国际科学基金(F4239-1)
- 作品数：8 被引量：69H指数：4
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- 相关机构：天津科技大学浙江大学天津市工业微生物重点实验室更多>>
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- 相关领域：生物学化学工程理学轻工技术与工程更多>>
- 纳他霉素在不同溶剂中溶解度的测定与关联被引量：37
- 2008年
- 采用平衡法测定了纳他霉素在纯水(278.15～341.15K)和异丙醇(278.15～318.15K)、甲醇(278.15～313.15K)溶液中的溶解度。在三种溶剂中的溶解度均随温度升高而增大,以在甲醇中溶解效果最好,异丙醇次之,纯水最差。分别用经验模型、理想溶解度方程和Apelblat方程对实验数据进行关联,关联效果令人满意,平均相对误差小于5%,获得了相关模型参数。相对而言,经验模型和Apelblat方程关联的效果较好。实验得到的溶解度数据和关联结果对纳他霉素结晶工艺的研究具有较大的指导意义。
- 骆健美金志华岑沛霖王敏
- 关键词：纳他霉素溶解度平衡法
- 响应面优化褐黄孢链霉菌原生质体再生培养基被引量：2
- 2009年
- 本实验以再生率作为考察指标,采用单因素和响应面法优化了褐黄孢链霉菌原生质体再生培养基中的三种成分,确定其最佳浓度组合为:磷酸二氢钾0.13g/L、L-脯氨酸5.48g/L、聚乙烯吡咯烷酮0.18g/L。在优化后的再生培养基中原生质体再生率达到17.2%,与模型预测值16.7%拟合较好。结果表明,响应面法是优化原生质体再生培养基的一种有效方法。
- 骆健美李建姝郭浩刘峰刘丹王敏
- 关键词：褐黄孢链霉菌原生质体再生率响应面法
- 褐黄孢链霉菌原生质体制备与再生被引量：6
- 2008年
- 以纳他霉素产生菌株褐黄孢链霉菌SG-2002为出发菌株,考察了菌丝体培养基、甘氨酸浓度、培养时间、溶菌酶浓度、酶解温度、酶解时间及再生培养基对原生质体形成与再生的影响。原生质体形成和再生的最佳条件为S培养基中添加1%的甘氨酸,菌丝体培养30h,溶菌酶浓度40mg/(g菌体干重),酶解温度30℃,酶解时间60min。褐黄孢链霉菌的原生质体形成量达到4.0×106个/mL,再生培养基选择R5′培养基,再生率为9.0%。
- 王艳婷骆健美王敏
- 关键词：褐黄孢链霉菌原生质体形成原生质体再生再生率
- 基于抑菌活性的ε-聚赖氨酸的微孔板生物检测法被引量：4
- 2011年
- 基于ε-聚赖氨酸的抑菌活性,以96微孔板为平台,建立适合大规模样品快速分析的微孔板生物检测法。结果表明,藤黄微球菌(Micrococcus luteus)为最适敏感指示菌,当敏感指示菌初始浓度为107-108 CFU/mL,培养时间为4 h时,ε-聚赖氨酸浓度在100.00-500.00 mg/L范围内与抑菌率呈较显著的线性关系(R2=0.997 5)。该方法不仅表现出良好的精密度和准确度,与HPLC和甲基橙法的实验结果对比,微孔板生物检测法的相对标准偏差(RSD)和相对偏差(RD)分别小于3.5%和3.0%,说明该方法是一种与HPLC法有类似分析精度,但能直接反映样品的抑菌活性,且更适合大规模样品快速检测的方法,可用于发酵过程中ε-聚赖氨酸产量的检测和突变株的高通量筛选。
- 骆健美成永新李培君王建锋郑宇王敏
- 关键词：Ε-聚赖氨酸微孔板生物检测抑菌活性藤黄微球菌
- 褐黄孢链霉菌双亲灭活原生质体融合的研究被引量：5
- 2008年
- 考察了双亲灭活条件、聚乙二醇(PEG)相对分子质量、PEG浓度、融合时间、融合温度及无机离子浓度对褐黄孢链霉菌(Streptomyces gilvosporeus)SG-2002-1和SG-2002-2原生质体融合率的影响。分别采用紫外灭活和热灭活法,灭活条件为紫外灭活2 min,热灭活为60℃水浴1 h。原生质体融合最佳条件为:50%的PEG 6000,融合温度25℃,融合时间为8 min,CaCl2浓度为0.05 mol/L,MgCl2浓度为0.02 mol/L,在此条件下融合率可达5.0%。
- 骆健美李建姝王艳婷王敏
- 关键词：褐黄孢链霉菌纳他霉素原生质体融合融合率
- 纳他霉素在水和甲醇中溶解度的测定与关联被引量：14
- 2008年
- 平衡法测定了纳他霉素在纯水(278.2～341.2K)、甲醇(278.2～313.2K)和不同水-甲醇比例混合溶剂(278.2～308.2K)中的溶解度。采用人工神经网络对纳他霉素在纯水和甲醇中的溶解度数据进行关联,效果令人满意。纳他霉素在不同水-甲醇比例混合溶剂中的溶解度随温度的升高而增加,随水比例的增加而减少。采用非线性最小二乘法将实验数据关联为λh方程的形式,取得较好的效果,其中,λ、h可表达为水-甲醇比例的函数,用于内插计算,精度满足工程需要。实验得到的溶解度数据和关联结果对纳他霉素结晶工艺的研究具有较大的指导意义。
- 骆健美金志华岑沛霖王敏
- 关键词：纳他霉素溶解度平衡法人工神经网络
- 褐黄孢链霉菌基因组DNA的提取及RAPD体系的优化
- 2008年
- 以改进的SDS法提取褐黄孢链霉菌基因组DNA,对其进行随机扩增多态性(RAPD)研究。通过单因素和正交试验相结合的方法,建立了适于褐黄孢链霉菌RAPD分析的PCR反应体系:包括Taq聚合酶、Mg^(2+)、随机引物、dNTPs和模板浓度。在20μl体系中,模板DNA浓度60~150mg,Taq聚合酶为1.0~1.5U,引物浓度0.3~0.4mmol/L,dNTPs浓度200~250μmol/L,Mg^(2+)浓度2.5~3.0mmol/L。在此反应体系下可扩增出条带数目多且清晰稳定的电泳图谱。
- 刘丹骆健美刘峰王敏
- 关键词：褐黄孢链霉菌DNA提取
- 基于抑菌活性的纳他霉素微孔板生物检测法被引量：3
- 2009年
- 为快速测定大量纳他霉素样品含量,基于其抑菌活性建立了一种新型的微孔板生物检测法。结果表明,裂殖酵母AS2.637为最适敏感指示菌,优化的敏感指示菌初始浓度为105～106cfu/mL,纳他霉素样品加入时间为0 h,培养时间为8 h。微孔板中纳他霉素浓度在0.95～2.14 mg/L与抑菌率呈较显著的线性关系,微孔板生物检测法与HPLC法测定的结果无显著差异,该方法具有处理量大、操作简单、平行性好等特点,可用于发酵过程中纳他霉素产量的定量和突变菌的高通量快速筛选工作。
- 刘峰骆健美刘丹李建姝王敏
- 关键词：纳他霉素微孔板生物检测抑菌活性
