国家自然科学基金(31060344) 作品数:13 被引量:74 H指数:5 相关作者: 喻华英 杨晓华 李启峰 底丽娜 唐萧 更多>> 相关机构: 塔里木大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 更多>>
新疆南疆犊牛腹泻病中大肠杆菌生物膜形成与8种毒力基因关系分析 被引量:2 2017年 本实验以犊牛腹泻病中分离鉴定的25株大肠杆菌生物膜阳性菌株为实验对象,利用PCR方法,进行8种相关毒力因子aap、irp2、Pet、SetIA、shfA、fimH、EspD、papD检测筛选。其结果显示:在所检测25株菌中出现的频率最高的基因是fimH和papD,分别为16%,Esp D为12%,shf A为8%;irp2为4%;aap、Pet和Set I A三种基因均未检测到。达到为大肠杆菌生物膜的形成机制提供一定的理论依据。 杨义 颜秋菊 王琦琦 喻华英关键词:犊牛腹泻 大肠杆菌 生物膜 毒力基因 仔猪腹泻的大肠杆菌生物膜的筛选和致病力观察 被引量:2 2015年 采用96孔微量板法,对临床分离鉴定的24株大肠杆菌进行生物膜筛选,得到11株生物膜阳性大肠杆菌,并绘制出4株生物膜强阳性菌株的生长曲线。同时对小鼠进行攻毒试验,结果表明,生物膜阳性菌株的致病力强于生物膜阴性菌株,这为临床预防仔猪腹泻病提供了理论依据。 喻华英 陈绪松 贾桂珍 陈英关键词:仔猪腹泻 大肠杆菌 生物膜 致病力 大肠杆菌生物膜毒力基因的检测 被引量:3 2014年 通过确定大肠杆菌形成生物膜毒力基因的分布情况,为大肠杆菌生物膜的形成机理提供理论依据。本实验利用PCR聚合酶链式反应,对25株大肠杆菌阳性菌株菌进行了相关毒力因子fimH,KpsMTII,chuA,fliC,yja和PapC的检测筛选。其结果显示:KpsMTII在所检测25株菌中出现的频率最高,占40%;其次是fliC,占32.5%,fimH占20%,合计占52.5%;chuA占7.5%,yja和PapC均未检出。结果表明:细菌粘附结构fimH基因和fliC基因是影响大肠杆菌形成生物膜的主要粘附结构毒力基因,其次是大肠杆菌毒力因子KpsMTII基因,最后是外膜蛋白血红素chuA基因。 喻华英 张亮亮关键词:生物膜 毒力基因 致犊牛腹泻埃希氏菌eaeA基因克隆和序列分析 被引量:1 2013年 旨在确定新疆地区致犊牛腹泻病中埃希氏大肠杆菌的基因型。从采自阿克苏周边的3个奶牛场30份患腹泻的犊牛粪便中分离、纯化、鉴定出34株埃希氏大肠杆菌。根据GenBank公布的大肠杆菌的eaeA基因序列,用Oligo 6.0软件分别设计2对特异性引物,利用聚合酶链式反应,对所分离大肠杆菌eaeA基因进行PCR扩增。结果表明,有4株PCR产物为918bp的目的片段,阳性率为11.8%(4/34)。将阳性样品进行序列分析,结果与已发表的序列同源率为100%。所测序列呈递GenBank数据库,得到序列登陆号为JQ350701、JQ350702、JQ350703和JQ350704。 喻华英 周丽婷关键词:大肠杆菌 犊牛腹泻 克隆 新疆犊牛腹泻病病原菌的分离鉴定和药敏试验 被引量:13 2012年 犊牛腹泻多是1月龄以内的犊牛出现一种以消化不良、腹泻为主要症状的消化道疾病,是造成犊牛死亡的主要疾病之一。本试验选取新疆4个地方犊牛腹泻的粪便69份,进行细菌分离鉴定得到:大肠杆菌99株,肠链球菌33株,肠球菌23株,蜡样芽孢杆菌20株,沙门菌3株,克雷伯菌3株,蜡样芽孢杆菌1株及未鉴定菌株10株。分别选取庆大霉素、头孢唑啉、呋喃妥因、磺胺异噁唑、氨苄西林、奥复星、红霉素、吉他霉素、恩诺沙星共9种抗生素对其进行药敏试验。药敏试验结果表明,头孢唑啉、磺胺异噁唑、恩诺沙星、呋喃妥因对所选分离菌表现高度敏感;吉他霉素、红霉素分离菌株都对所选分离菌表现低敏。 喻华英 底丽娜关键词:犊牛腹泻病 药敏实验 大肠杆菌FliC基因敲除后对大肠杆菌生物膜形成的影响 被引量:2 2016年 利用无疤痕基因敲除方法,构建大肠杆菌FliC基因敲除突变株。基因重组PCR结果显示:在重组转化体中FliC基因完全被卡那抗性基因和CcdB替代,获得Ⅰ型突变株(△1FliC);同时利用基因突变技术,对FliC基因起始密码子进行点突变,将ATG突变为AAA,再次进行基因重组后获得Ⅱ型FliC基因沉默菌株(△2FliC)。利用96孔微量板法,分别对野毒株、△1FliC和△2FliC进行生物膜表型检测,结果显示:△1FliC和△2FliC生物膜形成能力明显低于野毒株,从而为临床上大肠杆菌病的预防及疫苗的研制提供一定的理论基础。 喻华英 马燕关键词:大肠杆菌 生物膜 基因敲除 大肠杆菌生物膜的筛选及生长曲线测定 被引量:14 2014年 为探究犊牛腹泻病中大肠杆菌生物膜的形成过程。本试验利用96孔微量板法,对分离鉴别的犊牛腹泻粪便中的60株大肠杆菌进行生物膜的筛选和统计。结果表明:得到了9株生物膜阳性大肠杆菌,并测定出大肠杆菌生物膜阳性菌的生长曲线。从而确定大肠杆菌生物膜形成的四个时期:初粘附、粘附、生物膜的成熟、脱落等过程且不同大肠杆菌生物膜形成时间不尽相同。为临床上治疗犊牛腹泻病提供了新的理论依据。 喻华英 李启峰关键词:大肠杆菌 生物膜 16S rDNA对四种常见细菌中的鉴定与应用 被引量:3 2013年 本实验利用16S rDNA序列分析技术,对来自犊牛腹泻粪便中的四株菌(A菌,B菌,C菌,D菌)进行菌种鉴定。使用16S rDNA通用引物,通过PCR扩增分别得到1 500 bp,与GenBank中序列进行比对。结果表明:A菌与肠杆菌属、B菌与短小芽孢杆菌、C菌与大肠杆菌、D菌与变形杆菌的同源性最高,相似率均达到了99%,初步确定A菌为肠杆菌属、B菌为短小芽孢杆菌、C菌为大肠杆菌、D菌为变形杆菌。本试验的目的是为16S rDNA在临床细菌的鉴定提供客观理论依据。 张伟信 邬晓凤 喻华英关键词:RDNA 细菌 甘草提取物对奶牛乳房炎中金黄色葡萄球菌生物膜作用的研究 被引量:10 2015年 目的:探讨甘草提取物对奶牛乳房炎中金黄色葡萄球菌生物膜是否有抑制作用。方法:从新疆南疆十团奶牛场采集患有奶牛乳房炎的乳样40份,利用细菌的常规分离鉴定和96孔微量板法,获取了24株生物膜阳性的金黄色葡萄球菌。并选取不同浓度的甘草提取物对金黄色葡萄球菌生物膜阳性菌株作用分析。结果:随甘草提取物浓度升高:对金黄色葡萄球菌的生长有抑制作用;对金黄色葡萄球菌生物膜的生长表现为低浓度有促进其生长;高浓度抑制其生长的现象。结论:这为临床上甘草提取物治疗奶牛乳房炎提供有利的依据。 喻华英 唐萧关键词:奶牛乳房炎 金黄色葡萄球菌 生物膜 甘草提取物 两株大肠埃希菌生物膜形成及影响因素 被引量:4 2012年 为分析不同离子质量浓度变化对大肠杆菌生物膜形成的影响,以分离自犊牛腹泻病中的两株大肠埃希菌为材料,采用试管法和96孔微量板法,在体外进行大肠杆菌生物膜形成及影响因素的研究。结果显示,试验菌(7号,13-2号)均能在试管和96孔板上形成生物膜。同时,根据试验结果绘制出这两株菌在48h、37℃下于M9培养基和进口96孔板的生物膜生长曲线。 喻华英 闫石磊关键词:生物膜 犊牛腹泻 大肠埃希菌