吴春芳
作品数: 71被引量:365H指数:9
  • 所属机构:上海交通大学医学院附属瑞金医院
  • 所在地区:上海市
  • 研究方向:医药卫生
  • 发文基金:上海市教育委员会重点学科基金

相关作者

陆国平
作品数:532被引量:2,830H指数:25
供职机构:复旦大学附属儿科医院
研究主题:儿童 动脉粥样硬化 脓毒症 儿科 体外膜肺氧合
龚兰生
作品数:337被引量:3,292H指数:28
供职机构:上海交通大学医学院附属瑞金医院
研究主题:高血压 心肌梗塞 冠心病 原发性高血压 动脉粥样硬化
徐志红
作品数:80被引量:304H指数:8
供职机构:上海交通大学医学院附属瑞金医院
研究主题:同型半胱氨酸 非小细胞肺癌 急性心肌梗塞 曲古菌素A 冠状动脉造影
丁怀翌
作品数:31被引量:82H指数:4
供职机构:上海交通大学医学院附属瑞金医院
研究主题:冠心病 脂蛋白 心肌病 前列腺素 冠脉病变
陈良华
作品数:89被引量:413H指数:11
供职机构:山东省立医院
研究主题:动脉粥样硬化 PAI-1 纤溶酶原激活物抑制物-1 家兔动脉粥样硬化 普伐他丁
人血小板内皮舒张因子合酶互补脱氧核糖核酸克隆
1996年
目的:建立人血小板互补脱氧核糖核酸(cDNA)文库,筛选出血小板内皮舒张因子合酶(NOS)cD-NA克隆。方法:用新鲜血小板悬液纯化血小板,提取总核糖核酸(RNA),以RNA为模板合成cDNA,将cDNA连接λgt11臂,用噬菌体包装蛋白包装,然后转染宿主菌Y1090建库。用地高辛标记探针进行杂交,挑出阳性克隆,扩增后纯化脱氧核糖核酸(DNA)。将重组DNA用EcoRI酶解,电泳,并将插入片段切下,纯化得到内皮舒张因子合酶cDNA。结果:从血小板中获得RNA约1.5mg,RNA变性电泳可见较清晰的18S和28S条带且无RNA降解。第一条cDNA链产量为1.82μg,第二条链为3.79μg,放射性自显影显示双链cDNA分子大小范围在0.5~5.0kb,大部分位于1.0~4.0kb之间。人血小板内皮舒张因子合酶cDNA克隆约3.0kb左右。结论:人血小板内皮舒张因子合酶cDNA克隆约3.0kb,与其它组织的相似。
王华梁龚兰生孔宪涛蔡伟箐于金德戚文航吴春芳王海英赵函芳陈诗书程枫王亚新卢健
关键词:血小板内皮舒张因子合酶DNA克隆
核因子κB反义和诱骗寡核苷酸对平滑肌细胞增殖的作用
2007年
目的:观察离体血管平滑肌细胞和动物体内转染转录因子核因子κBp65诱骗性寡核苷酸和反义寡核苷酸对平滑肌细胞增殖及大鼠颈动脉球囊损伤后血管新生内膜的干预作用。方法:实验于2001-05/2003-03在上海交通大学医学院细胞生物学实验室和瑞金医院心血管实验室完成。建立大鼠颈动脉球囊损伤模型。SD大鼠126只随机数字表法分为7组,每组18只。正常对照组(除球囊损伤外,其余手术操作与其他组相同),反义组,正义组,诱骗组,诱骗对照组,反义加诱骗联合干预组,模型组。每组又分为术后6h,1,3,5,7,14d6个时相点,每个时相点3只。阳离子脂质体介导的核因子κBp65诱骗性寡核苷酸、反义寡核苷酸转染血管平滑肌细胞及局部定向转送至球囊损伤血管内,观察大鼠颈动脉球囊损伤后5-溴脱氧尿嘧啶掺入试验结果,大鼠颈动脉球囊损伤且转染不同寡核苷酸后的血管增殖标记物检测结果,大鼠颈动脉球囊损伤后核因子κBp65蛋白合成WesternBlot检测结果。结果:纳入动物126只,均进入结果分析。①核因子κB的反义寡核苷酸组、诱骗性寡核苷酸组、反义寡核苷酸加诱骗性寡核苷酸组细胞核蛋白增殖细胞核抗原的表达低于阳性对照组,差异均有显著性意义(分别为348.55±39.63,369.05±71.56,309.33±12.86,635.16±89.95,P<0.05);反义寡核苷酸组低于正义寡核苷酸组,差异有显著性意义(分别为348.55±39.63,752.11±76.43,P<0.05);诱骗性寡核苷酸组低于诱骗对照组,差异有显著性意义(分别为369.05±71.56,818.31±102.29,P<0.05);反义寡核苷酸和诱骗性寡核苷酸联合转染较单独作用显示增强的抗细胞增殖效应趋势,统计学上无差异。②血管球囊损伤后1d5-溴脱氧尿嘧啶掺入明显高于正常对照组和损伤后6h[分别为(22.52±0.21)%,(0.02±0.01)%,(4.16±0.22)%,P<0.05],球囊损伤后3d较其他时间点5-溴脱氧尿嘧啶表达最明显,为(48.71±0.22)%,差异均�
周俊陆国平吴春芳陈桢玥
关键词:血管内膜
自制脂蛋白(a)单克隆抗体的特性鉴定被引量:1
1994年
自制脂蛋白(a)单克隆抗体的特性鉴定上海第二医科大学瑞金医院内科(上海200025)谢玉才,丁怀翌,蔡伟菁,吴春芳,王海英,吴裕,戚文航,龚兰生脂蛋白(a)(Lp(a))是一种独立的脂蛋白,其分子量1.2~1.5×106D,它的脂质成分和低密度脂蛋白...
谢玉才丁怀翌蔡伟菁吴春芳王海英吴裕炘戚文航龚兰生
关键词:脂蛋白单克隆抗体
雷氏丹参片对心力衰竭合并Ⅱ型糖尿病患者炎症因子以及预后的影响
目的:评价丹参片对心力衰竭合并Ⅱ型糖尿病患者肿瘤坏死因子-α(TNF-α),C-反应蛋白 (hs-CRP),6分钟步行距离(6-MWT)等影响机及其长期临床疗效。方法:入选100例并发Ⅱ型糖尿病的心力衰竭患者,随机分为丹...
陈晓文张凤如吴春芳
关键词:肿瘤坏死因子-ΑC-反应蛋白丹参片
转录因子NF-kB对粘附分子及血管新生内膜形成的影响被引量:12
2003年
目的以调节多种增殖因子的核转录因子NF -kB的反义和诱骗性寡核苷酸为干预药物 ,探讨它们单独或联合作用对大鼠颈动脉球囊损伤后血管增殖反应及粘附分子表达的影响。 方法SD大鼠随机分为七组 ,制作血管球囊损伤模型 ;相应时间点处死动物进行检测。 结果模型组、正义组、Scramble组的血管内膜面积、中膜面积、内膜 /中膜在第 5d增加 ,14d达到高峰 ;反义组、诱骗组、反义组 +诱骗组干预后 ,血管上述病理指标明显改善 (P<0 .0 5 )。血管细胞间粘附分子 (VCAM - 1)mRNA表达在血管损伤后 6h即可检测到 ,3、5、7d后持续表达增加 ,14d后表达降低 ;免疫组化显示VCAM - 1蛋白质表达在 14d达到高峰。反义组、诱骗组、反义组 +诱骗组治疗后 ,与模型组、正义组、scramble组相比 ,VCAM - 1mRNA表达和蛋白合成在各时相点均降低 (P <0 .0 5 )。Westernblot检测核蛋白抽提物 ,显示核因子NF -kBp6 5在血管损伤后 6h有一定蛋白表达 ,1d后蛋白表达明显增加 ,至 7d达高峰 ,14d后蛋白表达略降低。反义组、诱骗组、反义组 +诱骗组干预后 ,各时相点蛋白质表达均减弱 (P <0 .0 5 )。 结论转录因子NF -kB调控VCAM - 1基因表达和蛋白质合成 ;球囊损伤后血管壁细胞增殖在不同时相点有动态变化 ;脂质体介导局部转染反义。
周俊陆国平戚文航吴春芳
关键词:颈动脉球囊损伤细胞间粘附分子核转录因子
卡托普利对家兔动脉粥样硬化纤溶酶原激活物抑制物-1基因表达的影响被引量:3
2000年
目的 研究卡托普利对家兔动脉粥样硬化纤溶酶原激活物抑制物 - 1(PAI- 1)基因表达的影响。方法 37只家兔随机分为正常对照组、胆固醇喂养组、卡托普利组 ,饲养 12周。取一段靠近升主动脉起始部的动脉做常规病理切片 ,一近端胸主动脉抽提总RNA ,应用逆转录多聚酶链式反应测定PAI- 1mRNA的表达。结果 卡托普利尽管不影响血浆总胆固醇水平 ,但能抑制动脉粥样硬化的形成。而 3组动脉壁PAI - 1mRNA的相对值分别为 0 5 10± 0 0 75、1 32 1± 0 0 5 6、0 6 87± 0 119,相互间有统计学差异 (P <0 0 1)。结论 卡托普利能抑制动脉粥样硬化时PAI- 1基因的过度表达 ,这种作用可能是血管紧张素转化酶抑制剂治疗效益的重要机制之一。
陈良华陆国平吴春芳龚兰生
关键词:动脉粥样硬化纤溶酶原激活物抑制物卡托普利
丹参片对心力衰竭合并2型糖尿病病人炎症因子及预后的影响被引量:4
2008年
目的评价丹参片对心力衰竭合并2型糖尿病病人肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、高敏C-反应蛋白(hs-CRP)、6min步行距离(6-MWT)等影响及其长期临床疗效。方法入选100例并发2型糖尿病的心力衰竭病人,随机分为丹参组和常规组,各50例。丹参组在常规组治疗基础上加用丹参片(每日3次,每次3片),随访1年。观察治疗前后心功能、6-MWT、超声心动图指标、住院率和病死率以及血清TNF-α、hs-CRP水平。结果两组治疗1年后心功能、6-MWT、超声心动图指标皆明显改善,TNF-α、hs-CRP水平明显下降。与常规组比较,丹参组心功能、6-MWT提高更明显,TNF-α、hs-CRP水平下降更显著。而且丹参组因心血管事件住院率也显著低于常规组。结论在常规西药治疗基础上加用丹参片能抑制并发2型糖尿病的心力衰竭病人炎症反应,改善心功能,提高生活质量,改善预后。
陈晓文张凤如吴春芳
关键词:肿瘤坏死因子-Α高敏C-反应蛋白丹参片
核因子κB对血管成形术后平滑肌细胞增殖和新生内膜形成的影响(英文)被引量:3
2007年
背景:血管壁机械性损伤后的炎症和增殖效应是血管再狭窄的主要原因。核因子κB/Rel家族中的核因子κB在多种细胞类型中表达,激活一系列与血管壁病理生理相关的靶基因。目的:探讨核因子κB的反义和诱骗性寡核苷酸对血管平滑肌细胞增殖以及大鼠颈动脉球囊损伤后血管新生内膜和单核细胞化学趋化因子的作用。设计:随机对照动物实验。单位:上海交通大学医学院附属瑞金医院心内科。材料:3个月龄雄性SD大鼠126只,350~380g。引物合成和寡核苷酸合成:根据文献及国际互联网cDNA文库检索、设计,由上海生物工程公司合成;寡核苷酸合成:全硫代修饰,由上海生物工程有限公司合成。方法:实验于2001-05/2003-03在上海交通大学医学院细胞生物学实验室和瑞金医院心血管实验室完成。采用贴块法原代培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,实验选用3~5代血管平滑肌细胞。检测增殖的平滑肌细胞内增殖细胞核抗原和核因子κB蛋白水平。制作大鼠血管球囊损伤模型。SD大鼠随机分为7组,正常组:除球囊损伤外,其余手术操作同其他组相同;反义组;正义组;诱骗组;Scramble组;反义+诱骗组;模型组。每组分为6个时相点(6h,1,3,5,7,14d),每个时相点3只大鼠。检测血管球囊损伤后新生内膜形成以及单核细胞化学趋化因子1、核因子κB p65和ERK2的表达水平。主要观察指标:①核因子κB p65寡核苷酸对血管平滑肌细胞增殖的效应。②核因子κB p65基因表达定位和蛋白合成。③大鼠颈动脉球囊损伤后病理形态学改变。④单核细胞化学趋化因子1 mRNA表达。⑤免疫组织化学检测球囊损伤后血管壁单核细胞化学趋化因子1的蛋白质表达。⑥Western blot检测球囊损伤后血管壁核因子κB p65,ERK2的蛋白合成。结果:①增殖的平滑肌细胞内增殖标记物增殖细胞核抗原表达增加。②增殖的平滑肌细胞浆、细胞�
周俊陆国平戚文航吴春芳
关键词:NF-ΚΒ寡核苷酸类颈动脉损伤
AMPK活化对同型半胱氨酸诱导的内皮细胞内质网应激的影响
2016年
目的探讨腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)对同型半胱氨酸(Hcy)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)内质网应激信号通路的影响。方法应用AMPK的选择性激活剂5-氨基-4-甲酰胺咪唑核糖核苷酸(AICAR)或AMPK显性失活突变体(AMPK-DN)预处理HUVECs,RT-PCR和Western blot分别检测Hcy孵育HUVECs后,双链RNA依赖的蛋白激酶样内质网激酶(PERK)、翻译起始因子2α(eIF2α)的磷酸化活化,分子信使葡萄糖调节蛋白78(GRP78)以及凋亡信号CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、半胱天冬氨酸蛋白酶12(Caspase-12)的mRNA和蛋白表达变化。结果 AICAR可抑制Hcy诱导的HUVECs内质网应激信号分子的表达;AMPK-DN拮抗了AICAR的抑制效应。结论 AMPK可通过调节内质网应激相关信号通路抑制Hcy诱导的内皮损伤,发挥内皮保护效应。
贾方孙建辉陆国平吴春芳陈桢玥
关键词:腺苷酸活化蛋白激酶同型半胱氨酸内质网应激
转录因子NF-κB和E2F的decoy寡核苷酸抑制血管平滑肌细胞的增殖被引量:2
2006年
目的:探讨转录因子NF-κB和E2F的decoy寡核苷酸单独或联合应用对猪血管平滑肌细胞增殖的抑制作用及其机制。方法:实验于2004-05/2005-08在瑞金医院内科实验室完成。①原代培养小型猪胸主动脉平滑肌细胞,体外合成转录因子NF-κB和E2F的decoy寡核苷酸,将细胞分为6组:正常对照组、NF-κBdecoy寡核苷酸组、E2Fdecoy寡核苷酸组、NF-κB+E2Fdecoy寡核苷酸组、NF-κB错配寡核苷酸组、E2F错配寡核苷酸组,以脂质体为载体转染细胞,采用激光扫描共聚焦显微术观察FITC标记的寡核苷酸细胞内定位情况。②各组细胞经同步化处理后,予体积分数为0.1的胎牛血清刺激,采用四甲基偶氮唑盐法检测NF-κB和E2F的decoy寡核苷酸对细胞增殖的抑制作用。③免疫印迹法检测增殖细胞核抗原表达水平。④流式细胞仪碘化丙啶法及磷脂结合蛋白V法分析细胞周期及细胞凋亡情况。结果:①FITC标记的寡核苷酸主要聚集于细胞核内,转染效率为(46.67±5.77)%。②体积分数为0.1的胎牛血清刺激24h后,NF-κBdecoy寡核苷酸组、E2Fdecoy寡核苷酸组和NF-κB+E2Fdecoy寡核苷酸组均可明显抑制细胞增殖犤(34.96±6.35)%,(38.75±0.14)%,(49.60±5.07)%犦,并且decoy寡核苷酸组抑制作用普遍强于错配寡核苷酸组,联合应用组作用强于单独应用组(P<0.01)。胎牛血清刺激48h后NF-κBdecoy寡核苷酸组和NF-κB+E2Fdecoy寡核苷酸组仍可明显抑制细胞增殖犤(36.35±5.24)%,(42.60±4.21%)犦,但E2Fdecoy寡核苷酸组增殖反而超过正常对照组犤(-24.22±9.68)%犦(P<0.01)。③胎牛血清刺激24h后NF-κB和E2F的decoy寡核苷酸单独或联合应用组均可降低增殖细胞核抗原的表达。④decoy寡核苷酸使停滞在DNA合成前期的细胞百分数增加,早期凋亡增加。结论:在原代培养的猪的血管平滑肌细胞,NF-κBdecoy寡核苷酸和E2Fdecoy寡核苷酸单独或联合应用可以抑制细胞增殖,但E2Fdecoy寡核苷酸单独应用只�
席锐陈桢玥周俊吴春芳陆国平
关键词:寡核苷酸类转录因子