公共文化服务平台

四川省重点科技攻关项目(02SG022-030): 作品数：13 被引量：45H指数：4; 相关作者：凌保东雷军余娴谢勇恩李苌清更多>>; 相关机构：川北医学院重庆医科大学更多>>; 发文基金：四川省重点科技攻关项目四川省应用基础研究计划项目四川省教育厅自然科学科研项目更多>>; 相关领域：医药卫生更多>>

同时产CTX-M-22及TEM-1型β-内酰胺酶的阴沟肠杆菌耐药性分析被引量：1: 2006年; 目的了解临床分离阴沟肠杆菌株EC003产β-内酰胺酶的耐药特征和基因型。方法采用琼脂二倍稀释法对阴沟肠杆菌EC003进行MIC检测,酶提取物三维实验检测AmpC酶,双纸片法筛选及确证实验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),等电聚焦(IEF)电泳测定其等电点。以耐药质粒为模板进行PCR扩增,将β-内酰胺酶全编码基因克隆、表达,并对其扩增产物进行DNA序列测定和同源性分析。结果阴沟肠杆菌株EC003对所试多数β-内酰胺类抗生素耐药,表型检测AmpC酶为阴性,ESBLs阳性,IEF显示该菌产两种pI分别为8.7及5.4的β-内酰胺酶。PCR扩增产物DNA测序证实为CTX-M-22、TEM-1型β-内酰胺酶全编码基因,产TEM-1的克隆菌株仅对青霉素类耐药,产CTX-M-22的克隆菌株对所试多数β-内酰胺类抗生素耐药,对头孢噻肟的水解程度明显强于头孢他啶。结论临床分离阴沟肠杆菌株EC003同时产CTX-M-22和TEM-1型两种β-内酰胺酶,可导致对多数β-内酰胺类抗生素耐药。; 刘刚凌保东谢勇恩周岐新雷军赵廷坤; 关键词：阴沟肠杆菌超广谱Β-内酰胺酶表型

临床分离耐药摩氏摩根菌的β-内酰胺酶表型和基因型分析被引量：8: 2005年; 目的探讨临床分离耐药摩氏摩根菌3-87耐药的分子机制。方法采用常规琼脂二倍稀释法对摩氏摩根菌3-87进行15种抗菌药的M IC测定;超声破碎法提取β-内酰胺酶;并用n itrocefin做定性检测,用紫外分光光度计检测酶活性;超薄层等电聚焦测定β-内酰胺酶等电点和酶抑制实验;ESBL s表型鉴定;Am pC酶的检测;纸片协同法筛选产金属β-内酰胺酶菌株;以摩氏摩根菌3-87质粒DNA为模板扩增blaSHV、blaTEM和blaCTX-M基因,以基因组DNA为模板扩增ampC结构基因;ampC结构基因扩增产物的DNA序列测定及同源性分析。结果摩氏摩根菌3-87对10种β-内酰胺类抗生素、2种氟喹诺酮类抗菌药耐药,对哌拉西林/三唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦、氨基糖苷类抗生素阿米卡星敏感。产酶活性为3727.5U的β-内酰胺酶。产生的pI7.3、8.2及9.6的三种β-内酰胺酶分别能被氯唑西林、克拉维酸、EDTA部分抑制。β-内酰胺酶表型鉴定试验结果显示菌株产ESBL s、Am pC酶及金属β-内酰胺酶三种β-内酰胺酶。blaCTX-M基因引物扩增出阳性扩增条带。ampC结构基因引物扩增阳性扩增带,对扩增产物进行序列分析与已报道的摩氏摩根菌ampC结构基因的核苷酸序列高度同源,推导的氨基酸序列发生了1个氨基酸残基的变异。结论临床分离耐药摩氏摩根菌3-87呈多重耐药,其对β-内酰胺类抗生素耐药的机制是产生了ESBL s、Am pC酶及金属β-内酰胺酶。; 余娴凌保东谢勇恩周岐新雷军; 关键词：Β-内酰胺酶 ESBLS AMPC酶金属Β-内酰胺酶

耐头孢他啶大肠埃希氏菌产β-内酰胺酶的特性研究被引量：3: 2005年; 目的:研究耐头孢他啶大肠埃希氏菌产β-内酰胺酶的特性。方法:采用K-B纸片扩散法和等电聚焦对2株耐药大肠埃希氏菌产β-内酰胺酶类型进行初步判断;采用碱裂解法提取质粒并进行PCR扩增测序;β-内酰胺酶经饱和硫酸铵反抽提及SephadexG-75凝胶过滤和DE-52阴离子交换层析法纯化;以SDS-PAGE法测定其分子量及紫外分光光度法测定其酶动力学参数。结果:2株菌产生一种等电点为8.7的超广谱β-内酰胺酶(CTX-M-1V),分子量为29kDa,能水解头孢噻肟和氨曲南,不能水解亚胺培南,对舒巴坦(IC50=94nmol/L)和他唑巴坦(IC50=5nmol/L)敏感。结论:CTX-M-1V为对抑制剂敏感的CTX-M型超广谱-内酰胺酶。; 李苌清谢勇恩凌保东周岐新雷军余娴; 关键词：头孢他啶大肠埃希氏菌

73株耐阿莫西林临床分离革兰阴性菌的β-内酰胺酶活性研究被引量：7: 2005年; 目的了解革兰阴性杆菌对阿莫西林的耐药机制,探讨MIC与β-内酰胺酶活性之间的相关性.方法收集2003年2月至2004年1月全院分离出的耐阿莫西林革兰阴性杆菌73株,琼脂二倍稀释法测定阿莫西林MIC;超声破碎法提取β-内酰胺酶;对β-内酰胺酶进行定性检测和活性测定.结果13.7%的革兰阴性杆菌MIC≤1024μg/mi,86.3%的革兰阴性杆菌MIC＞1024μg/ml;酶活性＜1000U、1000～10000U、＞10000U的细菌分别为53.42%,41.10%和5.48%;大肠埃希菌、阴沟肠杆菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌及其它革兰阴性杆菌的酶活性中位数分别为1343.32、1584.71、301.675、256.41和984.33U(Kruskal-Wallis H检验,P＜0.05).结论革兰阴性杆菌对阿莫西林多呈高度耐药,且主要为大肠埃希菌、阴沟肠杆菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌;耐药阴沟肠杆菌和大肠埃希菌的酶活性明显高于铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌;酶活性和MIC之间没有必然的正相关关系,提示革兰阴性杆菌对阿莫西林耐药系多种机制共同参与的结果.; 余娴雷军张翔李苌青蔡春燕凌保东; 关键词：革兰阴性杆菌阿莫西林 Β-内酰胺酶酶活性

临床分离产头孢菌素酶阴沟肠杆菌的耐药性研究被引量：4: 2005年; 目的:研究我院产头孢菌素酶(AmpC酶)阴沟肠杆菌的检出率、耐药情况及ampC基因型。方法:收集临床分离的耐药阴沟肠杆菌15株;三维试验检测AmpC酶;NCCLS方法检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs);琼脂二倍稀释法测定M IC值;PCR扩增检测ampC基因及序列测定。结果:15株菌中8株菌(53.3%)产AmpC酶,3株菌(20.0%)产ESBLs。产AmpC酶的菌株除对亚胺培南全敏感外,对其它抗菌药不同程度耐药。5株菌的ampC基因与阴沟肠杆菌ECLC074的ampC基因100%同源,3株菌与之99%同源,2株菌的AmpC酶发生了1个氨基酸残基的改变。结论:产AmpC酶是阴沟肠杆菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要机制之一。阴沟肠杆菌ECLC074 ampC基因是我院主要的阴沟肠杆菌ampC基因型。产AmpC酶的阴沟肠杆菌常呈多重耐药,亚胺培南是治疗此类菌所致感染的最有效药物。; 余娴凌保东周岐新雷军谢勇恩; 关键词：阴沟肠杆菌头孢菌素酶 AMPC基因耐药耐药性研究产AMPC酶 C基因型

耐第三代头孢菌素革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶及耐药基因分析被引量：2: 2007年; 目的了解革兰阴性杆菌对第三代头孢菌素耐药的分子机制。方法采用常规琼脂2倍稀释法测定11株(CR01-CR11)临床分离革兰阴性杆菌,对13种β-内酰胺类抗菌药物的敏感性,纸片扩散法检测耐药菌的ESBLs表型,通过PCR扩增检测其耐药基因。结果MIC结果表明,11株病原菌对几种常见的第三代头孢菌素具有明显的耐药性;表型确证实验表明,除CR07外,其余10株均为产ESBLs菌株;酶的水解底物轮廓实验表明,10株产ESBLs株菌所产生的β-内酰胺酶均能高效水解头孢哌酮和头孢孟多,而对头孢他啶水解活性较低。结论10株产ESBLs革兰阴性杆菌的酶活性、等电点及耐药基因在一定程度上揭示了病原菌产ESBLs与其耐药性之间的关系。; 谢勇恩李苌清凌保东张翔刘刚; 关键词：革兰阴性杆菌超广谱Β-内酰胺酶耐药基因

TEM-1型β-内酰胺酶编码基因的克隆表达: 2005年; 目的:构建TEM-l型β-内酰胺酶基因的表达载体。方法:通过PCR扩增TEM-l全编码基因,将其连接入pBK-CMV载体中,并在大肠杆菌JM109中表达。采用琼脂二倍稀释法对TEM-l克隆菌株进行MIC检测,双纸片法筛选及确证实验检测其表型,等电聚焦(IEF)电泳测定其等电点(pIs)。结果:经酶切测序鉴定TEM-l基因的表达载体构建正确。重组菌产pI为5.4的TEM-l广谱酶,仅对青霉素类耐药。结论:TEM-l基因原核表达载体正确构建,为进一步研究打下了基础。; 张翔刘刚赵廷坤袁斌凌保东雷军; 关键词：Β内酰胺酶 TEM-1 TEM-1型 Β-内酰胺酶克隆表达表达载体构建

铜绿假单胞菌主动外排系统研究进展被引量：9: 2004年; 赵廷坤凌保东周歧新; 关键词：铜绿假单胞菌主动外排系统 PA 致病菌抗生素

液化沙雷菌超广谱β-内酰胺酶的特性研究被引量：1: 2005年; 目的研究液化沙雷菌超广谱β-内酰胺酶的特性。方法超声破碎法提取临床分离液化沙雷菌CR 04的β-内酰胺酶,等电聚焦(IEF)测定其等电点(pI);硫酸铵反抽提、Sephadex G-75凝胶过滤和DE-52阴离子交换层析进行酶的纯化;SDS-PAGE法测定分子量和紫外分光光度法测定酶动力学参数。结果液化沙雷菌超广谱β-内酰胺酶的pI为7.5,分子量为28.77ku,动力学分析显示,该酶能水解头孢他啶、头孢噻肟和氨曲南,对舒巴坦(IC50为77nm o l/L)和三唑巴坦(IC50为17nm o l/L)敏感。结论液化沙雷菌产生的超广谱β-内酰胺酶对酶抑制剂敏感。; 李苌清凌保东周歧新雷军余娴; 关键词：头孢他啶超广谱Β-内酰胺酶

产ESBLs液化沙雷氏菌临床分离株的表型和基因型分析: 目的:探索革兰氏阴性杆菌对第三代头孢菌素耐药的分子机制。方法:采用微量板法对临床分离的液化沙雷氏菌CR04株进行MIC检测,提取耐药菌β-内酰胺酶,并测定其酶活性。双纸片法筛选及确证实验鉴别耐药菌的ESBLs表型,进行结...; 凌保东谢氨恩张翔蔡春燕余娴李苌青雷军; 关键词：药理学头孢菌素 Β-内酰胺酶耐药性; 文献传递

四川省重点科技攻关项目(02SG022-030)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

四川省重点科技攻关项目(02SG022-030)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈