中山大学医科青年教师科研启动基金(3171911)
- 作品数：3 被引量：12H指数：2
- 相关作者：王磊杨祖立黄美近康亮向军更多>>
- 相关机构：中山大学附属第六医院中山大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：中山大学医科青年教师科研启动基金广东省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- pcDNA3．1(＋)-MER-Syk(L)载体构建及其对乳腺癌细胞增殖的影响被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨乳腺癌细胞内4-OHT对MER-Syk(L)细胞定位的影响及对乳腺癌细胞增殖功能的影响。方法:采用不表达Syk的乳腺癌细胞系MDA-MB-231,建立稳定表达融合蛋白MER-Syk(L)的细胞株;蛋白质印迹和免疫荧光染色技术检测4-OHT处理前后融合蛋白MER-Syk(L)在细胞内的位置;二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法分析处理前后稳态细胞的增殖能力。结果:(1)无4-OHT的处理,融合蛋白MER-Syk(L)、MER-Syk(S)和MER均位于MDA-MB-231细胞浆内;4-OHT的作用下,融合蛋白MER-Syk(L)部分移位到细胞核内,而MER-Syk(S)和MER仍然位于细胞浆内;(2)MDA-MB-231细胞核内的MER-Syk(L)蛋白能够抑制细胞的增殖和生长,而细胞浆内的MER-Syk(L)、MER-Syk(S)和MER蛋白对细胞增殖和生长功能没有影响。结论:4-OHT可使融合蛋白MER-Syk(L)移位到MDA-MB-231细胞核内,从而抑制细胞的增殖。
- 杨祖立王磊康亮向军黄美近汪建平
- 关键词：核移位他莫昔芬雌激素
- 脾酪氨酸激酶基因甲基化与结直肠癌临床病理特征之间的关系被引量：6
- 2008年
- 目的探讨脾酪氨酸激酶（Syk）基因甲基化、表达水平与结直肠癌患者临床病理特征及预后之间的关系。方法收集2001年1～12月间经手术治疗的120例结直肠癌标本．采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）和逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）分析Syk基因的甲基化状态和表达情况，并分析Syk基因甲基化失表达与结直肠癌临床病理特衙和生存预后之间的关系。结果（1）120例结直肠癌患者中，48例肿瘤组织未检测到Syk基因的表达，而正常组织Syk基凶均表达；差异有统计学意义（X^2=60，P=0．000）。（2）发生甲基化的37例肿瘤组织中，Syk基因均失去表达。未发生甲基化的83例中，仅11例失表达；而癌旁匹配的正常组织均有表达。（3）Syk基因的甲基化状态与结直肠癌的淋巴结转移状态、病理分期密切相关，而与其他临床参数无关。（4）术后随访资料表明，Syk基因甲基化组患者的3年生存率明显低于未甲基化组（73．5％比95．7％，P=0．007）；而术后复发转移率明显高于未甲基化组（32．4％比8．4％，P=0．02）。结论Syk基因过甲基化失表达参与了结直肠癌的发生，导致结直肠癌侵袭性增强，患者术后复发转移率升高，3年生存率降低。
- 杨祖立王磊康亮彭俊生向军黄美近汪建平
- 关键词：结直肠肿瘤基因脾酪氨酸激酶甲基化
- 结直肠癌细胞中脾酪氨酸激酶基因甲基化状态和表达的关系被引量：6
- 2008年
- 目的:探讨结直肠癌细胞中脾酪氨酸激酶基因甲基化和表达的关系。方法:应用亚硫酸盐修饰测序、甲基化特异性聚合酶链反应和蛋白印迹技术检测结直肠癌细胞脾酪氨酸激酶的甲基化状态以及表达情况;荧光素酶报告分析法研究启动子区域CpG岛的甲基化与启动子活性的关系;甲基化转移酶抑制剂处理脾酪氨酸激酶甲基化失表达的结直肠癌细胞株,观察处理前后细胞内脾酪氨酸激酶基因甲基化状态和表达情况。结果:(1)23个结直肠癌细胞中,9个细胞启动子发生甲基化而失去蛋白质表达;其余则正常表达,甲基化发生率为39.2%;(2)9个甲基化的细胞中,7个存在微卫星不稳定;而14个未发生甲基化的细胞中,仅有4个存在微卫星不稳定。二者之间的差异显著(P<0.05);(3)脾酪氨酸激酶启动子全长和未甲基化启动子荧光素酶的活性分别是甲基化组的4.5和4.7倍;5-Aza-CdR可恢复甲基化启动子的活性;(4)5-Aza-CdR可去甲基化而使脾酪氨酸激酶基因重新表达,而且具有时间依从性。结论:结直肠癌细胞中,启动子区域的甲基化导致Syk基因丧失表达,5-Aza-CdR可以去甲基化而恢复脾酪氨酸激酶基因的表达。
- 杨祖立康亮黄美近王磊彭俊生向军兰平汪建平
- 关键词：结直肠肿瘤甲基化脾酪氨酸激酶
