河北省自然科学基金(303496)
- 作品数：10 被引量：29H指数：4
- 相关作者：李玉坤王燕尚可支忠继谭密密更多>>
- 相关机构：河北医科大学第三医院河北工程大学河北科技大学更多>>
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- 破骨细胞分化中的信号传导及细胞因子调节被引量：1
- 2006年
- 尚可李玉坤
- 关键词：破骨细胞分化细胞因子调节信号传导成骨细胞骨硬化症骨吸收
- 骨疏康对1型糖尿病大鼠体外培养的破骨细胞影响的初步探讨被引量：4
- 2004年
- 目的 探讨骨疏康对1型糖尿病大鼠体外培养的破骨细胞影响。方法 用RANKL和M-CSF诱导1型糖尿病大鼠的股骨骨髓进行体外培养生成类破骨细胞样细胞(OLC)。实验分为正常对照组,1型糖尿病组,正常对照+骨疏康组,1型糖尿病+骨疏康组。骨疏康的浓度为20μg/ml。细胞培养7天后,贴壁细胞固定,抗酒石酸盐酸性磷酸酶染色,破骨细胞计数。结果 1型糖尿病大鼠与正常大鼠组的破骨细胞数比较无明显差别(P>0.05);经骨疏康干预后,1型糖尿病大鼠与正常大鼠的破骨细胞数都明显减少(P<0.01)。结论 1型糖尿病早期破骨细胞形成与正常对照组无明显差异。中药骨疏康明显抑制正常大鼠和1型糖尿病大鼠的破骨细胞形成。
- 王燕尚可李玉坤陶夏莉
- 关键词：骨疏康1型糖尿病体外培养破骨细胞
- RANKL,M-CSF和破骨细胞体外培养被引量：7
- 2004年
- 骨是一不断更新的组织,骨重建贯穿生命过程的始终.骨重建包括骨吸收和随后进行的骨形成.骨形成和骨吸收的动态平衡维持着正常的骨代谢.当骨吸收大于骨形成时,导致骨量减少.骨吸收的主要细胞是多核的破骨细胞(Osteoclast,OC).近年来,随着分子生物学和细胞生物学的发展,人们对骨髓微环境在调节破骨细胞形成和骨吸收方面有了较深入的了解.体内和体外模型的建立,为研究正常和病理情况下的破骨细胞的生物学特性提供了重要信息.在骨髓微环境中,成骨细胞和破骨细胞的细胞间接触,信号传递调控着破骨细胞的分化、活化及其功能活动.这对骨的纵向生长、更新及峰值骨量的保持等具有决定性的作用.
- 王燕支忠继李玉坤
- 关键词：RANKLM-CSF破骨细胞体外培养骨吸收
- 阿仑膦酸钠对OVX大鼠体外培养的破骨细胞的作用
- 2005年
- 目的研究第三代双膦酸盐类药物阿仑膦酸钠(alendronate,固邦)对体外培养的破骨细胞的作用。方法建立骨质疏松大鼠模型,于0、2、4、8w进行体外骨髓破骨细胞样细胞(OLC)的培养,并进行阿仑膦酸钠干预,观察OLC数量和形态的变化。结果OVX组大鼠OLC数量高于C组和Sham组;在所有组中,阿仑膦酸钠均能使OLC显著减少(P<0.01)。结论大鼠去卵巢后OLC形成增加;阿仑膦酸钠能显著抑制OVX大鼠体外培养的OLC的形成。
- 尚可王燕谭密密李玉坤
- 关键词：OVX大鼠体外细胞培养破骨细胞阿仑膦酸钠骨质疏松
- 骨疏康对1型糖尿病骨质疏松大鼠体外培养的破骨细胞影响被引量：5
- 2006年
- 目的:观察骨疏康对1型糖尿病骨质疏松大鼠体外培养破骨细胞的影响。方法:雌性Wistar大鼠60只,2.5～3月龄,按照体重随机分为正常组(n=24)和1型糖尿病组(n=36)两大组,正常组又分为正常对照组(n=8)、正常假手术组(n=8)和正常双侧卵巢切除组(n=8);1型糖尿病组又分为糖尿病对照组(n=12)、糖尿病假手术组(n=12)和糖尿病双侧卵巢切除组(n=12)。单剂量腹腔注射链脲菌素(柠檬酸钠缓冲液制成2％溶液) 60 mg·kg-1制备1型糖尿病大鼠模型;无菌条件下切除大鼠双侧卵巢制备骨质疏松模型。在造模后第0,2,4,8周末时用sRANKL和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)诱导大鼠骨髓进行体外破骨细胞培养,并观察骨疏康(20μg·mL-1)的影响。结果:糖尿病对照组破骨细胞明显高于对照组(P<0．01),糖尿病双侧卵巢切除组破骨细胞明显高于对照组(P<0．01),糖尿病骨质疏松组破骨细胞明显高于糖尿病对照组和正常双侧卵巢切除组(P<0．01)。经20μg·mL-1骨疏康干预后,各组破骨细胞数均明显减少(P<0．01)。结论:骨疏康明显抑制1型糖尿病骨质疏松大鼠体外培养的破骨细胞生成。
- 李玉坤王燕尚可谭密支忠继
- 关键词：骨疏康破骨细胞
- 正常和链脲佐菌素诱导糖尿病模型大鼠体外破骨细胞样细胞的培养方法被引量：1
- 2007年
- 目的:建立成年正常大鼠和链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠骨髓体外破骨细胞样细胞培养的方法。方法:实验于2003-05/2004-03在河北医科大学第三医院中心实验室完成。①雌性Wistar大鼠,2.5～3.0个月龄,用链脲佐菌素溶液,按60mg/kg单剂量进行腹腔注射,注射48h后检测血糖,血糖≥16.7mmol/L视为诱导糖尿病模型成功。随机选择链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠及成年正常大鼠各1只,麻醉下处死,无菌条件下取股骨,收集骨髓。②用α-MEM冲洗骨髓细胞,并稀释骨髓细胞至1.5×109L-1的浓度,将细胞悬液置于24孔培养板内,培养液为无酚红α-MEM,其中含体积分数为0.1的胎牛血清、30μg/L细胞核因子κB受体活化因子配基、10μg/L巨噬细胞集落刺激因子。培养板置于体积分数为0.05的CO2和37℃培养箱内培养,用倒置相差显微镜观察破骨细胞样细胞形态变化。③细胞培养7d后,进行细胞固定和抗酒石酸酸性磷酸酶染色,抗酒石酸酸性磷酸酶染色阳性且细胞核≥3个的细胞认定为破骨细胞样细胞。④在倒置显微镜下,计数破骨细胞样细胞数。结果:①倒置显微镜下动态观察细胞,发现细胞的形态逐渐由圆形变为椭圆形、长梭形和不规则形状。在培养的第3天始,单核细胞融合为多核细胞,破骨细胞样细胞形成。在第5,6天破骨细胞样细胞形成明显增多。②破骨细胞样细胞酶学检查,可见有大量多核且抗酒石酸酸性磷酸酶染色阳性的细胞。③破骨细胞样细胞计数:实验获得的破骨细胞样细胞的数量能够满足细胞计数的需要,与成年正常大鼠相比,链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠破骨细胞样细胞数量增加(92.50±10.87,107.00±13.72个/孔)。结论:正常成年大鼠和链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠骨髓体外破骨细胞样细胞的培养方法建立,分离培养的破骨细胞样细胞有多核、抗酒石酸酸性磷酸酶阳性的特性。
- 尚可王燕李玉坤
- 关键词：破骨细胞链脲菌素
- 糖尿病骨质疏松大鼠破骨细胞的改变被引量：6
- 2007年
- 目的:采用腹腔注射链脲佐菌素+切除双侧卵巢复合方法建立绝经后糖尿病骨质疏松大鼠模型,观察糖尿病骨质疏松大鼠破骨细胞的改变。方法:实验于2003-12/2004-08在河北医科大学第三医院中心实验室完成。①实验材料:选用2.5～3个月龄清洁级雌性Wistar大鼠60只。②实验分组:完全随机设计分为6组:正常对照组、正常假手术组及正常双侧卵巢切除组均为8只;糖尿病对照组、糖尿病假手术组及糖尿病双侧卵巢切除组均为12只。③实验干预:采用链脲佐菌素诱导制备糖尿病大鼠模型1周后,将大鼠麻醉结扎输卵管切除卵巢。假手术组大鼠不作卵巢切除,余操作同去卵巢组。卵巢切除后0,2,4,8周随机选择各组大鼠1只,收集骨髓,进行体外骨髓破骨细胞样细胞的培养。④实验评估:切除双侧卵巢后2,4,8周时测量各组大鼠体质量、血糖;细胞培养7d后,进行细胞固定和抗酒石酸酸性磷酸酶染色(抗酒石酸酸性磷酸酶染色阳性且细胞核≥3个的细胞认定为破骨细胞样细胞);倒置显微镜计数破骨细胞样细胞数量。结果:制成糖尿病模型及切除卵巢后,3组糖尿病大鼠死亡7只,进入结果分析53只。①各组大鼠血糖和体质量的变化:切除卵巢0,2,4,8周,3组糖尿病大鼠血糖均高于正常组(P<0.01),体质量均低于正常组(P<0.01);4周时,正常双侧卵巢切除组体质量高于同期正常对照组和正常假手术组;糖尿病双侧卵巢切除组体质量在2,4,8周时均高于同期糖尿病对照组和糖尿病假手术组(4周P<0.05,8周P<0.01)。②切除卵巢后各组大鼠体外培养的破骨细胞样细胞形成的变化:糖尿病双侧卵巢切除大鼠破骨细胞多于糖尿病大鼠及正常去卵巢大鼠,且破骨细胞数量随着去卵巢的时间和糖尿病病程延长而增加。③骨髓来源的体外破骨细胞样细胞的形成与血糖、糖尿病病程及去卵巢时间的相关性分析:破骨细胞数量与糖尿�
- 尚可王燕李玉坤
- 关键词：糖尿病卵巢切除术细胞培养破骨细胞
- 阿仑膦酸钠对1型糖尿病骨质疏松大鼠体外培养的破骨细胞作用被引量：4
- 2006年
- 目的研究第三代二膦酸盐类药物阿仑膦酸钠(alendronate,固邦)对体外培养的1型糖尿病骨质疏松大鼠的破骨细胞的作用。方法建立1型糖尿病骨质疏松大鼠模型,于0、2、4和8周进行体外骨髓破骨细胞样细胞(OLC)培养,并进行阿仑膦酸钠干预,观察OLC数量变化。结果1型糖尿病组大鼠OLC高于正常对照组;1型糖尿病骨质疏松组大鼠OLC高于1型糖尿病组;在所有干预组中,阿仑膦酸钠显著减少OLC(P<0.01)。结论破骨细胞形成增加可能是1型糖尿病骨质疏松的原因之一,阿仑膦酸钠抑制1型糖尿病骨质疏松大鼠体外培养的OLC的形成。
- 李玉坤尚可王燕杨韧
- 关键词：破骨细胞样细胞阿仑膦酸钠
- 护骨素与骨质疏松研究进展被引量：2
- 2007年
- 孙立亮张伟李玉坤
- 关键词：护骨素基因表达骨质疏松
- 缬沙坦、灯盏花素对1型糖尿病大鼠破骨细胞的影响被引量：2
- 2006年
- 目的研究体外培养的1型糖尿病大鼠破骨细胞的特点及缬沙坦、灯盏花素对破骨细胞的影响,探讨1型糖尿病骨丢失的机制。方法以链脲佐菌素(STZ)制成1型糖尿病大鼠模型并用缬沙坦、灯盏花素进行干预,实验分为正常对照组、1型糖尿病组、缬沙坦组、灯盏花素组。于制成模型后4周进行破骨细胞体外培养。结果1型糖尿病组和缬沙坦组大鼠体外培养的破骨细胞数量多于正常对照组,1型糖尿病组和缬沙坦组之间无差异;灯盏花素组体外培养的破骨细胞数量与正常对照组比较差异无显著性,但少于同期1型糖尿病组与缬沙坦组。结论1型糖尿病时破骨细胞数量增加,导致骨吸收大于骨形成,可能是1型糖尿病骨丢失的发病机制。灯盏花素治疗能影响体外培养的破骨细胞数量。
- 李玉坤尚可王燕谭密密
- 关键词：破骨细胞1型糖尿病体外培养灯盏花素
