由于能被多种类型的病原体或危险信号所激活,NLRP3(NOD-like receptor family pyrin domain-containing protein 3)炎症小体在多种疾病过程中都发挥了关键作用.作为炎症反应的核心,NLRP3炎症小体可能为各种炎症性疾病的治疗提供新的靶点.泛素化作为一种多功能翻译后修饰,在NLRP3介导的炎症免疫反应中起着关键的调节作用.通过对NLRP3炎症小体的组成、结构及功能,泛素化过程,泛素化与去泛素化对NLRP3炎症小体的正、负性调控的详细阐述,对NLRP3泛素化靶向治疗的前景与现状深入分析,为炎症性疾病的治疗提供新思路.
目的:运用网络药理学方法探究加味丹栀逍遥散治疗抑郁症的作用机制,并通过分子对接和动物实验验证加味丹栀逍遥散治疗抑郁症的潜在靶点。方法:基于中药系统药理学数据库与分析平台(traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP)、中医药百科全书数据库(The encyclopedia of traditional Chinese medicine,ETCM)等筛选加味丹栀逍遥散的化学成分及作用靶点。使用DisGeNet、人类孟德尔遗传数据库(online mendelian inheritance in man,OMIM)等查询抑郁症相关靶点,并采用STRING扩充二级靶点得到抑郁症的全部靶点。将加味丹栀逍遥散活性成分相关靶点与抑郁症靶点取交集,得到加味丹栀逍遥散治疗抑郁症的相关靶点。借助Cytoscape软件构建蛋白质互作(protein-protein interaction,PPI)网络。使用DAVID对潜在靶点进行基因本体(gene ontology,GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)信号通路富集分析。通过AutoDock对核心靶点及成分进行分子对接。48只SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组8只和造模组40只,造模组小鼠建立慢性不可预知温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)模型,6周后将造模组小鼠分为CUMS组、氟西汀组(20 mg·kg^(-1))及加味丹栀逍遥散低(15.9 kg·L^(-1))、中(31.8 kg·L^(-1))、高(47.7 kg·L^(-1))剂量组,每组8只,以10 mL·kg^(-1)体积灌胃给予相应药物,正常组和模型组灌胃给予等体积的生理盐水,每天1次,持续28天。采用蔗糖偏好实验、悬尾实验和旷场实验评估小鼠的行为学能力;HE染色观察小鼠脑部海马区病理学变化;DCX染色观察海马区新生神经元变化;Western Blot检测PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT及BDNF蛋白表达水平。结果:网络药理学分析显示,加味丹栀逍遥散活性成分164个,对应靶点332个;抑郁症相关靶点1432个;将加味丹栀逍遥散相关靶点和抑郁症相�
