45%。副溶血性弧菌生物学性状典型,对氨苄西林等青霉素类抗生素的耐药率高,但对其他大多数抗生素敏感。480株副溶血性弧菌分成6个血清群,O∶3血清群占72.71%,为流行优势群。根据PFGE图谱带型变化可分为19个不同的型别,其中食物中毒来源的菌株PFGE带型集中。tdh毒力基因阳性的副溶血性弧菌396株,阳性率为70.71%;trh毒力基因阳性的副溶血性弧菌79株,阳性率为14.11%;tdh、trh毒力基因均阳性的副溶血性弧菌18株,阳性率为3.21%;tdh阳性的副溶血性弧菌中有365株神奈川试验阳性,占73.14%。结论宁波地区腹泻患者由副溶血性弧菌引起的比例较高,O3血清群为优势血清群。PFGE分型方法准确性、特异性高、重复性好、结果容易判读,分型效果更为明显,食物中毒来源的菌株带型集中,可用于确定菌株间的聚集性关系,提示传染源和传播途径,明确食物中毒是否为同一起暴发事件。患者中分离到的副溶血性弧菌大多数为带毒株,具有致病能力,与海产品和环境株不同,可用β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类等抗生素作为临床治疗用药。 金春光 沈玄艺 章丹阳 杨元斌 徐景野关键词:副溶血性弧菌 脉冲场凝胶电泳分型 毒力基因 耐药性 宁波地区海产品中副溶血性弧菌分布与研究 被引量:6 2012年 目的了解宁波地区海产品中副溶血性弧菌的分布,菌株血清型、PFGE型别及产毒基因等特征,为防控副溶血性弧菌引起的食源性疾病提供依据。方法用PCR筛检与GB法相结合方法分离细菌;用标准血清和PFGE对菌株进行分群和基因分型;用PCR方法检测tdh和trh毒力基因;用K-B法进行耐药性测定。结果从3 525份海产品中检出1460株副溶血性弧菌,检出率为41.42%;象山、宁海检出率分别为73.72%和70.69%,与其他县(市)区差异有统计学意义(χ2=42.694,P<0.01);560株副溶血性弧菌分出10个血清群,0∶6群和0∶5群为流行优势血清群;菌株对氨苄西林耐药率达92.64%,但对常用抗生素均敏感;450株副溶血性弧菌检出5株带tdh的,阳性率为1.11%,未检出trh毒力基因。依据PGFE带型差异将330株副溶血性弧菌分为29个型。结论在海产品中副溶血性弧菌带菌率较高,是引发疾病的高危食品;菌株的流行优势群型较分散;可用常用抗生素治疗;菌株带tdh和trh毒力基因较低,根据该特征可将副溶血性弧菌分为致病的和非致病两类。 徐景野 许国章 闫鹏 杨元斌 沈玄艺 章丹阳关键词:副溶血性弧菌 海产品 耐药性 毒力基因 一起食物中毒事件中副溶血弧菌的分子生物学、血清学和毒力研究 被引量:2 2007年 对分离自一起食物中毒事件中的31株副溶血弧菌的tdh和trh毒力基因进行了检测,同时采用血清学分型方法和ERIC-PCR基因分型方法进行克隆分析。分离菌株来自病例肛拭(33份)、食品(59份)和餐具涂抹(12份)标本。生化反应鉴定采用VITEK系统和API20E生化鉴定条。共分离得到31株副溶血弧菌,其中1株来自食品,30株均分离自患者肛拭。 沈玄艺 徐景野 闫鹏 宋启发 林辉关键词:食物中毒事件 副溶血弧菌 血清学 分子生物学 基因分型方法