国家现代农业产业技术体系建设项目(CARS-22-ZJ0103)
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 相关作者：李军赵爱春金筱耘王茜龄李镇刚更多>>
- 相关机构：西南大学更多>>
- 发文基金：重庆市蚕桑重大科技专项国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 桑树花青素合酶基因的克隆与信息学分析被引量：3
- 2012年
- 花青素合酶ANS是花青素合成过程中的一个关键限速酶。本文利用同源克隆、RT-PCR从桑椹中克隆出花青素合酶(MaANS)基因,并进行生物信息学分析和组织特异性表达分析。通过染色体步移法获得的MaANS基因的5′端和3′端,获得基因全长1535bp,由2个外显子和1个内含子组成,包含完整CDS区域为1077bp,编码358个氨基酸,与来源于草莓、甘薯、苹果、沙梨的ANS基因同源性均达到80%以上。MaANS编码的蛋白质属于2-酮戊二酸双加氧酶家族。MaANS在进化树中的位置与草莓最近,与苹果、沙梨次之。组织表达分析表明,MaANS基因在幼叶和成熟果实中高水平表达,表明该基因的表达具有组织特异性,为研究桑树果色的形成原因和表达调控奠定了基础。
- 张琼予李军赵爱春王茜龄金筱耘李镇刚余茂德
- 关键词：桑树克隆
- β-1，3-葡聚糖酶基因克隆、表达及抗菌活性的研究被引量：2
- 2012年
- 通过RT-PCR的方法分别从小麦和水稻的cDNA中克隆获得β-1,3-葡聚糖酶基因(Glu基因),分别命名为TaGlu9507和OsGlu30。它们的序列分析表明这两个克隆均含一个1002bp的开放阅读框(ORF),编码334个氨基酸,各自的N-端含有一个长20和29个氨基酸残基的信号肽序列。将不含信号肽序列的TaGlu9507和OsGlu30编码区DNA片段分别克隆进pET28-a(+)表达载体,并转入大肠杆菌BL21(DE3),经0.5mmol/L IPTG诱导3h后获得了高量表达,表达量分别占大肠杆菌可溶性蛋白的49.7%和26.7%,表达产物对黑曲霉、酵母等真菌生长均有较为明显的抑制作用。本结果更进一步表明β-1,3-葡聚糖酶基因是植物真菌病防治的潜在目的基因群之一。
- 李镇刚赵爱春王茜龄金筱耘李军余茂德
- 关键词：CDNA原核表达植物真菌病基因克隆
- Monellin-EGFP融合蛋白在毕赤酵母中的表达被引量：3
- 2012年
- 根据已报道的Monellin甜蛋白氨基酸序列,结合毕赤酵母与桑树密码子的偏好性,人工设计合成单链monellin基因,并与增强型绿色荧光蛋白EGFP基因连接,构建融合表达载体。采用电击转化法成功将表达载体导入毕赤酵母GS115中,并获得高效表达的重组子pPIC9K-M-E。经PCR检测,SDS-PAGE和Western Blot杂交证实已表达出融合蛋白,该蛋白经纯化与盲测实验,结果显示其甜度约为标准蔗糖的500倍。
- 金筱耘赵爱春李军李镇刚王茜龄吴存容余茂德
- 关键词：绿色荧光蛋白真核表达
- 桑树花青素合成酶基因的克隆与信息分析
- 花青素合成酶ANS是花青素合成过程中的一个关键限速酶。本文利用同源克隆,RT-PCR等技术从桑椹中克隆出三个花青素合成酶（MaANS）基因,并进行生物信息学分析和组织特异性表达分析。获得的MaANS基因片段长度为779b...
- 余茂德张琼予李军赵爱春王茜龄金筱耘
- 关键词：桑树克隆
- 文献传递
