浙江省自然科学基金(Y205011)
- 作品数：4 被引量：39H指数：3
- 相关作者：邵圣文顾红光张志智王文琴邵华更多>>
- 相关机构：湖州师范学院浙江中医药大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 铜绿假单胞菌生物膜致豚鼠下呼吸道感染分析被引量：2
- 2010年
- 目的探讨铜绿假单胞菌生物膜致病性。方法 60只豚鼠随机分为生物膜组、浮游菌组和对照组,行气管切开术后分别植入生物膜细菌、浮游态细菌及生理盐水包被的硅胶管,15 d后收集支气管肺泡灌洗液(BALF)、支气管及肺组织,测量活菌数,分离细菌并测定生物膜形成能力,观察组织形态改变。结果生物膜组豚鼠下呼吸道慢性感染发生率为66.7%,明显高于浮游菌组(P<0.01);生物膜组豚鼠支气管及肺组织可见肺泡腔内纤维渗出,间隔炎性细胞浸润,纤毛上皮增生,黏膜下淋巴细胞浸润;生物膜组豚鼠BALF及肺组织中细菌总数分别为(7.45±0.23)×103 cfu/mL和(6.78±0.36)×103 cfu/g,并分离出能够形成生物膜的铜绿假单胞菌。结论铜绿假单胞菌生物膜是下呼吸道慢性感染的高危因素之一。
- 邵圣文杨红霞徐伯赢张建国张慧陈亮
- 关键词：生物膜铜绿假单胞菌下呼吸道
- 铜绿假单胞菌生物膜形成及厚度实时检测被引量：11
- 2010年
- 目的实时观察铜绿假单胞菌生物膜形成并测量其厚度。方法将绿色荧光蛋白表达质粒转化铜绿假单胞菌,再采用激光共聚焦显微镜对活的生物膜进行水平逐层扫描,观察生物膜形成过程与形态,根据三维坐标系Z轴距离计算生物膜厚度。结果铜绿假单胞菌生物膜形成过程分3个阶段：0-6 h为黏附阶段 6-24 h为聚集阶段,24-72 h为成熟阶段 6,24,48和72 h的生物膜厚度分别为（6.1±2.8）,（29.2±2.3）,（61.4±1.4）,（61.8±1.1）μm。统计学分析表明,生物膜厚度6 h〈24 h〈48 h,差异有统计学意义（均P〈0.01）,48与72 h的生物膜厚度差异无统计学意义（P〉0.05）。结论激光共聚焦实时观察法能够用于铜绿假单胞菌生物膜形成检测以及生物膜厚度测量。
- 邵圣文张志智顾红光
- 关键词：生物膜铜绿假单胞菌激光共聚焦显微镜
- RNA干扰铜绿假单胞菌群体感应系统对生物膜影响的研究被引量：7
- 2009年
- 目的观察小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)分子干扰铜绿假单胞菌群体感应系统后,对铜绿假单胞菌生物膜的影响。方法首先针对lasR、rhlR和rhlI基因设计4条siRNA分子,分别是si-asr1、si-hlr1、si-hlr2和si-hli1,体外转录法制备上述siRNA分子。将50nmol/LsiRNA分子与4μl脂质体混合,然后转染铜绿假单胞菌成熟期生物膜,应用平板菌落计数法检测siRNA转染后96h内生物膜活细菌数目;siRNA转染生物膜48h后,应用1%复红染色法光学显微镜观察生物膜形态改变,同时应用RT-PCR法检测生物膜弹性蛋白酶B基因lasB表达量。结果si-hlr1、si-hlr2和si-hli1分别转染铜绿假单胞菌生物膜48h,生物膜出现解体,生物膜内活细菌数目无明显改变。si-asr1转染铜绿假单胞菌生物膜48h后,生物膜形态及生物膜内活细菌数目无明显改变。si-asr1、si-hlr2和si-hli1分别转染铜绿假单胞菌生物膜48h,生物膜lasB基因表达量分别下调了49%、21%和18%。si-hlr1转染生物膜48h后,lasB基因表达量无明显改变。结论应用siRNA分子干扰铜绿假单胞菌群体感应系统的lasR、rhlR和rhlI三个关键性基因,可以促进生物膜解体,同时能部分抑制生物膜lasB基因表达,但是不能减少生物膜内活细菌数。
- 邵圣文张志智顾红光王文琴
- 关键词：铜绿假单胞菌群体感应系统生物膜
- 铜绿假单胞菌生物膜与下呼吸道反复感染关系被引量：20
- 2007年
- 目的分析铜绿假单胞菌临床分离株生物膜形成能力,探讨生物膜与感染反复发作之间的关系。方法收集痰液标本,常规方法分离鉴定得到28株铜绿假单胞菌;应用微孔法测定28株铜绿假单胞菌生物膜形成情况;应用硅胶薄片法建立体外生物膜模型,1%复红染色后观察不同生长时期的生物膜形态变化情况,同时应用平板培养法测定生物膜内活菌数目。结果28株铜绿假单胞菌临床分离株中,22株形成生物膜,生物膜阳性率为78.57%（22/28）;铜绿假单胞菌临床分离株体外生物膜成熟过程分为4个阶段：第1d为黏附阶段,第2 d为过渡阶段,第3-6d为成熟阶段,第6-10 d为解体阶段;在生物膜成熟过程中,生物膜内活菌数量可发生周期性改变。结论铜绿假单胞菌生物膜形成是下呼吸道感染反复发作的重要因素之一。
- 邵圣文樊瑜顾红光邵华张志智王文琴
- 关键词：铜绿假单胞菌生物膜下呼吸道感染
