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吴春利
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- 所属机构:深圳市疾病预防控制中心
- 所在地区:广东省 深圳市
- 研究方向:医药卫生
- 发文基金:深圳市科技计划项目
相关作者
- 张仁利
- 作品数：424被引量：1,126H指数：15
- 供职机构：深圳市疾病预防控制中心
- 研究主题：弓形虫 广州管圆线虫 日本血吸虫 CALPAIN 基因克隆
- 吕星
- 作品数：84被引量：379H指数：10
- 供职机构：深圳市疾病预防控制中心
- 研究主题：流感 流感病毒 B型流感病毒 甲型H1N1 RT-PCR快速检测
- 房师松
- 作品数：190被引量：709H指数：14
- 供职机构：深圳市疾病预防控制中心
- 研究主题：流感病毒 流感 B型流感病毒 禽流感病毒 甲型流感病毒
- 阳帆
- 作品数：129被引量：510H指数：11
- 供职机构：深圳市疾病预防控制中心
- 研究主题：登革热 流行病学 肠道病毒71型 E基因 病原学
- 程小雯
- 作品数：96被引量：641H指数：12
- 供职机构：深圳市疾病预防控制中心
- 研究主题：流感病毒 流感 B型流感病毒 RT-PCR快速检测 流行病学
- 聚合酶亚基间相互作用的抗流感病毒药物筛选体系的建立被引量：2
- 2011年
- 目的构建基于聚合酶亚基间相互作用的双靶点特异性抗流感病毒药物筛选酵母双杂交体系。方法将流感病毒A/PR8/34株PB2、PA基因克隆至载体pGADT7,PB1基因克隆至载体pGBKT7,将构建的酵母双杂交重组质粒PB2-pGADT7、PB1-pGBKT7和PA-pGADT7、PB1-pGBKT7分别共转化酵母AH109,利用SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/X-α-Gal培养基筛选阳性菌落。结果 PB2-PB1共转化效率为1.4×104cfu/μg,PA-PB1共转化效率为1.6×104cfu/μg;双靶点特异性的酵母双杂交系统在SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/X-α-Gal上均有兰色菌落生长;PB2、PB1、PA基因PCR结果均为阳性。结论初步构建了流感病毒聚合酶亚基间相互作用的酵母双杂交系统,可用于抗流感病毒靶点特异性的药物高通量筛选。
- 房师松何建凡程小雯刘涛吕星吴春利王昕张仁利赵树进
- 关键词：酵母双杂交蛋白质相互作用药物筛选
- 兔源性Ⅱ型prM多抗对Ⅰ型登革病毒无增强活性的中和作用被引量：4
- 2017年
- 目的从Ⅰ型登革病毒(dengue virus,DENV)感染患者血清中分离病毒,并探究Ⅱ型登革病毒prM多抗对该病毒体外感染细胞的影响。方法用C6/36细胞分离并扩大培养Ⅰ型登革患者血清中的登革病毒,根据细胞病变收取病毒,空斑实验测定病毒滴度。免疫荧光、流式细胞术及qRT-PCR检测病毒对细胞的感染,空斑减少中和实验和抗体依赖增强感染实验测定Ⅱ型登革病毒prM抗体对病毒的中和及增强活性。结果分离扩大培养了一株Ⅰ型登革病毒,滴度达到8×10~7pfu/m L。登革病毒可以在K562细胞复制增值,ana-1细胞可以主动吞噬病毒但病毒在此细胞内不复制。0.1、1μg/m L的多抗与病毒孵育后感染BHK细胞产生的空斑数与未加入抗体的空斑数相比,差异有统计学意义(P<0.001)。另外,prM多抗并没有增加登革病毒对K562细胞的感染。结论成功扩大培养DENVⅠ毒株,体外实验结果证明兔源性prM多抗是一种无增强活性的中和型抗体。
- 王淼阳帆黄达娜黄亚兰吴春利王超白芳黄柏诗张仁利
- 2012-2013年深圳市呼吸道合胞病毒流行规律及分子变异分析被引量：8
- 2014年
- 目的：初步了解深圳市呼吸道合胞病毒的流行规律及分子变异特点。方法荧光RT-PCR对流感样病例样本进行初筛后，通过巢式RT-PCR对病毒G蛋白基因C端的可变区进行扩增，利用MEGA等软件进行分子变异分析。结果呼吸道合胞病毒在深圳的流行较为普遍，流行高峰一般出现在春季和夏秋季；流行的病毒有A、B两个亚型， NA1和BAⅨ分别是其流行株系的基因型；病毒G蛋白C端的变异位点较为散乱，少数变异导致了病毒糖基化位点消失。一株包含24个氨基酸插入序列的新型重组毒株出现在2013年，此重组株很有可能是由国外传入我国。结论呼吸道合胞病毒在深圳存在持续而广泛的流行，而且病毒仍处在不断的进化和变异之中。
- 吴春利陈洁润阳帆黄达娜李玥张仁利
- 关键词：呼吸道合胞病毒分子变异
- 2013年深圳市新甲型H1N1流感病毒分子变异研究被引量：2
- 2015年
- 目的了解2013年深圳市新甲型H1N1流感病毒的分子变异情况。方法用MDCK细胞进行流感病毒分离,收获病毒后提取病毒RNA作为模板,利用RT-PCR对其HA基因进行扩增,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳鉴定后测序,测序结果用Clustal W2和MEGA3.1软件进行序列分析。结果 2013年的深圳毒株与同年国内外的流行株差异不大,但与同期国际疫苗株A/California/7/2009相比,在进化树上已经产生了明显的分离,且出现了2个不同的进化分支;HA分子有多个氨基酸位点发生了变异,其中有4个变异位点位于抗原决定簇区域内:抗原决定簇Sa的135位点由N变成了S,163位点的K出现了N/Q/I的多元突变;抗原决定簇Sb的185位点由S变成了T;抗原决定簇Ca1的203位点由S变成了T,这些变异的出现会导致病毒抗原性的改变。结论 2013年深圳市流行的新H1N1病毒有较大可能会形成一个新的优势流行株。
- 吴春利阳帆黄达娜李玥唐屹君张仁利
- 关键词：流感病毒分子变异
- 深圳市肾综合征出血热患者汉坦病毒基因特征研究
- 2016年
- 目的 研究深圳市引起肾综合征出血热（HFRS）的汉坦病毒主要型别及分子特征,为该市汉坦病毒的防制提供依据.方法 收集各医院送检HFRS患者急性期血清标本,提取血清中病毒RNA作为模板,采用逆转录-套式PCR扩增汉坦病毒基因组M片段G2区基因并进行序列测定,对汉坦病毒进行基因分型和同源性分析.结果 深圳市HFRS病例男性多于女性,患者发病年龄主要集中在20-60岁,其中20-49岁病例数最多,共发病242例,占发病总数的85.82％.从282例标本中用HTN型特异性引物扩增阳性4例,占1.42％;用SEO型特异性引物扩增阳性50例,占17.73％;总阳性率为19.15％.序列比较分析发现,深圳地区流行的SEO型汉坦病毒核苷酸序列的差异相对较小,其基因的离散度为0％-4.9％.从种系发生树看这些病毒分布在一个分支上,均为S2亚型.HTN型汉坦病毒的变异率较高,其基因的离散度为6.7％-21.0％,二例为H7亚型,二例为H9亚型,均为深圳市首次报道.结论 不同年份引起深圳地区HFRS的汉坦病毒仍以SEO型为主,且病毒变异较小,稳定性较高.首次发现HTN型病例存在.结合流行病学调查资料,证实HTN病例均为输入性病例.
- 阳帆张仁利黄达娜吴春利李玥唐屹君
- 关键词：肾综合征出血热汉坦病毒基因分型
- 2008年深圳市甲3亚型流感病毒基因特异性分析
- 2010年
- 目的了解2008年深圳市H3N2亚型流感流行及病毒变异情况。方法用狗肾传代细胞(MDCK)和鸡胚进行流感病毒分离,收获病毒后提取病毒RNA,进行逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),扩增产物经琼脂糖凝胶电泳鉴定后送大连宝生物公司纯化及测序,测序结果用SIMMONIC软件和MEGA3.1软件进行序列分析。结果深圳2008年流行的H3N2亚型流感病毒血凝素与深圳2007年流行的差异不大,而与同期疫苗毒株A/Wisconsin/67/2005比较有一定的差异,B抗原决定簇上有1个位点发生替换,158位R替换了K;1个糖基化位点增加,在122位氨基酸由D变成了N;与世界卫生组织推荐的2009年流感疫苗毒株比较差异不大。结论深圳市2008年流行的H3N2亚型流感病毒并未形成新的变种,其漂移趋势与世界H3N2亚型流感漂移趋势一致。
- 肖丽霞刘涛吴春利
- 关键词：H3N2亚型流感病毒
- 双重荧光定量RT-PCR快速检测N1、N2亚型流感病毒的研究被引量：2
- 2012年
- 目的利用荧光定量RT-PCR技术建立快速检测流感病毒N1、N2亚型的方法。方法根据N1、N2亚型流感病毒NA基因的相对保守序列,设计两对引物及其相应的Taqman探针,利用一步法RT-PCR试剂盒建立、优化反应体系后,采用十倍稀释体外转录RNA检验建立体系的灵敏度和重复性并建立相对定量标准曲线;利用多种流感病毒和具有相似临床症状的呼吸道病毒检验建立体系的特异性。结果 N1、N2亚型流感病毒的检测灵敏度为10拷贝/μl,扩增效率分别为102.21%和101.78%,标准曲线相关系数大于99%,重复性良好,特异度实验未发现有非特异性扩增。结论双重荧光定量RT-PCR技术可以快速、准确的检测N1、N2亚型流感病毒。
- 黄亮张红宇王婷房师松王昕李健雄程小雯吕星吴春利张仁利程锦泉
- 关键词：流感病毒
- 深圳居民甲型H1N1流感抗体水平影响因素的研究被引量：2
- 2014年
- 目的 通过检测深圳居民血清中甲型H1N1流感抗体水平,了解相关的影响因素,为有效预防和控制甲型H1N1流感疫情提供有效科学依据. 方法 随机选取480位深圳居民作为观察对象,采用血凝抑制方法进行甲型H1N1流感抗体水平检测.并进行问卷调查,用SPSS16.0软件对血清抗体水平与不同流行病学指标之间进行相关因素分析. 结果 通过研究发现,年龄和甲流疫苗接种史与血清中甲型H1N1流感抗体水平显著性相关.6～15岁人群与已接种甲流疫苗人群血清中的甲型H1N1流感抗体阳性率显著性高于其它人群,阳性率分别是34.1％和48.1％.所有调查对象中,甲型H1N1流感疫苗接种率较低,仅为11.25％,6～15岁人群的疫苗接种率最高,为41.76％. 结论 青少年为甲型H1N1流感高危人群,加强对该人群的免疫接种,可对甲型H1N1流感的疫情控制起到显著成效.
- 黄福新吕星程小雯吴春利
- 关键词：甲型H1N1流感抗体水平影响因素
- 1995-2007年深圳市H1N1流感病毒血凝素基因的序列分析
- 2009年
- 目的研究1995-2007年深圳市流行的H1N1流感病毒血凝素（HA）的基因特性。方法选取在该期间分离培养到的64株H1N1流感病毒，对其进行HA片段核苷酸序列测定并推导出其氨基酸序列，用Simmonic软件和Mega软件对其进行分析。结果深圳市H1N1流感毒株在进化树上可以划分为A、B、C三个分枝。部分2005-2006年毒株与2001年毒株在同一分枝上。通过同源性分析发现部分WHO所推荐的疫苗株在时间上滞后于深圳株。深圳H1N1株的4个抗原决定簇及受体结合位点均发生了氨基酸的替换。除1995年外其余年份的毒株均在137位上发生了氨基酸的缺失。结论1995-2007年深圳市H1N1毒株氨基酸的变异主要集中在抗原决定簇及受体结合部位。并且抗原决定簇的变异活跃区域随时间的推移发生了转移。
- 吕星程小雯吴春利何建凡房师松
- 关键词：H1N1HA基因
- 深圳市不同人群和鸡群感染禽流感病毒H9N2亚型状况研究被引量：3
- 2005年
- 目的分析禽流感病毒H9N2亚型毒株在深圳市不同人群和鸡群中的感染状况。方法采用常规的鸡胚双腔法分离流感病毒;采用红细胞凝集抑制试验(HI)和中和试验测定流感病毒抗体。结果从深圳市农贸市场300只鸡只样本中分离到27株H9N2亚型流感病毒,其抗体阳性率为7%,但未能从人群中分离到H9N2亚型流感病毒。人群血清中其抗体阳性率与职业高度相关,与鸡只密切接触的人群明显高于非密切接触的人群。结论禽流感病毒H9N2亚型对人群和鸡群均易感,可通过近距离的密切接触传播;推测人所感染的H9N2可能主要来源于鸡只等家禽。
- 何建凡程小雯吕星吴春利逯建华
- 关键词：抗体
