重庆市应用基础研究项目(2003032)
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
- 相关作者：周向东聂晓红黄长武徐晓艳更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：重庆市应用基础研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 转染重组人Elafin基因保护NCI-H292细胞系被引量：3
- 2007年
- 目的探讨转染重组人白细胞弹性蛋白酶抑制剂内生多肽(Elafin)基因保护气道上皮的分子机制。方法构建人Elafin重组质粒pEGFP-C1-Elafin,并转染入人气道黏膜上皮细胞系NCI-H292细胞,将其与多形核粒细胞(PMN)共孵育,经脂多糖(LPS)刺激24 h后,用Western blot检测细胞中紧密连接相关蛋白ZO-1的表达及MTT法测定细胞与胶原的附着能力。结果经LPS刺激后,Western blot及MTT法发现,与对照组和转染重组质粒组相比,转染空载体的NCI-H292细胞中ZO-1的表达及细胞与胶原附着能力均明显降低(P<0.01);而与对照组相比,转染重组质粒的细胞中ZO-1的表达及细胞与胶原附着能力均未见明显下降。结论通过转染重组人Elafin可保护气道上皮,增强气道抵抗炎性损伤能力。
- 徐晓艳周向东
- 关键词：ELAFIN气道
- 内生多肽Elafin转染气道上皮细胞对不同细菌生物膜作用的差异被引量：4
- 2007年
- 目的探讨内生多肽(Elafin)转染气道上皮细胞经不同细菌产物诱导后对铜绿假单胞菌(P.aeruginosa,Pa)生物膜(biofilm,BF)的效应差异。方法将pEGFP-N1-elafin转染到培养的肺腺癌细胞株A549细胞后,用表皮葡萄球菌(表葡组)、大肠埃希杆菌(E.coli组)和铜绿假单胞菌(Pa组)培养上清分别孵育细胞24h,另设转染空载体A549细胞作为正常组。用ELISA和Western blot检测每组细胞Elafin分泌水平和细胞内含量;体外平板法制备Pa-BF模型,用快速银染法和扫描电镜鉴定;将BF载体放入上述4组细胞中继续孵育8h,银染法观察BF中每个视野细菌的(灰度)面积积分,扫描电镜观察形态学改变。结果Pa组细胞Elafin分泌水平和细胞内含量均较正常组的明显升高(P<0.01),E.coli组也有升高(P<0.05),表葡组无明显变化;各组BF面积积分也显示有明显差异,Pa组、E.coli组BF结构较正常组明显松散,尤以Pa组为甚,表葡组则没有明显变化。结论不同细菌对Elafin的诱导表达能力有差异:Pa较强,E.coli次之,表葡不明显;Elafin能清除生物膜细菌。
- 聂晓红周向东黄长武
- 关键词：生物膜铜绿假单胞菌大肠埃希杆菌表皮葡萄球菌
