北京市科技新星计划(2006B42)
- 作品数：3 被引量：21H指数：3
- 相关作者：孙惠玲钱永华吴素丽张培君张平更多>>
- 相关机构：北京市农林科学院畜牧兽医研究所西北农林科技大学首都师范大学更多>>
- 发文基金：北京市科技新星计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 巴斯德毕赤酵母表达系统在动物传染病防制中应用的研究进展被引量：5
- 2008年
- 从表达载体、宿主细胞、培养条件3个方面概述了巴斯德毕赤酵母表达系统的特点,综述了其在抗菌肽生产、动物疫苗生产以及动物疾病诊断试剂盒研制中应用的最新进展,展望了巴斯德毕赤酵母表达系统在动物传染病研究中的应用前景。
- 孙静孙惠玲张培君
- 关键词：巴斯德毕赤酵母动物传染病
- 山东某猪场繁殖障碍性疾病的诊断研究被引量：7
- 2009年
- 采用ELISA、PCR、RT-PCR及细胞培养等方法对山东某猪场流产、死胎及出生后几天死亡的小猪进行猪瘟病毒(CSFV),伪狂犬病毒(PRV),圆环病毒2型(PCV-2),细小病毒(PPV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)五种繁殖障碍性疾病进行检测,并应用ELISA猪瘟抗原检测试剂盒检测猪瘟病毒。检测结果表明,猪瘟病毒与圆环病毒2型为阳性,猪繁殖与呼吸综合征病毒、细小病毒、伪狂犬病毒均为阴性。根据结果判定该猪场发生猪瘟病毒与圆环病毒2型混合感染的繁殖障碍性疾病,其中以猪瘟感染最为严重。
- 吴素丽孙惠玲张平张培君钱永华高立娜
- 关键词：繁殖障碍PCR猪瘟圆环病毒2型
- 猪瘟病毒E0蛋白的高效表达及其间接ELISA检测方法的建立被引量：9
- 2009年
- Trizol法提取猪瘟兔化弱毒株(C株)总RNA,根据GenBank中E0基因序列设计特异性引物,扩增克隆E0基因,插入原核表达载体pET-32a(+),转化进BL2l(DE3)内进行表达。将表达的重组pET-E0蛋白通过His亲和层析柱纯化,以纯化后的蛋白为诊断抗原,包被96孔聚乙烯平板,通过探索抗原包被量和血清稀释倍数,建立检测猪瘟E0抗体的ELISA方法。通过对蛋白表达条件和ELISA反应条件的优化,确定E0蛋白能在BL2l(DE3)内高效表达,表达量达30%,蛋白分子质量约为50 ku,且蛋白以可溶性形式存在。纯化后蛋白浓度为2 mg/mL;抗原最适包被量为300 ng;血清最适稀释度为1∶50。经阻断试验、交叉反应试验和与IDEXX公司猪瘟病毒抗体检测试剂盒的符合性(83%)试验证明,建立的E0-ELISA简便、特异、稳定,为研制开发E2标记疫苗的应用和推广提供配套的检测方法。
- 吴素丽孙惠玲钱永华
- 关键词：猪瘟病毒原核表达间接ELISA
