国家自然科学基金(81170410)
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- 化学合成的Ac-SDKP类似物FAM-Aca-SDKP与HSC-T6细胞表面结合特征分析
- 2016年
- 目的 利用化学合成N-乙酰基-丝氨酸-天冬氨酸-赖氨酸-脯氨酸（Ac-SDKP）类似物FAM-Aca-SDKP,探讨Ac-SDKP与肝星状细胞株（HSC-T6细胞）的结合及其结合的基本物理特征.方法 化学合成携带绿色荧光的Ac-SDKP类似物短肽[5-FAM]-酪氨酸-氨基己酸-丝氨酸-天冬氨酸-赖氨酸-脯氨酸（FAM-Aca-SDKP）,实时定量PCR检测其对HSC胶原分泌影响验证其生物学效应与Ac-SDKP一致性,采用荧光显微镜观察FAM-Aca-SDKP与HSC-T6结合,采用流式细胞术检测FAM-Aca-SDKP与HSC-T6结合的时间-浓度效应.据资料不同采用t检验或秩和检验进行统计学分析.结果 不同浓度的Ac-SDKP及FAM-Aca-SDKP与HSC-T6孵育24 h后,均观察到HSC-T6表达Ⅰ型前胶原增加,而作用时间为0.5h时,Ac-SDKP和FAM-Aca-SDKP导致Ⅰ型胶原表达分别下降30％ ～ 50％;FAM-Aca-SDKP与HSC-T6共孵育后,在荧光显微镜下观察到细胞表面出现显著绿色荧光,给予Ac-SDKP竞争抑制可显著减少细胞表面的荧光强度;流式细胞术检测显示,在FAM-Aca-SDKP浓度为0 ～ 50 μ mol/L时,荧光阳性细胞率从0快速上升至约12％,而在浓度为50 ～ 100μ mol/L,阳性细胞率仅从约12％上升至约14％,并且给予Ac-SDKP共孵育可显著降低阳性细胞百分率;FAM-Aca-SDKP阳性细胞数在孵育45 min达到高峰,随后逐渐降低. 结论 FAM-Aca-SDKP可结合于HSC-T6细胞表面,表现出竞争性抑制、可饱和、时间-浓度效应等配体-受体结合特征.
- 周达何玲楠王晶丁永年陈源文范建高
- 关键词：肝星状细胞
- 脯氨酰内肽酶在小鼠非酒精性脂肪性肝炎发病中的作用初探
- 背景与目的:非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是代谢综合征在肝脏的表现,其疾病谱包括非酒精性单纯性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)及其相关的肝硬化和肝细胞癌。在我国,该病已成为最主要的慢性肝脏疾病之一,约占我国肝脏疾...
- 李梦婷
- 关键词：非酒精性脂肪性肝炎脯氨酰内肽酶抑制剂炎症小鼠
- 文献传递
- 甘丙肽对小鼠巨噬细胞功能影响及机制初探
- 背景与目的:非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是一种胰岛素抵抗和遗传易感性相关代谢应激性肝损伤,疾病谱包括单纯性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)及其相关肝硬化。代谢性炎症是NAFLD发病与进展的基础,而大量证据表明库...
- 何玲楠
- 关键词：甘丙肽非酒精性脂肪性肝病巨噬细胞炎症腺苷酸活化蛋白激酶
- 文献传递
