广东省医学科学技术研究基金(B2011286)
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
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- 不同粒径二氧化硅致人永生化表皮细胞氧化应激相关指标改变的比较被引量：4
- 2011年
- 目的探讨不同粒径、不同浓度的纳米二氧化硅(nm-SiO2)染毒人永生化表皮(HaCaT)细胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)水平以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)活力的变化。方法将对数生长期HaCaT细胞置于含终浓度分别为0(对照)、2.5、5、10、20、40、60μg/ml的15、30、100 nm三种粒径纳米二氧化硅溶液的MEM基础培养基中培养24 h后,测定细胞增殖情况,并计算半数抑制浓度(IC50)。将对数生长期HaCaT细胞置于含终浓度分别为0(对照)、5、10、15μg/ml的15、30、100 nm三种粒径纳米二氧化硅溶液的MEM基础培养基中培养24 h。分别检测细胞内ROS的水平和SOD、CAT的活力。结果细胞存活率随着纳米二氧化硅粒径的增大而上升,随着染毒浓度的升高而下降。粒径为15、30、100 nm的纳米二氧化硅染毒HaCaT细胞的IC50分别为(19.43±1.30),(27.67±1.44),(35.91±1.59)μg/ml。与对照组相比,各粒径、各浓度纳米二氧化硅染毒HaCaT细胞内ROS水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05);HaCaT细胞内ROS水平随着纳米二氧化硅粒径的增大而下降,随着染毒浓度的升高而上升。随着浓度的升高,粒径为15 nm的纳米二氧化硅染毒HaCaT细胞内SOD水平呈升高趋势,粒径为30 nm的纳米二氧化硅染毒HaCaT细胞内SOD水平呈先升高后下降的趋势,粒径为100 nm的纳米二氧化硅染毒HaCaT细胞内SOD水平呈波动趋势。与对照组相比,各粒径、各浓度纳米二氧化硅染毒HaCaT细胞内CAT活力均升高,差异有统计学意义(P<0.05);且随着浓度的升高,各粒径二氧化硅染毒HaCaT细胞内CAT活力均呈先上升后下降的趋势。结论不同粒径的纳米二氧化硅均具有明显的细胞毒性;在一定剂量范围内,不同粒径纳米二氧化硅染毒可以诱导细胞内ROS水平均明显增加,并明显改变相关抗氧化酶SOD和CAT的酶活力水平。
- 洪文旭杨细飞张兵龚春梅黄新凤刘建军庄志雄
- 关键词：二氧化硅氧化应激抗氧化酶
- 不同粒径二氧化硅致人永生化表皮细胞氧化应激相关蛋白表达水平改变被引量：2
- 2012年
- 目的探讨不同粒径二氧化硅(SiO2)染毒致人永生化表皮细胞(HaCaT)氧化应激相关的抗氧化酶:含铜与锌超氧化物歧化酶(SOD-1)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽还原酶(GSR)蛋白表达水平的变化。方法不同质量浓度(5.0、10.0、15.0 mg/L)的15 nm和>100 nm的SiO2作用于HaCaT细胞24 h后,采用蛋白印迹法(Western blotting)观察各组细胞内SOD-1、CAT和GSR蛋白表达水平的变化。结果与对照组比较,不同粒径SiO2处理HaCaT后,细胞内SOD-1、CAT和GSR蛋白表达水平差异具有统计学意义(P<0.05)。对于15 nm组,SOD-1、CAT和GSR的蛋白表达水平随SiO2水平的增加呈现下降趋势;对于>100 nm组,3个蛋白的表达水平随SiO2水平的增加而上调。结论不同粒径SiO2的处理下,细胞内SOD-1、CAT和GSR等氧化应激相关抗氧化酶蛋白表达水平呈现明显的变化,提示SiO2诱导的生物学效应与粒径有关。
- 洪文旭杨细飞张兵龚春梅黄新凤刘建军庄志雄
- 关键词：二氧化硅氧化应激
- 不同粒径二氧化硅对人永生化表皮细胞抗氧化酶基因mRNA表达水平的影响被引量：2
- 2012年
- 目的探讨经不同粒径二氧化硅染毒人永生化表皮(HaCaT)细胞后,细胞内氧化应激相关的过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GSR)和超氧化物歧化酶(SOD-1)的mRNA表达水平的变化。方法对数生长期的HaCaT细胞分别经不同浓度(5,10,15 mg/L)、不同直径(15、30、100nm)二氧化硅粉尘处理24 h后,采用实时荧光定量PCR(RT-Q-PCR)检测CAT、GSR和SOD-1基因mRNA的表达水平。结果与对照组相比,各粒径二氧化硅染毒均能诱导HaCaT细胞CAT、GSR和SOD-1基因的mRNA表达水平发生明显变化。其中,CAT的mRNA表达水平在15 nm组和30 nm组随染毒浓度的增加明显下降;GSR的mRNA表达水平在各颗粒组中均随二氧化硅颗粒浓度的增加呈现明显的下降趋势;SOD-1的mRNA表达水平随二氧化硅颗粒浓度的增加呈现波动趋势。结论在一定剂量范围内,不同粒径二氧化硅染毒可以诱导细胞内CAT、GSR和SOD-1基因mRNA表达水平改变,推测这些改变可能参与二氧化硅的细胞毒性反应。
- 洪文旭杨细飞张兵龚春梅庄志雄刘建军
- 关键词：二氧化硅细胞毒性
