国家自然科学基金(81202215)
- 作品数：5 被引量：14H指数：2
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- 相关机构：北京大学哈佛大学首都医科大学附属北京妇产医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金教育部基金更多>>
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- 人叶酸受体自身抗体IgG酶联免疫吸附试验检测方法的建立及评价被引量：6
- 2014年
- 目的：建立血浆叶酸受体自身抗体免疫球蛋白G（immunoglobulin G，IgG）的酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay ，ELISA）检测方法，并对其进行评价。方法：从正常人的胎盘样品中提取叶酸受体蛋白并将其纯化，以纯化的人源叶酸受体蛋白为包被蛋白，以单克隆抗体为检测二抗，建立血浆叶酸受体自身抗体IgG的间接ELISA检测方法，评价其灵敏度、精密度及稳定性。随机选取24例血浆标本，同时以商品化的牛源叶酸结合蛋白与本方法中提取的人源叶酸受体蛋白作为包被蛋白，采用ELISA方法分别检测血浆中叶酸受体抗体IgG的水平，比较两种方法的检测结果。结果：标准曲线可检测的IgG浓度范围为6．25×10-4～8．00×10-2（标准品采用健康人混合血浆，IgG浓度定为1），最低检测限为3．13×10-4，批内差异为2．74％～8．07％，批间差异为4．16％～8．23％。同一样本不同稀释倍数下IgG的检测结果均在可接受范围内，结果较稳定。血浆标本的牛源包被蛋白与人源包被蛋白检测方法对比结果显示两种方法高度相关，相关系数为0．954（P＜0．001）；人源包被蛋白检测结果比牛源包被蛋白高14％。结论：成功建立以人源叶酸受体蛋白作为包被蛋白、针对血浆叶酸受体自身抗体IgG水平的ELISA检测方法，该方法检测灵敏，重复性好，可用于大样本量的人群检测。
- 王琳琳杨娜袁悦任爱国
- 关键词：叶酸受体自身抗体酶联免疫吸附试验免疫球蛋白G
- 酶联免疫吸附试验检测人叶酸受体抗体IgM方法的建立及评价被引量：2
- 2014年
- 目的 建立酶联免疫吸附试验（ELISA）检测人血浆叶酸受体抗体IgM的方法.方法 将从正常分娩健康产妇的胎盘中提取、纯化人叶酸受体蛋白稀释至5 ng/μl,作为抗原包被96孔板,以羊抗人IgM作为二抗,以健康人混合血浆作为标准品,浓度设定为1.采用ELISA检测人血浆叶酸受体抗体IgM水平,并评价该方法的灵敏度、精密度和稳定性.分别以人叶酸受体蛋白和牛源叶酸结合蛋白作为包被蛋白,检测24例健康新生儿母亲和20例神经管畸形患儿母亲的血浆标本叶酸受体抗体IgM水平,比较两种包被蛋白的检测结果.结果 ELISA方法可以检测的人血浆叶酸受体抗体IgM浓度为6.25×10-4～8.00×10-2,最低检测限为3.12×10-4.该方法检测高、中和低浓度血浆叶酸受体自身抗体IgM的批内差异分别为6.61％、3.50％和5.12％,批间差异分别为4.54％、5.49％和5.44％,此方法检测不同稀释倍数样品中叶酸受体自身抗体IgM浓度的测定值均在均数±10%范围内.人叶酸受体包被检测板测得的健康新生儿母亲（t=-11.9,P＜0.001）及神经管畸形患儿母亲（t=7.35,P＜0.001）的叶酸受体抗体IgM浓度均显著高于牛源叶酸结合蛋白包被检测板的测定值.结论 本研究成功建立了检测人血浆叶酸受体抗体IgM的ELISA方法,该方法以人叶酸受体蛋白作为包被蛋白,检测灵敏度高,精密度好,结果稳定.
- 杨娜王琳琳袁悦叶荣伟任爱国
- 关键词：叶酸受体酶联免疫吸附试验IGM
- 人胎盘叶酸受体蛋白的提取、纯化及鉴定被引量：2
- 2014年
- 目的 建立人胎盘叶酸受体蛋白的提取及纯化方法,并对其进行定性定量检测. 方法 采集医院分娩的正常人的胎盘样品.将胎盘剪碎,组织匀浆,酸化及中和,过柱提纯,组分鉴定,除杂并用分子筛进一步纯化.利用Bradford检测蛋白浓度,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染方法进行蛋白分子量检测,用Western Blot对提取蛋白进行定性鉴定. 结果 用于本实验的胎盘湿重370 g.在经过亲和层析柱抽提后的8个留样组分中,组分2～5含有目的蛋白的粗提物.经过分子筛等方法除杂后,Bradford蛋白检测显示本次共提取蛋白总量345 μg.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染方法结果证实此蛋白分子量大约为35 ～40 KDa.Western Blot方法显示此蛋白与叶酸受体抗体特异结合. 结论 使用本研究方法能够从人胎盘中成功提取并纯化人源的叶酸受体蛋白,每100 g胎盘可提取叶酸受体蛋白93 μg.本研究为以后的叶酸受体抗体检测奠定了基础.
- 王琳琳袁悦任爱国
- 关键词：叶酸受体胎盘蛋白纯化
- 流行病学论文数据分析思路被引量：3
- 2014年
- 数据分析是根据现有认识对数据从不同角度进行统计分析，对结果进行解释、归纳，逐步形成新认识的过程，也就是将数据转换为证据的过程。分析结果最终以论文方式发表。准确、清晰、全面严谨的数据分析思路对形成有说服力的结论非常关键。本文将就如何快速建立流行病学论文数据分析思路与分析方法进行探讨。
- 王琳琳陈常中
- 关键词：流行病学数据分析
- 备孕男性的营养素合理补充被引量：1
- 2018年
- 随着生活节奏加快,人们饮食结构改变、不良习惯累积、精神压力增加和环境恶化,对男性健康造成很大威胁。不孕不育已成为育龄男性和女性的临床常见和高发疾病。临床上不孕不育育龄女性与男性及备孕夫妻,常常希望医师给予饮食方面的指导,目前关于女性孕前合理补充营养素的研究较多,而关于备孕男性营养素合理补充的研究则不多。笔者拟总结目前对于营养素研究中,与男性生育具有相关性的一些营养素,如矿物质类(锌、铁、钙、镁、硒),维生素类(维生素A、B9、B12、C、D、E),以及其他一些重要辅助营养素类(左旋肉碱、番茄红素、氨基酸、辅酶Q10、果糖、柠檬酸),旨在对备孕男性营养素合理补充有一定临床指导作用。
- 王宝俊马乐王琳琳
- 关键词：营养素营养需要维生素类精子生育力男(雄)性
