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江苏省高校自然科学研究项目(08KJA230002)
作品数:
1
被引量:4
H指数:1
相关作者:
朱军
葛兆宏
原志伟
朱吕昌
吴圣龙
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相关机构:
扬州大学
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发文基金:
转基因生物新品种培育专项
江苏省高校自然科学研究项目
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相关领域:
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2010
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F18大肠杆菌黏附素受体结合域鉴定新方法
被引量:4
2010年
运用DNA重组技术将F18ab和F18ac大肠杆菌黏附素fedF亚单位内的第60~109位氨基酸残基区段(fedF1)和fedF全基因克隆入V型分泌系统MisL的载客结构域上,经DNA测序确证其正确阅读框后,含重组菌质粒pnirBMisL-fedF或pnirBMisL-fedF1经厌氧诱导后,与断奶仔猪小肠上皮细胞进行体外黏附试验。结果表明:FUT1基因M307位点中GG型和AG型仔猪小肠上皮细胞均能黏附上述重组菌,而AA型个体小肠上皮细胞则不能黏附。上述重组菌均能与兔抗F18ab菌毛FedF亚单位单因子高免血清发生玻板凝集反应。而FedF突变体FedF(M)的重组质粒菌则失去上述凝集和黏附特性。证明F18大肠杆菌黏附素fedF基因及其基因片段fedF1在大肠杆菌表面得到了功能性表达,F18ab和F18ac黏附素FedF直接介导F18大肠杆菌与易感仔猪小肠上皮细胞表面大分子受体黏附结合,fedF1为黏附素FedF的受体主要结合域,其His88、His99是FedF黏附素受体结合域的重要氨基酸残基。
葛兆宏
陆广富
朱军
郁磊
羊扬
原志伟
朱吕昌
吴圣龙
包文斌
朱国强
关键词:
F18大肠杆菌
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