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北京市自然科学基金(5043029)
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新型人阳离子抗菌蛋白18的构建及其表达
2006年
目的:构建新型人阳离子抗菌蛋白18(NHCAP18)的氨基酸序列,合成其编码基因并在原核细胞表达。方法:设计NHCAP18氨基酸序列,经生物信息学分析后,合成其编码基因,将该基因插入表达载体pGEX-4T-1,尔后在大肠杆菌BL21中经IPTG诱导表达。结果:NHCAP18经生物信息学分析符合改造要求,构建的重组表达质粒pGEX-4T-1/NHCAP18在大肠杆菌BL21中经IPTG诱导4 h表达量约占菌体总蛋白量的39%,NHCAP18经谷胱甘肽-Sepharose 4B亲合层析纯化后对大肠杆菌有杀灭作用。结论:NHCAP18的成功改造,重组蛋白pGEX-4T-1/HCAP18在大肠杆菌BL21中高效表达及纯化,为研究NHCAP18功能打下了良好的基础。
王水明
彭瑞云
高亚兵
吴松峰
金华
胡文化
贾永峰
王德文
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抗生素类
生物信息学
氨基酸序列
基因表达
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