戴菁
作品数： 164被引量：361H指数：11
  • 所属机构:上海交通大学医学院附属瑞金医院
  • 所在地区:上海市
  • 研究方向:医药卫生
  • 发文基金:国家自然科学基金

相关作者

王学锋
作品数：613被引量：2,858H指数：24
供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院
研究主题：基因突变 突变 血友病A 家系 缺陷症
丁秋兰
作品数：260被引量：610H指数：13
供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院
研究主题：基因突变 突变 家系 遗传性 缺陷症
王鸿利
作品数：737被引量：3,848H指数：27
供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院
研究主题：基因突变 突变 凝血因子 血友病A 缺陷症
陆晔玲
作品数：83被引量：147H指数：7
供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院
研究主题：突变 血友病A 家系 基因突变 基因诊断
奚晓东
作品数：90被引量：126H指数：6
供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院
研究主题：整合素 家系 遗传性 基因突变 血友病A
作品列表
抗凝血酶基因G13328A杂合突变导致血栓形成被引量：11
2005年
目的对1个遗传性抗凝血酶(AT)缺陷症家系进行AT抗原(AT∶Ag)、活性(AT∶A)和基因突变检测并对该突变导致的AT结构和功能的变化进行研究。方法采用免疫比浊法和发色底物法分别检测AT∶Ag和AT∶A,用PCR法对先证者AT基因的7个外显子及其侧翼内含子序列进行扩增,PCR产物纯化后直接测序,检测其基因突变。根据基因检测结果,对家系成员相应外显子进行PCR扩增,扩增产物直接测序。用大引物法构建突变的AT表达质粒并瞬时转染COS-7细胞,用ELISA法检测细胞培养上清液和细胞内提取物中AT∶Ag。结果先证者的AT∶Ag和AT∶A分别为179mg/L和42.3%,为Ⅰ型AT缺陷;AT基因测序显示在AT外显子6区存在G13328A杂合突变,导致Ala(GCC)404→Thr(ACC)。对家系成员进行的基因测序显示有3人(Ⅱ2、Ⅱ3、Ⅲ2)存在该突变。突变质粒在细胞培养上清液和细胞内的AT∶Ag分别为正常人的40%和68%。结论该家系为Ⅰ型遗传性AT缺陷症;G13328A杂合突变是导致先证者血栓形成的原因。
周荣富时国朝傅启华王文斌谢爽戴菁丁秋兰胡翊群王学锋邓伟吾王鸿利
关键词：抗凝血酶血栓形成基因突变
两种新突变导致血友病B的分子发病机制研究被引量：4
2010年
目的 对所发现的2种FⅨ基因的新突变Cys82Ser和Ile288Ser进行体外研究,以探讨血友病B的分子发病机制.方法 克隆野生型PcDNA3.1（-）FⅨwt表达载体质粒,以此为模板,采用大引物法构建PcDNA3.1（-）FⅨM1（Cys82Ser）、PcDNA3.1（-）FⅨM2（Ile288Ser）突变表达载体质粒.采用脂质体法将这3种表达载体质粒分别瞬时转染人胚胎肾293细胞（HEK293细胞）和中国仓鼠卵巢细胞（CHO细胞）,同时以PcDNA3.1（-）空载体质粒为空白对照.经体外培养后获得相应的表达蛋白,所得产物分别采用ELISA法检测蛋白抗原 活性测定检测表达蛋白的FⅨ因子活性 免疫荧光染色法检测蛋白在细胞中的定位情况 RT-PCR法检测各培养细胞的FⅨmRNA水平.结果 2种突变体转染细胞的FⅨmRNA水平与野生型无明显区别.以PcDNA3.1（-）FⅨwt转染细胞裂解液和细胞培养上清液中的FⅨ：Ag为100.0%,细胞培养上清液中的FⅨ：C为100.0%,则PcDNA3.1（-）FⅨM1转染细胞裂解液和细胞培养上清液中的FⅨ：Ag分别为（99.4±4.1）%和（27.1±5.2）%,而细胞培养上清液中的FⅨ：C为（8.5±3.2）% PcDNA3.1（-）FⅨM2转染细胞裂解液和细胞培养上清液中的FⅨ：Ag分别为（31.7±2.5）%和（5.3±1.8）%,细胞培养上清液中的FⅨ：C＜1%.细胞免疫荧光试验也证实,转染PcDNA3.1（-）FⅨM1的CHO细胞,其荧光强度与转染PcDNA3.1（-）FⅨwt的CHO细胞相当,转染PcDNA3.1（-）FⅨM2的CHO细胞,其荧光强度明显弱于转染PcDNA3.1（-）FⅨwt的CHO细胞.结论 Cys82Ser突变由于改变了FⅨ的EGF-1区的分子空间构象从而可能导致突变蛋白分泌障碍并存在胞内滞留现象 Ile288Ser突变则可能导致突变蛋白分泌障碍或细胞内降解加速从而引起FⅨ活性降低.
戴菁丁秋兰王学锋王鸿利
关键词：血友病B突变
中国118例颅内静脉窦血栓患者的临床特点及危险因素分析被引量：1
2023年
目的:分析中国颅内静脉窦血栓(cerebral venous sinus thrombosis,CVST)患者的临床特征和血栓危险因素,为该疾病的防治提供参考。方法:纳入2015年1月至2022年12月就诊于上海交通大学医学院附属瑞金医院血栓与止血门诊的118例CVST患者,患者均经2种以上的影像学检查确诊。收集其临床资料,结合实验室检查及易栓症基因Panel筛查结果,采用单因素和多因素Logistic回归分析,探讨CVST患者发生血栓的独立危险因素。结果:118例CVST患者中,88.1%(104/118)的患者初发CVST年龄<45岁。57.6%(68/118)的患者仅经历1次CVST,33.1%(39/118)的患者发生至少2次静脉血栓,37.3%(44/118)的患者除CVST外,还经历了下肢深静脉血栓、肺栓塞等其他部位血栓。CVST累及的各个静脉窦中,上矢状窦最易形成血栓(77/118),有54.2%(64/118)的患者存在多部位静脉窦同时受累。易栓症危险因素筛查显示,70.3%(83/118)的患者至少携带一个较明确的血栓危险因素,遗传性和获得性危险因素的检出率分别为63/118(53.3%)和38/118(32.2%)。男性患者的危险因素主要为抗凝蛋白缺陷症(35/66)和抗磷脂综合征(5/66)等,女性患者则以抗凝蛋白缺陷症(20/52)、产科因素(11/47)及服用避孕药(5/47)等为主。血栓危险因素不明的35例患者中,仍有超过30%的患者曾经历反复血栓或其他部位静脉血栓。单因素和多因素Logistic回归分析显示,携带遗传性危险因素[危险度(odds ratio,OR)=21.643,95%置信区间(confi⁃dence interval,CI)为9.455~49.544,P<0.0001]和获得性危险因素(OR=10.836,95%CI为4.306~27.270,P<0.0001)均为CVST发生的独立危险因素。携带遗传性危险因素(OR=2.270,95%CI为1.021~5.048,P=0.044)也是CVST患者反复发生血栓的独立危险因素。结论:在中国人群中,CVST好发于中青年期,70.3%的患者至少携带一个较明确的血栓危险因素,其中遗传性危险因素是CVST的主要病因,检出率达53.3%,明显高于国外报道(遗传�
李蕾吴希戴菁武文漫丁秋兰王学锋
关键词：颅内静脉窦血栓
一种评估血浆置换清除DSA临床疗效的预测体系
本发明提供了一种评估血浆置换(PE)清除血清DSA临床疗效的预测体系，为接受异基因造血干细胞移植(allo‑HSCT)患者提供了包含自制的DSA弱阳性质控品的精准检测体系以及针对PE清除血清DSA的疗效评估体系。本发明优...
李佳明胡晓霞戴菁蔡晓红吴希李恩昊王学锋
高分辨率熔解曲线分析在血友病BF9基因突变检测中的应用被引量：1
2012年
目的利用高分辨率熔解曲线（HRM）技术建立简便有效的血友病B（HB）基因诊断的方法。方法收集2005年1月至2010年6月就诊于上海瑞金医院的55例HB患者的外周血标本，抽提外周血基因组DNA。采用PCR扩增结合测序的方法对40例HB患者进行F9基因突变检测，利用其中21例带有阳基因1～7号外显子突变的HB患者标本建立相应的HRM突变筛查方法。采用阳基因1～7号外显子的PCR—HRM突变筛查方法及8号外显子的DNA直接测序方法，对15例未知F、9基因突变的HB患者进行基因诊断。结果通过PCR扩增结合测序，40例HB患者均检测到F9基因突变。21例带有D基因1～7号外显子突变的HB患者标本中，19例（90％）患者的突变可通过PCR．HRM技术进行检测。通过D基因1～7号外显子PCR—HRM突变筛查及8号外显子的DNA直接测序，15例未知F、9基因突变的HB患者均检测到F9基因突变。55例HB患者中共检测到34种F9基因突变。结论HB基因诊断的新方法，即PCR．HRM筛查阳基因1～7号外显子突变结合8号外显子的DNA测序法操作简便、结果可靠。
郁婷婷戴菁傅启华王学锋
关键词：血友病B因子IX突变聚合酶链反应
六例遗传性易栓症的血栓发生与实验表型及基因型关联分析
2013年
易栓症包括遗传性和获得性。获得性易栓症继发于手术创伤、制动、口服避孕药、母体免疫性疾病、恶性肿瘤等，遗传性易栓症主要是由蛋白c（Pc）、蛋白s（Ps）和抗凝血酶（AT）缺陷导致。AT缺陷的发病率为1／5000—1／500，病情较为严重。遗传性Pc缺陷为常染色体显性遗传病，
曹雅楠夏燕王学锋丁秋兰许冠群张利伟戴菁陆晔玲奚晓东王鸿利
关键词：遗传性易栓症血栓发生基因型常染色体显性遗传病获得性易栓症口服避孕药
同时存在血友病A及血友病B患者家系的基因诊断被引量：1
2010年
目的:对1个同时存在血友病A(HA)及血友病B(HB)患者的家系进行分子发病机制研究,并对家系女性成员进行携带者检测。方法:采用活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(Fg)、凝血因子Ⅷ(FⅧ)活性(FⅧ:C)、FⅨ活性(FⅨ:C)及血管性血友病因子(vWF)等测定进行HA及HB表型诊断;用长链聚合酶链反应(LD-PCR)进行F8基因内含子22倒位检测,2组序列特异的PCR对F8基因内含子1倒位进行检测;采用直接核苷酸测序法对F9基因各外显子及其侧翼序列进行检测,联合F9基因相关的6个微卫星位点(DXS8094、DXS1211、DXS1192、DXS102、DXS1227及DXS8013)进行家系遗传连锁分析。结果:先证者1是由F8基因内含子22倒位引起的HA。先证者2是由F9基因突变nt32772A→T突变(p.Ser365Cys,GI:22385320)引起的HB,其突变基因遗传自其母亲,来源于先证者2外公的X染色体,其外公为该突变的体细胞和生殖细胞嵌合体,其阿姨口腔细胞DNA未检出该突变。结论:该家系2名先证者的基因诊断结果与表型诊断相符。单碱基延伸法可用于突变嵌合率的检测,并为血友病散发家系的突变来源提供可靠的信息。
陆晔玲丁秋兰戴菁谢炳寿王明山奚晓东王鸿利王学锋
关键词：血友病A血友病B嵌合体基因诊断
Cys529Tyr纯合基因突变导致的激肽释放酶原(PK)缺陷症
目的:遗传性激肽释放酶原缺陷症(PK)是一种少见的凝血因子缺陷症,于1965年首次报道。该缺陷症无临床出血表现,本文探讨1例激肽释放酶原缺陷症的分子致病机制。方法:常规凝血象检查,如活化部分凝血酶原时间 (APTT)延长...
丁秋兰王学锋戴菁陆晔玲陈华云王鸿利
文献传递
发色底物法检测凝血因子Ⅷ活性的临床应用评价被引量：4
2020年
目的对发色底物法测定凝血因子Ⅷ(FⅧ)活性进行方法学建立以及临床应用评价。方法选取2018年1月至2019年5月于上海交通大学医学院附属瑞金医院确诊的血友病A患者40例,获得性血友病A患者20例,狼疮抗凝物质阳性患者26例和表观健康者60名,根据美国临床和实验室标准协会(CLSI)相关文件要求,分别对该检测方法的准确度、不精密度、检测下限、线性范围、携带污染率、参考范围、可报告范围等指标进行验证,并与FⅧ活性检测(一期凝固法)进行方法学比较。同时对发色底物法在获得性血友病A和狼疮抗凝物质阳性患者标本的临床应用进行评估。结果两个水平的定值质控品的检测结果均在厂商提供的定值范围内(偏倚为3.93%~6.79%)。批内不精密度变异系数(CV)为1.86%~2.06%(均≤5%),日间不精密度CV为4.83%~6.90%(均≤15%)。灵敏度CV为11.23%(<20%)。试剂盒提供的参考范围(60.00%~168.00%)适用于本实验室。最大稀释度为1∶16。线性范围为5.00%~193.50%(a=1.0243,R^2=1.000)。临床可报告范围为0.50%~387.00%。携带污染率为0.04%。与FⅧ活性检测(一期凝固法)结果一致性高(R^2=0.961)。FⅧ抑制物滴度检测结果与一期凝固法结果一致性高(R^2=0.973)。狼疮抗凝物质阳性伴FⅧ活性(一期凝固法)降低患者的FⅧ∶C结果与一期凝固法结果间的差异有统计学意义(t=9.232,P<0.05)。结论FⅧ活性检测(发色底物法)试剂盒具有优越的检测性能,各方面均呈现出良好的结果,可用于FⅧ活性水平测定,且临床应用范围更广,干扰因素更少。
刘禹许冠群王学锋戴菁
关键词：发色底物法临床应用评价
一个纤维蛋白原γ链Gln195Arg突变所致的遗传性异常纤维蛋白原血症家系的分析被引量：2
2020年
目的对一个遗传性异常纤维蛋白原血症家系进行表型和基因型分析,并探讨其发病的分子机制。方法家系分析。采集先证者家系成员(3代7人)的外周血进行常规出凝血检查,用凝血酶凝固法(Clauss法)和免疫比浊法分别检测纤维蛋白原(Fg)的活性(Fg︰C)和抗原水平(Fg︰Ag),用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测血浆Fg三条肽链的相对分子量。对Fg的FGA、FGB和FGG基因的所有外显子及其侧翼序列进行PCR扩增并测序分析。采用纤维蛋白原凝固率测定、纤维蛋白聚集曲线和扫描电镜观察纤维蛋白凝块等方法,研究其致病机制。结果先证者活化部分凝血活酶时间(APTT)正常,凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)和爬虫酶时间(RT)延长;Fg︰Ag(1.6 g/L)轻度降低,Fg︰C(0.7 g/L)明显降低。其父亲和祖母APTT和PT正常,TT和RT延长;Fg︰Ag(分别为2.0 g/L和2.2 g/L)正常,Fg︰C(分别为1.0 g/L和1.1 g/L)明显降低。家系其他成员各项凝血指标均正常。先证者FGG基因第6外显子存在A4774G杂合碱基置换,导致Fgγ链Gln195Arg杂合错义突变;其父亲和祖母亦为Gln195Arg杂合子。Western blot检测结果显示,先证者及其父亲、祖母血浆Fg均无异常条带出现。先证者血浆的Fg凝固率为49.3%,健康对照者为98.9%;凝血酶或爬虫酶诱导的聚集曲线严重受损;与健康对照者相比,先证者纤维蛋白凝块的纤丝直径增大(P<0.001),纤丝密度减小、排列稀疏。结论Fgγ链Gln195Arg杂合错义突变导致Fg功能受损,是引起该家系遗传性异常纤维蛋白原血症的原因,该突变尚未见报道。
黄丹丹蔡挺戴菁丁秋兰王学锋
关键词：纤维蛋白原家系基因突变
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