河南省科技攻关计划(082102310033)
- 作品数：6 被引量：15H指数：3
- 相关作者：李喜凤杜云锋郝哲白雁许闽更多>>
- 相关机构：河南中医药大学学研究院河南省人民医院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 蒲公英药材总DNA的提取被引量：5
- 2009年
- 采用改良的CTAB法、SDS法、高盐低pH法提取蒲公英药材基因组总DNA,通过紫外吸收、琼脂糖凝胶电泳检测其纯度与浓度.结果表明,改良的CTAB法所得DNA纯度最高,电泳条带最清晰、完整性好,可作为RAPD,ISSR等分子生物学研究.
- 李喜凤杜云锋张红梅郝哲白雁
- 关键词：蒲公英DNA提取SDS法CTAB法
- 蒲公英属植物rDNA ITS序列测定及分析被引量：5
- 2012年
- 目的研究蒲公英属内4种植物的rDNA ITS序列遗传差异性,为探讨蒲公英属植物的系统演化关系、分类、品种鉴定提供DNA分子依据。方法提取不同产地的蒲公英总DNA,以核糖体基因组ITS通用引物为引物进行扩增,扩增产物经纯化后,用PCR产物直接测序法进行测序。结果蒲公英属植物ITS序列总长度约为641～642 bp,其中ITS-1长度为255～256 bp,5.8S长度为162 bp,ITS-2长度为224 bp。序列间共有23个变异位点。运用DNA Star软件进行系统分析得到蒲公英属内4种植物的系统进化树,这一分析结果与来自形态学的研究结果基本吻合。结论此法可用于蒲公英属植物种间及真伪品鉴别。
- 李喜凤杜云锋张红梅郝哲
- 关键词：蒲公英核糖体DNAITS序列分子鉴定
- 蒲公英属植物遗传多样性的RAPD分析被引量：1
- 2011年
- 目的分析4种蒲公英属植物的遗传关系和遗传多样性。方法利用RAPD分子标记技术和方法对不同居群蒲公英进行检测,通过计算遗传相似系数建立其聚类分析图。结果从150条随机引物筛选出10条有效引物,在河南4个品种24个野生蒲公英居群RAPD共扩增出1 110个位点,平均每个引物扩增出111个位点,每个居群扩增出46.25个位点;在所获得的95条可重现谱带中,7条单态,88条多态,多态性程度达92.63%,遗传距离在0.008 7～0.792 2。结论蒲公英不同种、同一种不同居群间存在明显的遗传分化,其中种间差异大于种内,遗传多样性主要存在于居群间;RAPD技术可以作为蒲公英居群遗传多态性、亲缘关系及品种鉴别研究的有效手段。
- 李喜凤杜云锋张红梅郝哲
- 关键词：蒲公英RAPD聚类分析
- 蒲公英属4种植物遗传关系与遗传多样性的RAPD分析
- 目的对蒲公英属植物进行遗传关系和遗传多样性研究。方法利用RAPD分子标记技术和方法对不同居群蒲公英进行检测,通过计算遗传相似系数建立其聚类分析图。结果从150条随机引物中,共筛选出10条有效引物,在河南4个品种24个野生...
- 李喜凤杜云锋张红梅郝哲
- 关键词：蒲公英RAPD聚类分析
- 文献传递
- 正交设计优化蒲公英药材RAPD-PCR反应体系
- 2010年
- 目的:考察不同因素对蒲公英随机扩增多态性DNA反应体系的影响,建立并优化反应体系。方法:正交设计及综合评分法应用于建立RAPD-PCR反应体系的研究。结果:蒲公英药材RAPD-PCR最佳反应体系为25μL反应体系中含1×GC buffer、2.5 mmol/L Mg2+、1.25 U Taq酶、0.4μmol/L引物、0.4 mmol/L dNTP Mixture、50 ng模板DNA。结论:该反应体系具有良好的稳定性和重复性,为进一步研究蒲公英药材遗传多样性奠定了坚实的基础。
- 李喜凤杜云锋张红梅郝哲
- 关键词：蒲公英随机扩增多态DNA正交设计综合评分法
- 蒲公英总DNA的提取及其RAPD-PCR反应条件的优化被引量：3
- 2010年
- 目的建立并优化蒲公英样品总DNA提取方法及其RAPD-PCR反应体系。方法采用改良的CTAB法提取基因组DNA,对蒲公英RAPD-PCR反应体系中各个主要影响因子进行了优化和筛选。结果建立了多态性高、重复性好、可用于蒲公英RAPD分析的最佳反应体系。25μl反应体系中含有:1×TaqMix buffer,50 ng DNA模板,0.4μmol/L引物,1.5mmol/L Mg2+,0.25 mmol/L dNTPs,1.25UTaq酶。扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,38℃复性1 min,72℃延伸2 min,共40个循环;72℃延伸10 min,反应结束后,4℃保存。结论这一优化体系的建立为今后利用RAPD标记技术进行蒲公英鉴定及种质资源遗传多样性分析奠定了基础。
- 李喜凤杜云锋张红梅郝哲许闽白雁
- 关键词：蒲公英基因组DNA提取随机扩增多态性DNA技术
- 中药蒲公英基因组总DNA提取方法研究被引量：2
- 2012年
- 目的寻找一种快速简便的蒲公英干品总DNA的提取方法。方法用改良CTAB、SDS、高盐低pH 3种提取方法及液氮、玻璃砂2种研磨方法提取蒲公英总DNA,采用蛋白核酸测定及电泳检测所得DNA的纯度和浓度。结果 3种提取方法所得到的DNA纯度和浓度不同,改良CTAB法提取总DNA纯度和浓度较高,电泳显示主条带较清晰,降解较少;2种研磨方法蛋白核酸测定及电泳结果相近。结论改良CTAB法适用于蒲公英药材基因组DNA的提取。
- 杜向红杜云锋李喜凤
- 关键词：蒲公英DNACTAB法SDS法
