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国家自然科学基金(30400412)

作品数:8 被引量:43H指数:3
相关作者:郝友华杨东亮杨新星宋娜陈玲更多>>
相关机构:华中科技大学福建医科大学太和医院更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 8篇期刊文章
  • 1篇会议论文

领域

  • 9篇医药卫生

主题

  • 5篇细胞
  • 5篇淋巴
  • 5篇淋巴细胞
  • 4篇病毒
  • 3篇乙肝
  • 3篇乙肝病毒
  • 3篇四聚体
  • 3篇特异
  • 3篇特异性
  • 3篇细胞毒
  • 3篇聚体
  • 3篇抗原
  • 3篇抗原肽
  • 3篇复合物
  • 3篇肝病
  • 3篇T淋巴细胞
  • 3篇HBV
  • 2篇毒性
  • 2篇性细胞
  • 2篇特异性细胞

机构

  • 7篇华中科技大学
  • 1篇福建医科大学
  • 1篇太和医院
  • 1篇华中科技大学...

作者

  • 8篇杨东亮
  • 7篇郝友华
  • 5篇杨新星
  • 3篇刘贽
  • 3篇丁红晖
  • 3篇宋娜
  • 3篇陈玲
  • 2篇朱帆
  • 1篇马德强
  • 1篇喻植群
  • 1篇李东升
  • 1篇周继光
  • 1篇冯雪梅

传媒

  • 3篇免疫学杂志
  • 2篇中国免疫学杂...
  • 2篇细胞与分子免...
  • 1篇Journa...

年份

  • 1篇2016
  • 1篇2010
  • 3篇2009
  • 1篇2008
  • 2篇2007
  • 1篇2005
8 条 记 录,以下是 1-9
排序方式:
乙肝病毒蛋白抗原表位特异性CTL体外扩增条件优化
2009年
目的优化乙肝蛋白抗原表位特异性CTL体外扩增条件。方法选择急性自限性HBV感染者外周血,分离PBMC,体外用乙肝蛋白抗原表位多肽特异性刺激,特定天数后收集细胞,用CD8抗体与MHC-I类分子HBV抗原肽四聚体进行染色流式检测,检测扩增后乙肝蛋白抗原表位特异性CTL在CD8阳性细胞群中所占的频率。结果1)在不同多肽浓度刺激下,当浓度在20 ug/mL时,所测得特异性CTL占PBMC中CD8+T细胞的频率达到最高峰;2)固定刺激多肽浓度,在不同的刺激天数获得的特异性CTL频率第10天时最高;3)在不同的细胞因子培养条件中,当加入的细胞因子IL-2,IL-7,IL-15组合时所获得的特异性CTL频率最高。结论在刺激肽浓度为20μg/mL,并加入适量的细胞因子(IL-2,IL-7,IL-15),刺激10天的条件下,所获得的乙肝蛋白抗原特异性CTL频率最高。
郝友华陈玲杨新星丁红晖冯雪梅朱帆刘贽杨东亮
关键词:体外扩增
Frequencies and Characterization of HBV-specific Cytotoxic T Lymphocytes in Self-limited and Chronic Hepatitis B Viral Infection in China被引量:2
2009年
Hepatitis B virus(HBV)-specific cytotoxic T lymphocytes(CTLs) are believed to play a major role in viral clearance and disease pathogenesis during HBV infection.To clarify the differences in host immune responses between self-limited and chronic HBV infections,we constructed three HLA-A*0201/HBV tetramers with immunodominant epitopes of core18-27,polymerase 575-583 and envelope 335-343,and analyzed the HBV-specific CTLs in peripheral blood mononu-clear cells(PBMCs) from patients infected with HBV.The frequencies and expansion ability of HBV-specific CD8+ T cells in most self-limited HBV infected individuals were higher than those in chronic HBV-infected patients.HBV-specific CD8+ T cells could be induced by in vitro peptide stimulation from chronic patients with a low level of serum HBV-DNA but not from those with a high level of serum HBV-DNA.In chronic infection,no significant correlation was found either between the frequencies of HBV-specific CD8+ T cells and the viral load,or between the frequencies and the levels of alanine transaminase.Our results suggested that the frequencies of HBV-specific CTLs are not the main determinant of immune-mediated protection in chronic HBV infection and immuno-therapeutic approaches should be aimed at not only boosting a HBV-specific CD8+ T response but also improving its function.
杨新星郝友华刘贽陈玲丁红晖赵西平陆蒙吉杨东亮
关键词:细胞毒性T淋巴细胞细胞特异性乙肝病毒病毒DNA
HBV抗原肽-HLA-A*2402复合物四聚体的构建及初步检测应用被引量:3
2007年
目的:构建2种HBV抗原肽-HLA-A*2402复合物四聚体,并初步用该2种四聚体检测针对不同抗原肽特异性的细胞毒性T细胞(CTL)。方法:原核高效表达HLA-A*2402-BSP和β2m蛋白后,分别与乙型肝炎病毒抗原肽Pol756-764和Core117-125在体外复性折叠成可溶性的HLA-A*2402抗原肽复合物单体,经BirA酶作用并通过凝胶过滤层析法纯化复合物单体,分别将复合物单体与藻红蛋白标记的链霉亲和素按一定比例耦合构建成2种HBV抗原肽四聚体。最后进行流式细胞术检测。结果:Dot-ELISA和ELISA检测显示获得了2种具有天然构象的生物素化的HBV抗原肽-HLA-A*2402复合物单体。结论:构建的2种四聚体可以检测乙型肝炎感染者体内特异性的CTL。
杨新星郝友华宋娜陈玲刘贽杨东亮
关键词:T淋巴细胞生物素化
乙肝病毒感染不同阶段抗原肽特异性细胞毒性T淋巴细胞的初步研究被引量:15
2016年
目的:为了阐明HBV感染不同阶段机体免疫功能的不同。方法:分别构建了我国最高频等位基因HLA-A*0201三种常见抗原肽表位(HBVcore18-27、pol575-583、env335-343)四聚体复合物,并用这些四聚体检测HBV感染外周血单个核细胞(PBMCs)中HLA-A*0201限制性抗原特异性CD8^+T细胞的频率、功能及CD127的表达。结果:在大多数自限性HBV感染者的PBMCs中抗原特异性CD8^+T细胞的频率和增殖能力都高于慢性HBV感染者。在低病毒载量的免疫低复制期抗原特异性CD8^+T的数量和在高病毒载量、肝脏损害免疫清除期及免疫耐受期抗原特异性CD8^+T细胞频率是相似的,同病毒定量及ALT水平无显著相关性。慢性HBV感染者抗原特异性CD8^+T细胞增殖能力和病毒滴度呈反比。在自限性HBV感染患者抗原特异性CD8^+T细胞分泌IFN-γ的功能明显高于慢性HBV患者,在免疫耐受期基本丧失产生细胞因子的能力;HBV感染后不同免疫状态的HBs Ag水平不同,免疫耐受期最高,其次为免疫清除期、再活动期,低复制期的最低。而且随着HBs Ag水平下降,同HBV DNA的相关性也逐渐下降。慢性HBV感染者中CD8^+CD127^+T细胞要低于对照组及自限性感染组,特别是在HBe Ag阳性的免疫耐受期及免疫清除期组患者中CD8^+CD127^+T细胞比例更低。结论:慢性HBV感染中抗原特异性CD8^+T细胞的频率不是决定免疫应答的唯一因素,慢性乙肝患者体内记忆性的抗原特异性CD8^+T细胞并未被完全清除或缺失,这为治疗性疫苗和免疫恢复治疗提供了可行性。
杨新星李东升周继光杨东亮郝友华
关键词:乙肝病毒T淋巴细胞免疫功能
TIM-3分子与临床疾病相关研究进展被引量:2
2010年
TIM-3是TIMs家族中一个重要的成员,具有多种生物学作用。它是区分Th1/Th2细胞特异性的表面标志,还参与机体的固有免疫和特异性免疫应答的调节,与多种临床疾病的致病机制密切相关。本文就TIM-3的结构、表达、配体及与多种临床疾病的关系作一综述。
马德强郝友华杨东亮
关键词:临床疾病
特异性细胞毒T淋巴细胞清除胞内乙肝病毒机制的研究进展被引量:20
2005年
郝友华杨东亮
关键词:HBVCTL特异性
嗜肝DNA病毒感染动物模型研究进展
目的动物模型是人们了解病毒复制、病毒感染自然史、病毒持续感染和致病的分子机制,研制有效抗病毒药物和疫苗的不可或缺的工具。嗜肝DNA病毒不仅包括HBV,也包括其它哺乳动物的嗜肝病毒,如土拨鼠肝炎病毒(WHV)、地松鼠肝炎病...
杨东亮
关键词:病毒感染HBV感染分子机制
文献传递
HBc-HLA-A* 1101-β2m复合物单体及其四聚体的制备和鉴定被引量:1
2007年
目的制备HBc-HLA-A * 1101-β2m复合物单体和四聚体,并对其特异性进行了鉴定。方法原核高效表达的HLA-A * 1101-BSP和β2m蛋白,在抗原肽(乙型肝炎病毒的核心蛋白HBc88-96)的存在下,体外复性折叠成可溶性的HLA-A * 1101抗原肽复合物单体,经BirA酶作用并通过凝胶过滤层析法纯化复合物单体;然后将此复合物单体与藻红蛋白标记的链霉亲和素按一定比例耦合构建成四聚体;最后用流式细胞仪检测分析该四聚体结合特异性CTL的能力。结果Western blot和Dot-ELISA检测显示所制备的HLA-A * 1101抗原肽复合物单体具有天然构象,且可被生物素化;流式细胞仪分析显示所制备的四聚体可与HLA-A11^+供者的抗原特异性CTL结合。结论成功制备了具有完整构象的生物素化HLA-A * 1101抗原肽复合物单体;此四聚体可以特异检测抗原特异性的细胞毒性T细胞。
郝友华杨新星丁红晖宋娜朱帆喻植群杨东亮
关键词:四聚体
三种常见HBV抗原肽-HLA-A*0201复合物四聚体的构建及初步检测应用被引量:2
2008年
目的体外构建三种常见HBV抗原肽-HLA-A*0201复合物四聚体,并初步用该三种四聚体对抗原肽特异性的细胞毒性T细胞(CTL)进行了初步检测。方法原核高效表达的HLA-A*0201-BSP和β2m蛋白,分别和三种HBV抗原肽(HBVCore18-27,Env335-343,Pol575-583)体外复性折叠成可溶性的HLA-A*0201抗原肽复合物单体,经BirA酶作用并通过凝胶过滤层析法纯化复合物单体,分别将复合物单体与藻红蛋白标记的链霉亲和素按一定比例耦合构建成相应的三种抗原肽四聚体。最后进行流式细胞仪检测。结果Dot-ELISA和ELISA检测显示获得了三种具有天然构象的生物素化的HBV抗原肽-HLA-A*0201复合物单体。构建的三种四聚体均可以检测到相应特异性的CTL,在自限性感染患者体内针对乙肝核心抗原(core18-27)的CTL细胞频数(0.18%)高于针对聚合酶抗原(pol575-583)(0.08%)和包膜抗原(env335-343)(0.06%)。结论成功构建了三种具有完整构象的生物素化HBV抗原肽-HLA-A*0201复合物单体,所构建的三种四聚体都可以检测到抗原特异性的CTL。
杨新星郝友华丁红晖宋娜刘贽陈玲杨东亮
关键词:T淋巴细胞四聚体
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