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国家自然科学基金(29976013): 作品数：17 被引量：329H指数：9; 相关作者：张嗣良庄英萍储炬郭美锦杭海峰更多>>; 相关机构：华东理工大学军事医学科学院第二军医大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金高等学校骨干教师资助计划教育部高等学校骨干教师资助计划更多>>; 相关领域：生物学化学工程轻工技术与工程医药卫生更多>>

生物过程在线监控远程多媒体报警系统的研制被引量：2: 2000年; 对生物过程在线监控远程多媒体报警系统的功能、组件构成及通信方式进行了全面介绍。; 黄明志杭海峰张嗣良; 关键词：报警系统多媒体生物过程在线监控

发酵过程中氧平衡的参数相关性分析被引量：3: 2000年; 研究了在发酵过程中不同程度地改变搅拌转速及温度对氧吸收率 (OUR)、二氧化碳释放率 (CER)、溶解氧 (DO)等在线参数的影响。通过对 OUR(CER)与 DO的相关性分析 ,可了解在发酵过程中影响氧平衡的限制性因素。当 DO与 OUR的趋势具有相反性 ,表明限制因素为细胞水平的菌体代谢问题 ;若 DO与 OUR的趋势具有同一性 ,限制性因素为工程水平的氧传递因素 ,表明溶氧处于临界氧以下。; 张明樊滔苏丽明马天良张嗣良; 关键词：发酵氧平衡溶氧 OUR DO

基于氧碳平衡的重组巴氏毕赤酵母碳源代谢分析被引量：9: 2003年; 基于氧元素和碳元素平衡对重组巴氏毕赤酵母 (Pichiapastoris)的不同碳源代谢进行了分析 .结果表明 :以甘油为惟一碳源 ,当比生长速率由 0 0 6 4h-1增大到 0 2 5 7h-1时 ,用于细胞生长的甘油代谢比速率由1 36mmol·g-1·h-1增大到 5 4 6mmol·g-1·h-1,而用于细胞维持代谢流比例降低了 10 4 % ,同时甘油用于合成代谢和分解代谢的比速率均增大 ,但是分解代谢流比例逐渐下降 ,而合成代谢流比例却升高了 5 9% ;以甲醇为碳源进行表达重组人血清白蛋白恒化培养时 ,当比生长速率由 0 0 19h-1增大至 0 0 4 6h-1时 ,用于产物重组人血清白蛋白形成的比速率呈先增大后减少的趋势 ,在比生长速率为 0 0 2 7h-1时最大 ,为 0 31mmol·g-1·h-1,占甲醇总代谢流的 13 2 % .; 郭美锦储炬庄英萍杭海峰张嗣良; 关键词：代谢流分析重组人血清白蛋白

基因工程菌Pichia pastoris高密度培养条件研究被引量：29: 2001年; 基因工程菌pichiapastoris最佳种子培养基为添加 4mL/LPTMl的BMGY培养基 ;全合成高密度摇瓶培养基是甘油 4% ,(NH4) 2 SO41 0g/L ,CaSO40 93g/L ,K2 SO41 8 2g/L ,MgSO4·7H2 O 1 4 9g/L ,0 1mol/L磷酸缓冲液 (pH =6 0 )配制 ,培养 2 6h后细胞密度OD60 0 可达到 65。经SDS PAGE电泳图谱分析 ,甲醇诱导培养 72h结果 :1 2h有重组人血清白蛋白表达 ,2 4h达到最大。此全合成摇瓶培养基与批补料发酵培养基相类似 ,有利于指导发酵罐上发酵培养。; 郭美锦吴康华杭海峰储炬庄英萍张嗣良; 关键词：基因工程菌毕赤酵母

基因工程菌Pichia pastoris连续培养的生长及抑制动力学被引量：12: 2001年; 在同一稀释率μ(μ=0 .1 4h-1)下用不同浓度的甘油流加进行连续培养 ,研究甘油浓度对基因工程菌毕赤酵母 ( Pichia pastori)生长的影响。结果表明甘油浓度对细胞生物量 ( DCW和WCW)、底物得率系数 ( YX/ S)、底物比消耗速率 ( qs)、呼吸熵 ( RQ)与二氧化碳释放率 ( CER)都有影响 ,在低甘油残留浓度 ( <63.3g/L)下 ,甘油是激活剂 ,菌体生长符合 Monod方程 ,Ks=1 9.62 g/L,甘油激活常数 Ka=1 9.45 g/L;而在高甘油残留浓度 ( >63.3g/L )下甘油是抑制剂 ,菌体生长特征符合 Haldance方程 ,Ks=0 .0 1 4g/L,KI=1 5 6.67g/L。毕赤酵母生长的甘油抑制浓度为 5 5 .42; 吴康华郭美锦庄英萍储炬张嗣良; 关键词：基因工程菌毕赤酵母生长动力学重组人血清白蛋白抑制动力学

基因工程菌Pichia pastoris高密度发酵表达重组人血清白蛋白被引量：8: 2002年; 在摇瓶条件下对基因工程菌 Pichia pastoris的发酵条件进行了实验 ,并根据摇瓶发酵的优化结果进行了补料分批高密度发酵。在分批发酵时 ,接种量为 1 0 %且种子细胞光密度 ( OD60 0 )为2 0左右时 ,细胞生长的延迟期约为 2 .1 1 h,细胞生长光密度与培养时间的关系模型为 :y=0 .7841 e0 .2 319t(线性相关系数 r=0 .9936) ;在补料发酵时细胞浓度可达 1 1 5 g/L～ 1 60 g/L (干重 ) ,在 1 2 0 h重组人血清白蛋白表达量达 3.; 郭美锦庄英萍吴康华储炬张嗣良; 关键词：高密度发酵分批发酵补料发酵

巴斯德毕赤酵母的基因表达系统研究进展被引量：130: 2000年; 巴斯德毕赤酵母是一种近年来广泛使用的基因表达系统 ,它具有表达率高、遗传稳定、产物可分泌、发酵工艺成熟等许多优点 .综述了该系统在载体类型、载体元件 (包括启动子、选择标记和信号肽序列 )、受体类型。; 欧阳立明张惠展张嗣良刘志敏; 关键词：巴斯德毕赤酵母基因表达系统受体

重组Pichia酵母(Mut^S)发酵过渡阶段关键酶活分析被引量：4: 2004年; 重组Pichia酵母表达系统的发酵存在从利用甘油为碳源生长到利用甲醇为碳源表达外源蛋白的发酵表达过渡阶段。Pichia酵母过渡阶段碳源代谢途径关键酶酶活分析表明:甲醇诱导3hAOX2酶活为0,4h时突然增加到0.05U,继续诱导,酶活缓慢增加;在过渡阶段甲醛脱氢酶和6-P-葡萄糖脱氢酶分别增加了6.1倍、2.5倍,而丙酮酸脱氢酶和异柠檬酸脱氢酶分别下降为原酶活的29.4%及16.4%,表明甲醇诱导后甲醇完全氧化代谢途径得到强化,而糖酵解途径和三羧酸循环途径代谢作用减弱。; 胡光星郭美锦储炬杭海峰庄英萍张嗣良; 关键词：代谢途径植酸酶

毕赤氏酵母工程菌高密度发酵表达恶性疟原虫融合抗原的研究被引量：10: 2001年; The effects of cultural conditions,which were fermentation period when methanol was as sole carbon source,methanol concentration,range of pH,on the expression of the chimeric protein of Plasmodium falciparum in genetically engineered methylotrophic Pichia pastoris were investigated by shake flask experiments in this paper.The results showed:(1)fermentation period with methanol inducement is about 96 hours;(2)the optimum methanol concentration as sole carbon source is 10g/L;(3)the range of pH is from 6.0 to 7.0. On the base of above experimental results the cell high-density fermentation had been done on the FMG-5L fermentor with multi-sensors.The results showed that the cell optical density (OD 600) can reached 550 and the ma-ximum expression level of target proteins was 780mg/L which was 4 times higher or more than the shake flask culture’s.; 郭美锦吴康华储炬庄英萍张嗣良黄大庆张青锋潘卫庆; 关键词：发酵条件高密度发酵

重组巴氏毕赤酵母恒化培养动力学及代谢迁移特性研究被引量：13: 2001年; 通过对甲醇营养型毕赤酵母基因工程菌以碳源甘油为限制性基质进行恒化培养动力学试验 ,结果认为 :(1 )细胞光密度与其干、湿重呈线性关系 ,当细胞光密度 (OD60 0 )为 1 0 0时细胞湿重 (WCW)为 1 2 8 3g L ,细胞干重 (WDW)则为 2 2 9g L ;(2 )基因工程菌P .pastoris的生长与限制性基质甘油残留浓度的关系符合Monod关系式 ,通过 1 μ对 1 S进行线性回归得 μmax=0 .366h- 1,Ks=0 .1 82 3g L ,经参数推导甘油最大菌体得率系数YG =0 .54g g ,菌体维持生长消耗底物系数m =0 .0 0 69g (g·h) ;氧最大菌体系数YX O2 =30 .96g moL ,菌体维持生长时消耗氧系数mO2 =0 .0 0 0 8mol (g·h) ,最适理论稀释速率Dm =0 .341h- 1;(3)从氨水的消耗速率和呼吸商 (RQ)的变化认为随着比生长速率 (μ)的增大 ,甘油代谢流从糖原异生和磷酸戊糖途径线性地向糖酵解和三羧酸循环途径进行代谢迁移。; 郭美锦吴康华庄英萍储炬张嗣良; 关键词：动力学重组人血清白蛋白

国家自然科学基金(29976013)

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