质检公益性行业科研专项项目(201210122)
- 作品数：4 被引量：4H指数：2
- 相关作者：贾广乐廖娟红周莉林祥梅朱道中更多>>
- 相关机构：中国检验检疫科学研究院华南农业大学广东检验检疫技术中心更多>>
- 发文基金：质检公益性行业科研专项项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 荷斯坦奶牛凝血因子Ⅺ缺乏症的PCR-DHPLC检测方法的建立
- 2013年
- 为了有效地检测荷斯坦奶牛凝血因子Ⅺ缺乏症,试验以制备的纯合突变、野生型基因为模板,优化PCR反应体系,制备异源双链体系,建立多聚酶链反应-变性高效液相色谱(PCR-DHPLC)的检测方法,确定最佳的检测条件,并用建立的方法对120个样本进行检测,再与传统的方法进行比较和验证。结果表明:所建立的PCR-DHPLC方法可以用于检测牛凝血因子Ⅺ缺乏症,与传统方法的检测结果一致。说明PCR-DHPLC方法是一种高通量、准确性高、特异性好的检测方法。
- 王振男吴晓薇梁梓森朱道中刘志玲刘中勇詹勋
- 关键词：携带者
- 荷斯坦奶牛瓜氨酸血症PCR-DHPLC诊断方法的建立及应用被引量：1
- 2014年
- 为有效检测荷斯坦奶牛瓜氨酸血症,采用多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)结合变性高效液相色谱(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)技术建立方法。制备纯合突变、野生型的基因模板,优化PCR反应体系,制备异源双链体系,建立DHPLC检测方法,确定最佳的检测条件。对262个血液样本用建立的方法进行检测,发现4个杂合子个体,并通过了测序验证。结果显示,建立的PCR-DHPLC的方法与测序检测结果一致,表明所建立的PCR-DHPLC方法可以用于检测瓜氨酸血症。PCR-DHPLC是一种高通量、准确性高、特异性好的检测方法。
- 刘中勇王振男朱道中马保华吴晓薇段艳喻梁梓森陈茹刘志玲林志雄
- 关键词：荷斯坦奶牛瓜氨酸血症PCR变性高效液相色谱
- 奶牛白细胞黏附缺陷症HRM检测方法的建立及应用被引量：3
- 2013年
- 根据GenBank中奶牛白细胞黏附缺陷症(BLAD)CD18序列设计引物,进行PCR扩增后纯化产物,构建A/A型、A/G型和G/G型3种标准质粒,用标准质粒建立HRM检测方法。用建立的方法对300份奶牛血液样品进行检测,将其结果与Sanger测序结果进行对比,分析和验证检测结果的准确性。结果显示,样品中A/A基因型检出294例,占总体的98%;A/G基因型检出6例,占总体的2%,且两种检测方法的结果一致。结果表明,HRM检测BLAD具有简便快速、特异和灵敏等优点,可作为BLAD携带者突变筛查的优选方法。
- 贾广乐周莉林祥梅廖娟红
- 奶牛白细胞黏附缺陷症焦磷酸测序检测方法的建立及应用被引量：2
- 2014年
- 奶牛白细胞黏附缺陷症(bovine leukocyte adhesion deficiency,BLAD)是一种常染色体隐性、致死性、遗传性疾病,严重影响奶牛生产性能和奶牛场的经济效益。为建立快速可靠的BLAD检测方法,本试验根据GenBank中BLAD CD18序列设计引物,PCR扩增后纯化产物,构建A/A、A/G和G/G 3种基因型标准质粒。用标准质粒建立焦磷酸测序检测方法。用建立的方法检测奶牛血液样品,其结果与Sanger测序结果进行比较,分析和验证检测结果的准确性。用建立的方法对300份奶牛血液样品进行检测,结果显示样品中A/A基因型检出294例,占总体比例的98%;A/G基因型检出6例,占总体比例的2%。随机抽取30份已检测样品进行Sanger测序,结果显示与焦磷酸测序法结果一致。本试验结果表明焦磷酸测序法检测BLAD,具有特异、灵敏、快速的特点,其检测结果准确可靠,适合于试剂盒的研发及应用于BLAD的临床诊断。
- 周莉贾广乐贾广乐林祥梅
- 关键词：焦磷酸测序
