国家自然科学基金(31000432)
- 作品数：36 被引量：125H指数：7
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- 软骨脱细胞基质多孔支架与山羊髓核细胞生物相容性研究
- 目的:制备软骨脱细胞基质多孔支架,并探讨其与山羊髓核细胞的生物相容性。方法:猪关节软骨经研磨、脱细胞、冷冻干燥技术等处理制成三维多孔支架;从山羊腰椎间盘中分离出髓核细胞,培养后获取P1代细胞;四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测...
- 伍耀宏徐宝山李秀兰杨强张杨夏群张春秋许海委
- 关键词：脱细胞软骨髓核细胞生物相容性
- 文献传递
- 新型一体化纤维环-髓核双相支架的制备与评估被引量：9
- 2013年
- 目的用脱细胞脱钙骨基质和脱细胞髓核基质构建新型一体化纤维环-髓核双相支架,并进行理化检测,探讨其作为组织工程椎间盘支架的可行性。方法取猪股骨近端松质骨,塑形成外径10 mm、内径5 mm、厚3 mm的骨环,经脱脂、脱钙、脱细胞处理制备成纤维环相支架;取猪尾髓核组织,Triton X-100和脱氧胆酸联合脱细胞后粉碎、离心,制备脱细胞髓核基质;将制备的脱细胞髓核基质注入纤维环相支架中央,冷冻干燥,联合应用紫外照射和碳化二亚胺进行交联,制备一体化纤维环-髓核双相支架。通过大体观察、HE染色、扫描电镜观察支架结构;测定支架的孔隙率、吸水率、压缩弹性模量;MTT法检测25%、50%、100%支架浸提液对新西兰大白兔脂肪来源干细胞(adipose-derived stemcells,ADSCs)增殖的影响;将ADSCs接种到支架上,活/死细胞染色观察细胞在支架上的活性。结果大体观察支架呈乳白色;HE染色可见支架均质红染,无细胞成分残留;扫描电镜可见外层纤维环相支架孔径大小均匀一致,孔隙相互贯通,中央脱细胞髓核基质微丝相互连接,形成均匀网状结构,交界处连接紧密。纤维环相支架孔径为(343.00±88.25)μm,一体化纤维环-髓核双相支架孔隙率为82.98%±7.02%、吸水率为621.53%±53.31%,压缩弹性模量为(89.07±8.73)kPa。经MTT测定支架浸提液对ADSCs增殖无影响;活/死细胞染色可见细胞在支架上生长良好,无死细胞。结论用脱细胞脱钙骨基质和脱细胞髓核基质构建的一体化纤维环-髓核双相支架具有合适的孔径和孔隙率且无毒,力学性能与人正常椎间盘接近,是构建组织工程椎间盘的理想支架载体。
- 许海委徐宝山杨强李秀兰马信龙夏群张春秋伍耀宏
- 软骨脱细胞细胞外基质多孔支架与山羊髓核细胞生物相容性研究被引量：1
- 2013年
- 目的制备软骨脱细胞细胞外基质多孔支架，并探讨其与山羊髓核细胞的生物相容性。方法猪关节软骨经研磨、脱细胞、冷冻干燥技术等处理制成三维多孔支架；从山羊腰椎间盘中分离出髓核细胞，培养后获取P1代细胞；四甲基偶氮唑蓝（MTT）检测支架浸提液毒性；将髓核细胞以5x106／ml的密度接种在支架上体外培养48h，通过倒置显微镜、HE染色、死活细胞染色（LIVE／DEAD染色）、扫描电镜观察细胞在支架上的黏附及活性。结果软骨脱细胞基质多孔支架在敷水状态下光滑透明，分离的髓核细胞呈典型的软骨细胞样形态；MTT检测各组间增殖，其差异不具有统计学意义（P〉0．05）；倒置显微镜、电镜观察髓核细胞呈球状或短梭形均匀地贴附在支架内部，HE染色观察可见髓核细胞均匀分布在支架内部，LIVE／DEAD染色显示全部为绿色荧光（活细胞），未见红色荧光（死细胞）。结论软骨脱细胞基质多孔支架在组成上与髓核组织相似，与山羊髓核细胞具有良好的生物相容性，可以作为髓核组织工程的支架材料。
- 伍耀宏徐宝山杨强李秀兰张杨夏群张春秋许海委
- 关键词：脱细胞软骨髓核细胞生物相容性
- 人重组骨形成蛋白2作用下人牙周膜细胞Osterix的表达变化被引量：5
- 2013年
- 目的观察人重组骨形成蛋白2（rhBMP-2）作用下，人牙周膜细胞内Osterix（Osx）mRNA和蛋白的表达变化，初步探讨牙周膜细胞成骨分化过程中BMP-2与Osx的信号传递途径。方法组织块法培养人牙周膜细胞至3代。用含rhBMP-2的培养液，按照不同浓度、不同时间分组进行培养，后采用实时定量反转录（Real—timeRT）-PCR和Western印迹法分别检测各组细胞OsxmRNA和蛋白表达变化。选用SB203580抑制细胞p38磷酸化，检测rhBMP．2诱导过程中磷酸化p38（P．p38）蛋白、OsxmRNA表达及细胞矿化反应变化。结果在rhBMP-2持续作用下，人牙周膜细胞内OsxmRNA表达明显升高并具有时效性；Osx蛋白表达从无到有，并逐渐增强。当rhBMP~浓度≤200斗g／L时，OsxmRNA和蛋白表达呈现为剂量依赖性增强；当rhBMP-2〉200μg／L时，Osx表达趋于平缓。在p38抑制剂SB203580干扰下，rhBMP-对p-p38及Osx的诱导增强作用被显著抑制（OsxmRNA表达：0．378±0．034比0．134±0．027，Osx蛋白表达：0．353±0．024比0．155±0．031，均P〈0．01），矿化结节形成亦相对较少且滞后。结论BMP_2对Osx具有显著正向调控作用，p38途径是此信号传递过程中的一个重要环节，BMP-2／p38／Osx通路可能是牙周膜细胞成骨分化过程中的一条重要信号通路。
- 赵艳红李洪发杨强王悦郑朝王春玲
- 关键词：骨形态发生蛋白质类P38丝裂原活化蛋白激酶类牙周膜成骨分化OSTERIX
- 双频加载装置的研制及有限元仿真
- 近年来随着对生物力学研究的不断深入,逐渐形成了一个新兴的研究领域"力生物学"。它侧重于研究机械力如何调控组织生物学的形态和结构,即研究组织如何通过细胞对力学刺激产生反馈和维持形态结构并适应环境。此方面研究有利于揭示组织力...
- 许鹏门玉涛徐宝山杨强董心张春秋
- 新型脱细胞骨基质材料的制备及理化评估被引量：3
- 2011年
- 背景:传统的结构性天然骨脱细胞的方法存在许多不足之处。目的:用新的理化方法对结构性骨块进行脱细胞处理制作新型骨支架材料的可行性,并检测其理化性能。方法:以股骨头负重区结构性骨块为原料,高压水枪冲洗,继而利用Triton-100、脱氧胆酸钠等进行脱细胞等理化处理,制备新型脱细胞骨基质材料,并对支架进行大体、组织学、扫描电镜、Micro-CT观察、生物力学等相关检测。结果与结论:新型脱细胞骨基质材料保留了骨的细胞外基质成分,脱细胞彻底,扫描电镜及Micro-CT观察显示支架具备三维多孔网状结构系统,具有天然骨的孔径和孔隙率;生物力学测试脱细胞组支架的弹性模量为(552.56±58.92)MPa,强度为(11.34±3.49)MPa,与新鲜骨的弹性模量及强度比较,差异无显著性意义(P>0.05),可作为骨组织工程支架的良好载体。
- 杨强彭江夏群马信龙徐宝山郭全义汪爱媛赵斌张莉许文静卢世璧
- 关键词：细胞外基质生物力学
- 不同方法诱导兔脂肪干细胞向软骨细胞分化的对比研究被引量：1
- 2014年
- 目的 分别用细胞共培法和诱导液培养法诱导脂肪干细胞（adipose-derived stemcells,ADSCs）向软骨细胞分化,比较两种方法的诱导效果.方法 分离培养新西兰大白兔ADSCs和软骨细胞,分别培养至第2代用于实验.根据实验目的将实验分为三组：（1）对照组：将ADSCs接种于6孔板,普通高糖培养液培养;（2）细胞共培组：将软骨细胞和ADSCs分别接种于Transwell6孔板的上层和下层,普通高糖培养液共同培养;（3）诱导液培养组：将ADSCs接种于6孔板,用软骨诱导液进行培养.倒置显微镜观察各组ADSCs的形态变化,14d后行甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组化,实时荧光定量PCR测定软骨细胞相关基因（蛋白聚糖、Ⅱ型胶原、SOX9）的表达情况.结果 细胞共培组和诱导液培养组ADSCs逐渐变为软骨样细胞形态,甲苯胺蓝、Ⅱ型胶原免疫组化均为阳性,其中诱导液培养组染色更深,对照组为阴性.荧光定量PCR结果显示Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、SOX9的基因转录水平细胞共培组（1.427±0.066,2.128±0.076,1.082±0.081）和诱导液培养组（3.438±0.108,4.297±0.147,2.929±0.090）明显高于对照组（0.040±0.021,0.128±0.038,0.098±0.022） （P ＜0.05）,且诱导液培养组高于细胞共培组（P＜0.05）.结论 细胞共培法和诱导液培养法均可诱导ADSCs向软骨细胞定向分化,诱导液培养法诱导效果更好.
- 许海委徐宝山杨强夏群李秀兰张杨马信龙伍耀宏刘子颐
- 关键词：干细胞软骨细胞细胞诱导
- 以脱细胞脱钙骨基质明胶为支架体外构建组织工程纤维环
- 目的:制备脱细胞脱钙骨基质明胶支架,复合纤维化细胞体外初步构建组织工程纤维化。方法:取猪股骨近端松质骨,用环钻铸成中空环状骨,高压水枪冲洗后,经脱脂、脱钙、脱细胞等处理,制成环形中空支架,通过大体观察(敷水状态)、扫描电...
- 伍耀宏徐宝山李秀兰杨强张杨夏群张春秋许海委
- 关键词：脱细胞骨基质纤维环
- 文献传递
- TGF-β1,bFGF,IGF联合诱导兔脂肪基质干细胞向软骨细胞分化的实验研究
- 目的分离培养兔脂肪基质干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs),观察在TGF-β1,bFGF,IGF联合诱导下其生物学特性及向软骨细胞定向分化的能力。方法取4月龄新西兰大白兔颈背部脂肪组...
- 杨强许海委徐宝山马信龙李秀兰张杨夏群张春秋伍耀宏
- 关键词：碱性成纤维细胞生长因子胰岛素样生长因子脂肪基质干细胞软骨细胞
- 文献传递
- Long-term results and radiographic findings of percutanous vertebroplasties with polymethylmethacrylate for vertebral osteoporotic fractures被引量：7
- 2012年
- XU Bao-shanHU Yong-chengYANG QiangXIA QunMA Xin-longJI Ning
- 关键词：疏松性骨质PMMACT扫描
