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国家自然科学基金(30871153)

作品数：4 被引量：1H指数：1
相关作者：钱伟邓亮徐可树李莹李琪更多>>
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文献类型

  • 4篇中文期刊文章

领域

  • 4篇医药卫生

主题

  • 4篇星状细胞
  • 4篇细胞
  • 4篇肝星状细胞
  • 3篇转化生长因子
  • 3篇转化生长因子...
  • 3篇转化生长因子...
  • 3篇化生
  • 2篇蛋白
  • 2篇蛋白质
  • 2篇源性
  • 2篇内源
  • 2篇内源性
  • 2篇启动子
  • 2篇启动子活性
  • 2篇外源
  • 2篇外源性
  • 2篇结合蛋白
  • 2篇结合蛋白质
  • 2篇活性
  • 2篇反应元件

机构

  • 4篇华中科技大学
  • 1篇山东省胸科医...

作者

  • 4篇徐可树
  • 4篇邓亮
  • 4篇钱伟
  • 3篇李莹
  • 2篇黄金明
  • 2篇周冠宇
  • 2篇李琪
  • 1篇周建宁
  • 1篇刘卡花

传媒

  • 2篇中华肝脏病杂...
  • 1篇中华医学杂志
  • 1篇中华消化杂志

年份

  • 2篇2012
  • 2篇2011
共 4 条 记 录，以下是 1-4
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排序方式：
外源性转化生长因子β3对HSC—T6细胞内源性转化生长因子β3表达的影响
2011年
目的通过对大鼠肝星状细胞株（HSC-T6）中内源性转化生长因子β3（TGF-β3）mRNA和蛋白水平的检测，探讨外源性TGF-β3对HSC-T6分泌内源性TGF-β3的影响。方法体外培养HSC-T6，未加入外源陛TGF-β3培养的细胞为对照组，加入外源性TGF-β3（10ng／m1）培养的细胞为TGF—p3组。（1）分别在1、2、4、12h和24h收集细胞，用实时荧光定量PCR法检测内源性TGF-β3mRNA表达；（2）分别在0、1、6h和12h收集细胞，用Western b1ot法检测细胞内TGF-β3蛋白的表达；（3）分别在0、1、2、4、8、14h和24h收集细胞上清液，用酶联免疫吸附法（ELISA）检测细胞外总TGF-β3蛋白的表达；加入外源性TGF-β3培养HSC-T6 2h，然后换用无血清的DMEM培养液继续培养细胞至2．25、2．5、3、4、6、10h和14h收集细胞上清液，用ELISA法检测细胞外内源性TGF-β3蛋白的表达。对数据进行单因素方差分析。结果（1）TGF-β3组细胞内TGF-β3mRNA表达水平明显增高，于2h达峰值（2．796±0．518），为对照组（1．022±O．038）的2．74倍（P〈0．05）；随后缓慢降低，维持在1．45倍水平达10h，24h时表达水平仍为对照组的1．18倍（P〈0．05）。（2）不同时间点细胞内TGF-β3表达水平均无明显变化（P〉0．05）。（3）TGF-β3组细胞外总TGF-βD3含量明显增加，于4h时达高峰[（18．931±2．904）ng／ml]，约为诱导量[（10．026±0．022）ng／m1]的1．89倍，随后开始下降；内源性TGF-β3于诱导后3h达高峰[（0．835±0．027）ng／m1]，为对照组[（0．026±0．022）ng／m1]的32．12倍，之后开始逐渐降低，直至维持一个弱增长的状态（P〈0．05）。结论外源性TGF-β3可促进HSC-T6细胞分泌大量内源性TGF-β3。
李莹邓亮钱伟周建宁徐可树
关键词：肝星状细胞转化生长因子Β
环磷酸腺苷反应元件结合蛋白-1对肝星状细胞转化生长因子3的mRNA表达及启动子活性的影响
2012年
目的探讨大鼠肝星状细胞（HSC）中，环磷酸腺苷（cAMP）反应元件结合蛋白-1（CREB-1）对转化生长因子β3（TGFβ3）的mRNA表达及启动子活I生的影响。方法将HSC分为CREB-1表达质粒转染组（C质粒组）、s氓NA—cREB-1转染组（s质粒组）、阴性对照质粒组（N质粒组）、Forskolin处理组（FSK组）、H-89处理组（H-89组）及空白对照组，并根据加或不加入外源性TGFD3重组蛋白将以上各组再分为（TGFD3＋）组和（TGFD3-）组，实时荧光定量PCR法检测TGFβ3mRNA的表达。上述各组共转染PGL3妇sjc-TGFp3P（W质粒）或PGL3-basic-TGFB3P—mCRE（M质粒），以pRL-SV40为空白对照，荧光素酶报告基因分析法检测各组TGFD3启动子活性。双侧t检验进行组间数据比较。结果TGFD3mRNA表达结果显示，与N质粒（TGFp3-）组比较，s质粒（TGFp3-）组mRNA相对表达量降低至0．69fl：0．15（t=3．702，P〈0．05）；与空白对照（TGFD3-）组比较，H-89（TGFD3-）组降低至0．57±0．08（t=9．490，P〈0．05）；N质粒（TGFD3＋）组与N质粒（TGFD3-）组、s质粒（TGFB3＋）组与s质粒（TGFD3-）组、空白对照（TGFB3＋）组与空白对照（TGFβ3-）组、H-89（TGFB3＋）组与H-89（TGFD3-）组分别比较，差异均有统计学意义（t值分别为-7．404、-3．480、-2．831和-7．875，尸值均〈0．05）。荧光素酶报告基因分析结果显示，s＋w质粒组、N＋W质粒组、C＋W质粒组的TGFB3启动子活性分别为0．062±0．013、0．122±0．011、0．165±0．016，C＋W质粒组TGFB3活性较N＋w质粒组组明显升高（t=-3．823，P〈0．05），s＋w质粒组较N＋w质粒组明显降低（t=5．853，P〈0．01）lH-89＋W质粒组、空白对照＋w质粒组、FSK＋W质粒组TGFp3启动子活性分别为0．154士0．010、0．188士0．016、0．276±0．031，FSK＋W质粒组的TGFB3启动子活性较空白对照＋W质粒组明显升高（t=-4．419，P〈0．05），H-89＋W质�
周冠宇黄金明邓亮刘卡花李琪钱伟徐可树
关键词：CAMP反应元件结合蛋白质转化生长因子Β3肝星状细胞
外源性转化生长因子-β3对肝星状细胞内源性转化生长因子-β3表达及其增殖的影响
2012年
目的探讨外源性转化生长因子-β3（TGF-β3）对大鼠肝星状细胞（HSC）分泌内源性TGF-β3及细胞增殖的影响。方法取大鼠HSC接种于12孔板，一组用不同浓度（0．08、0．4、2、10和50ng／ml）的外源性TGF-β3干预2h后收集上清液，另一组用10ng／ml外源性TGF-β3干预后在不同时间点（15min、30min、1h、2h、4h、8h、βh）收集上清液，应用ELISA法检测TGF-β3含量。另取HSC接种于96孔板，一组用不同浓度（0．001、0．005、0．02、0．08、0．32、1．25、5、20、100、500ng／ml）的外源性TGF-β3干预24h，另一组用5ng／ml外源性TGF-β3干预24和48h，用噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖情况。倒置显微镜下观察空白对照组和外源性TGF-β3干预组HSC的大体形态。结果当外源性TGF-β3浓度达2ng／ml时可明显促进内源性TGF-β3表达，随后内源性TGF-β3的表达量呈外源性TGF-β3浓度依赖性增长（F=210．168，P=0．00），该作用3h时达高峰[（0．845土o．028）ng／ml比（0．026±0．022）ng／ml]。外源性TGF-β3浓度≥0．32ng／ml时对HSC增殖有较弱的促进作用，但无剂量依赖关系（F=0．68，P=0．57）。经TGF-β3干预的HSC镜下形态与空白对照组相比未出现明显变化。结论外源性TGF-β3可促进HSC中内源性TGF-β3的表达，还可促进HSC增殖。外源性TOF-β3干预对HSC细胞大体形态无明显影响。
李莹邓亮钱伟徐可树
关键词：星形细胞转化生长因子-Β3细胞增殖
外源性TGF-β3对大鼠肝星状细胞TGF-β3启动子活性和CREB-1的影响被引量：1
2011年
目的观察转化生长因子β3（TGF—β3）自反馈调节信号通路中正向调节因子的作用。方法用外源性TGF—β3诱导大鼠肝星状细胞系（HSC—T6），在不同时间点用荧光素酶报告基因分析法检测TGF．83的启动子活性，Western印迹法检测cAMP反应元件（CRE）结合蛋白1（CREB-1）和磷酸化CREB-1的表达，实时荧光定量PCR法检测CREB-1mRNA的表达情况。结果外源性TGF—β3处理HSC—T6后，TGF—β3启动子活性表现出时间依赖性增高，并于诱导后24h达峰值[10．68±0．57，2．2倍于对照组（4．83±0．56）]。TGF-β3启动子的基础活性下降了85％（0．73±0．03，P〈0．05）。外源性TGF-β3可在短时问内上调磷酸化CREB-1的表达，与对照组（比值为1）相比，15min即可见明显增加（1．5倍于对照组），1h时其表达量达到最大值（2．0倍于对照组），12h略见下降（1．9倍于对照组，均P〈0．05）。外源性TGF-β3对HSC—T6中CREB-1 mRNA和CREB-1蛋白的表达均无影响（均P〉0．05）。结论外源性TGF—β3可促进TGF—β3启动子活性增强，且CRE位点在外源性TGF—β3介导的TGF—β3启动子活性中发挥重要作用；外源性TGF—β3可活化CREB-1，但不能促进CREB-1蛋白及mRNA的表达。
邓亮李莹黄金明周冠宇李琪钱伟徐可树
关键词：转化生长因子Β3CAMP反应元件结合蛋白质
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