重庆市科技计划项目(8847)
- 作品数：5 被引量：78H指数：4
- 相关作者：陈大霞李隆云彭锐瞿显友鲁成更多>>
- 相关机构：重庆市中药研究院西南农业大学更多>>
- 发文基金：重庆市科技计划项目国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 正交设计优选味连简单序列重复间扩增多太性反应体系的研究被引量：2
- 2008年
- 目的优化味连简单序列重复间扩增多太性(Coptis chinensisFranch.ISSR)反应体系。方法利用正交实验设计,从Mg2+,dNTP,引物,BSA这4种因素3个水平进行优化。结果确立了适合黄连ISSR分析的反应体系,即在25μl反应体系中,内含1×PCR buffer,1.5 mmol/LMg2+,200μmol/L dNTP,0.4μmol/L引物,40 ng模板,1UTaqDNA聚合酶,BSA 1μg/μl。结论利用此优化反应体系能得到清晰、稳定的图谱。
- 陈大霞李隆云瞿显友彭锐
- 关键词：正交设计
- 栽培黄连群体遗传关系的SRAP分析被引量：10
- 2008年
- 目的揭示栽培黄连Coptis chinensis群体的遗传关系。方法 以24个不同来源地的栽培黄连群体为试材，采用SRAP分子标记技术，用Treeconw软件分析遗传相似系数，UPGMA方法聚类，构建遗传系统树。结果36对引物共得到276条扩增条带，其中有120条呈现多态性，占43．48％，从DNA分子水平显示出供试种质遗传多样性并不丰富。遗传相似系数变化范围在0．8770～0．9519。聚类结果显示栽培黄连群体遗传关系与来源地无明显相关性，仅在小分支中表现出一定的地域相关性。结论栽培黄连群体的遗传多样性水平较低，显示遗传背景较为单一。
- 陈大霞李隆云瞿显友彭锐钟国跃
- 关键词：黄连相关序列扩增多态性
- 黄连种质资源遗传多样性的ISSR研究被引量：24
- 2006年
- 目的：进行黄连Coptis chinensis种质资源的遗传多样性研究。方法：对32份黄连种质进行ISSR分析。利用TREECONW软件分析遗传相似系数，UPGMA方法聚类，构建亲缘关系系统图。结果：16条引物共得到106条扩增条带，其中有51条呈现多态性，占48．1％。遗传相似系数变化范围0．8258～0．9351。聚类结果显示黄连种质亲缘关系与地理分布无明显相关性，但可以看出来源于同一地区的部分黄连种质聚在一起，呈现出一定的地域性分布规律。结论：栽培黄连的遗传多样性水平较低，种质问的亲缘关系较近。
- 陈大霞李隆云彭锐瞿显友
- 关键词：黄连
- 黄连ISSR反应条件优化的研究被引量：28
- 2007年
- 以黄连(味连,Coptis ChinensisFranch.)基因组DNA为模板,通过单因子、双因子实验研究了ISSR反应体系中主要成分(Mg2+、dNTP、引物、模板、TaqDNA聚合酶)以及热循环参数(退火温度、循环数、变性时间、退火时间、延伸时间)对扩增结果的影响,并找出各自的最适条件,建立了适合黄连ISSR分析的反应体系和扩增程序,即在25μL反应体系中,内含1×PCR buffer、1.5mmol.L-1Mg2+、200μmol.L-1dNTP、0.3μmol.L-1引物、40ng模板、1UTaqDNA聚合酶。扩增程序为94℃预变性5min,然后进行35个循环:94℃变性30s,(据不同引物的退火温度)复性1min,72℃延伸1.5min,循环结束后72℃延伸7min,-4℃保存。这一优化系统的建立为今后利用ISSR标记技术进行黄连鉴定及种质遗传多样性分析提供了一个标准化程序。
- 陈大霞李隆云鲁成钟国跃瞿显友彭锐
- 关键词：黄连ISSR
- 黄连药材DNA提取及RAPD反应体系的优化被引量：20
- 2006年
- 目的探索黄连药材DNA的提取并对其RAPD反应体系进行优化。方法采用目前较为流行的苯酚法、CTAB法、高盐低pH值法，通过电泳、紫外分光光度仪检测及RAPD扩增效果确定黄连药材基因组DNA提取的最佳方法。结果CTAB法为黄连药材基因组DNA提取的最佳方法，建立了适合黄连药材的RAPD反应体系：25μL体系中内含1×PCR buffer、2mmol／LM g^2＋、100-150μmol／L dNTP、20ng引物、40ng模板、1UTaq酶。结论CTAB法及黄连药材的RAPD反应体系可以用于黄连药材的RAPD分析。
- 陈大霞李隆云钱敏鲁成
- 关键词：基因组DNA提取RAPD
