博士科研启动基金(XJ201118)
- 作品数：8 被引量：61H指数：4
- 相关作者：李俊黄成韩静文陈昭琳马陶陶更多>>
- 相关机构：安徽医科大学安徽省安泰医药生物技术有限责任公司更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金国家自然科学基金安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 酒精性脂肪肝中库普弗细胞表型变化的探讨被引量：4
- 2015年
- 目的：通过建立小鼠酒精性脂肪肝（ AFL）的模型,并采用肝脏原位灌流,分离出形态良好、具有生物学活性的库普弗细胞（ KCs ）,研究其在 AFL 中的作用。方法采用Lieber-DeCarli液体饮食加一次急性酒精灌胃,建立小鼠AFL模型。造模周期为16 d,于第16天灌胃9 h后处死小鼠,取小鼠肝脏、血清及KCs。检测各组血清谷丙转氨酶/谷草转氨酶（ ALT/AST）、肝匀浆、血清中总胆固醇/三酰甘油（ TG/TC）水平变化和肝脏病理切片HE、油红染色。选取原位灌流的方法分离KCs,采用流式细胞术分析KCs表型及组成的改变。荧光实时定量PCR（ qRT-PCR）检测组织及提取细胞中各细胞因子水平。结果 ALT/AST、TG/TC等反应肝损伤的指标模型组显著高于对照组,HE及油红染色结果与之一致,表明小鼠AFL模型建立成功。肝脏原位灌流每只小鼠细胞得率约1．5×106~2．0×106个。以小鼠巨噬细胞表面标记分子F4/80及白细胞共同抗原CD45双标设门,流式细胞术分析F4/80和 CD45双阳性细胞,在模型中肝脏固有CD68＋细胞显著降低,并出现大量的浸润单核细胞。 qRT-PCR结果显示,在肝组织及原代KCs中细胞因子,肿瘤坏死因子（TNF-α）、白介素-6（IL-6）、单核细胞趋化蛋白（MCP-1）水平显著升高。结论小鼠AFL模型建立成功,肝脏原位灌流法细胞得率较高, AFL 的发病可能与 KCs 构成、表型改变,与细胞因子升高介导外周单核细胞浸润有关。
- 程希胡超杰李晚霞黄成李俊
- 关键词：酒精性脂肪肝库普弗细胞细胞因子
- 栀子苷与栀子柏皮汤中栀子苷在MDCK细胞跨膜转运模型上的转运研究被引量：8
- 2014年
- 目的考察栀子苷与栀子柏皮汤中栀子苷在MDCK细胞跨膜转运模型上的转运特性。方法利用MTT实验筛选出栀子苷和栀子柏皮汤在MDCK细胞上的安全浓度,以MDCK细胞跨膜转运模型研究药物的双向转运,考察时间、药物浓度、P-糖蛋白(P-gp)抑制剂及EDTA对栀子苷转运的影响,然后比较相同浓度的栀子苷和栀子柏皮汤中栀子苷吸收转运的差异,采用HPLC法检测栀子苷的浓度,计算其表观渗透系数(Papp)。结果栀子苷在MDCK细胞模型上的转运量具有一定的时间和浓度依赖性,P-gp抑制剂对其转运没有明显影响,EDTA能够增加其跨膜转运量,各浓度栀子柏皮汤中栀子苷的吸收Papp分别为(8.96±0.35)×10-7cm·s-1,(8.95±0.38)×10-7cm·s-1和(9.16±0.30)×10-7cm·s-1、明显高于栀子苷单体的吸收Papp(5.85±0.44)×10-7cm·s-1、(6.88±0.38)×10-7cm·s-1和(6.31±0.19)×10-7cm·s-1(P<0.05)。结论栀子苷在MDCK细胞模型上表现为被动扩散,且不受P-gp的影响,可能有细胞旁路转运,栀子柏皮汤能促进栀子苷的吸收。
- 韩静文李俊黄成陈昭琳胡婷婷
- 关键词：栀子苷栀子柏皮汤跨膜转运被动转运
- 栀子苷对PDGF诱导的HSC-T6增殖活化的影响被引量：1
- 2015年
- 目的探讨栀子苷抑制血小板衍生生长因子(PDGF)介导的大鼠肝星状细胞(HSC-T6)增殖活化的作用及其可能机制。方法培养HSC-T6,体外给予不同浓度(20、50、100、200、400μg/ml)的栀子苷,通过MTT法检测细胞的活力;选取20、50、100μg/ml的栀子苷,PDGF刺激后,采用MTT、实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法检测细胞增殖和细胞活化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;进一步采用Western blot法检测栀子苷对MAPK通路蛋白P-ERK、P-p38和Akt/mT OR/p70S6K通路蛋白的表达。结果栀子苷可以抑制PDGF诱导的HSC-T6的增殖和减少活化标志物α-SMA的表达,并且明显抑制Akt、mT OR和p70S6K的磷酸化水平,但是对ERK、p38活化水平无显著影响。结论栀子苷可以抑制PDGF诱导的HSC-T6的增殖与活化,可能起到抗纤维化的作用,这一作用的产生可能与Akt/mT OR/p70S6K通路有关。
- 孔令娜占书箱黄成马陶陶林翔李俊
- 关键词：栀子苷
- 夏枯草总三萜对LPS诱导的RAW264.7细胞分泌炎症因子的影响被引量：18
- 2013年
- 目的探讨夏枯草总三萜(TTP)对细菌脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞分泌炎症因子的调节及对Jak/Stat通路的影响。方法培养RAW264.7细胞系,体外用LPS(2μg/ml)刺激,ELISA法检测不同质量浓度的TTP(12.5、25、50、100、200μg/ml)分别作用24、48、72 h后对细胞分泌前列腺素E2(PGE2)的影响,选取质量浓度为25、50、100μg/ml的TTP,进一步用RT-PCR法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)、Jak2和Stat3 mRNA的表达,ELISA法检测细胞上清中TNF-α、IL-6蛋白的表达。结果 TTP可以抑制细胞分泌PGE2,并且呈浓度和时间依赖性(P<0.05,P<0.01),TTP可以抑制LPS刺激的RAW264.7细胞分泌TNF-α、IL-6(P<0.01),并且明显抑制Jak2、Stat3的基因表达(P<0.01)。结论 TTP可以抑制RAW264.7细胞分泌炎症因子,调节细胞炎症因子网络的平衡,具有一定的抗炎作用,且这一作用的产生可能与Jak/Stat通路有关。
- 解丹黄成林珍周德喜孔令娜杨莹莹李俊
- 关键词：夏枯草抗炎免疫
- 8-异丙胺亚甲基橙皮素(IPHP)在Caco-2细胞模型上跨膜转运的研究被引量：3
- 2015年
- 目的利用Caco-2细胞模型研究8-异丙胺亚甲基橙皮素(IPHP)在小肠吸收转运的机制。方法在Caco-2细胞模型上进行IPHP的跨膜转运实验,探讨药物浓度、p H、温度、P-gp抑制剂维拉帕米、MRP2抑制剂MK-571和丙磺舒对IPHP在体外细胞模型上跨膜转运的影响。结果 IPHP在Caco-2细胞模型上的转运具有一定的浓度依赖性,IPHP不同浓度从A侧到B侧的渗透系数Papp(AP-BL)(×10-5)分别为:(2.21±0.200)、(3.56±0.306)、(3.81±0.179)、(4.23±0.229)、(4.17±0.262)cm·s-1,B侧到A侧的渗透系数Papp(BL-AP)(×10-5)分别为:(3.57±0.209)、(4.51±0.113)、(4.97±0.229)、(5.24±0.550)、(5.07±0.557)cm·s-1,外排率分别为:1.61、1.26、1.3、1.23、1.21。温度和p H对其转运均有影响,而P-gp抑制剂对于IPHP的转运没有明显的影响,MRP2抑制剂在一定程度上增加了IPHP的转运量(P<0.05)。结论 IPHP在Caco-2细胞模型上的转运方式主要是被动扩散,且其转运不受P-gp外排蛋白影响,而外排蛋白MRP2可能参与了IPHP的外排转运。
- 胡婷婷黄成孟晓明陈昭琳沈陈林李俊
- 关键词：CACO-2细胞
- 豹皮樟总黄酮预防急性炎症与内质网应激的关系被引量：4
- 2013年
- 目的研究豹皮樟总黄酮(TFLC)对急性炎症的预防作用并探讨其是否与内质网应激(ERS)调控的抗炎作用有关。方法采用角叉菜胶皮下注射,诱导大鼠足肿胀模型,观察TFLC的抗炎作用,病理学分析肿胀足爪部位变化,并检测大鼠血清和足爪组织中一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)、前列腺素E2(PGE2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-10(IL-10)的含量。Western blot方法分析ERS相关蛋白CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)和葡萄糖调节蛋白78(GRP 78)的变化。结果 TFLC可以明显抑制角叉菜胶所致的大鼠足肿胀,并且可以降低血清以及炎症组织渗出液中NO、MDA、PGE2、TNF-α的含量,同时升高IL-10的表达。Western blot结果显示,TFLC可以明显降低腹腔巨噬细胞中CHOP和GRP 78的表达。结论 TFLC对角叉菜胶诱导的大鼠足肿胀有明显的抑制作用,其作用机制可能通过影响炎症因子分泌及抑制ERS诱导的炎症损伤。
- 钟健李俊黄成余世春马陶陶陈昭琳
- 关键词：豹皮樟总黄酮足肿胀内质网应激炎症因子
- 栀子柏皮汤不同配伍在大鼠体内的药代动力学研究被引量：10
- 2014年
- 目的:通过测定栀子苷单体及栀子(ZZ)、栀子-黄柏(ZZ-HB)、栀子-甘草(ZZ-GC)和栀子柏皮汤(ZZBPD)4种汤剂中栀子苷在大鼠体内的药动学参数,考察栀子柏皮汤配伍的变化对栀子苷药动学的影响。方法:将SD大鼠随机分为5组,分别灌胃给予含等量栀子苷的栀子苷单体溶液、栀子、栀子-黄柏、栀子-甘草和栀子柏皮汤,采用HPLC测定给药后0.08,0.25,0.5,0.75,1,1.5,2,4,6,8,10 h时的血药浓度,采用3P97软件计算药动学参数。结果:栀子苷单体及4种汤剂中栀子苷在大鼠体内的药动学参数有明显差别(P<0.05),与栀子苷单体组相比,4组汤剂的AUC及T1/2均显著增加,其中栀子柏皮汤的Cmax,Tmax,T1/2,AUC0-t,AUC0-∞均高于其他各配伍组,栀子-黄柏、栀子-甘草和栀子柏皮汤组的AUC0-t,AUC0-∞及T1/2均高于栀子组,栀子-甘草和栀子柏皮汤组Tmax明显延长。结论:栀子柏皮汤不同配伍对栀子苷的药动学存在不同的影响,汤剂给药的生物利用度高于单体给药,全方组给药的生物利用度要显著高于其他各配伍组,说明药材之间的相互作用能促进栀子苷的吸收,延缓其消除,进而提高其生物利用度。
- 韩静文黄成宋珏马陶陶曹璐李俊
- 关键词：栀子柏皮汤栀子苷配伍药代动力学
- 栀子柏皮汤对α-萘异硫氰酸酯诱导的肝内胆汁淤积大鼠的保护作用被引量：13
- 2013年
- 目的探讨栀子柏皮汤对α-萘异硫氰酸酯(ANIT)诱导的肝内胆汁淤积大鼠的保护作用及可能机制。方法实验组大鼠灌胃给予栀子柏皮汤7 d,第7天给药后4 h给ANIT造模。48 h后,测血清总胆红素(TBIL)含量、碱性磷酸酶(ALP)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)活性及肝匀浆组织中丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。RT-PCR法及Western blot法检测胆汁代谢相关的转运体胆盐输出泵(BSEP)、钠-牛磺酸共转运体(NTCP)及氧化应激相关酶细胞色素CYP2E1的表达。结果栀子柏皮汤能够呈剂量依赖性的降低血清TBIL、ALP、ALT、AST、GGT及肝组织中MDA、GSH含量;提高肝组织中SOD、GSH-Px活性;增加肝组织中BSEP的表达,降低NTCP及CYP2E1的表达。结论栀子柏皮汤对ANIT诱导的肝内胆汁淤积大鼠具有保护作用,其作用机制可能与调控胆汁代谢相关转运体及抗氧化损伤有关。
- 曹璐李俊黄成韩静文
- 关键词：栀子柏皮汤ANITCYP2E1
