北京市属高等学校人才强教计划资助项目(PHR2009-07135)
- 作品数：9 被引量：30H指数：4
- 相关作者：吴国娟张中文武聚富陆彦沈红更多>>
- 相关机构：北京农学院新疆农业大学北京市农业局更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金北京市属高等学校人才强教计划资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 连翘酯苷对人工感染传染性支气管炎病毒雏鸡肺组织JAK/STAT信号通路的调节作用被引量：8
- 2011年
- 探讨连翘酯苷对人工感染传染性支气管炎病毒雏鸡的肺组织JAK/STAT信号通路的调节作用,分别设连翘酯苷预防组高、中、低和治疗组高、中、低6个剂量组,并设利巴韦林阳性对照组、空白对照组和病毒对照组。提取雏鸡肺组织总RNA,用相对荧光定量RT-PCR的方法测定雏鸡体内干扰素-α,JAK,STAT-1mRNA的相对表达量。结果表明连翘酯苷预防组高剂量100 mg/kg、中剂量50 mg/kg和治疗组中剂量100 mg/kg对雏鸡体内干扰素-α的mRNA水平表达有诱生作用(P<0.01),治疗组中剂量显著上调JAK及STAT-1的表达,与JAK/STAT信号通路一些因子的上调相关,其机制部分与肺组织的JAK/STAT信号通路激活和相关信号的表达有关,这是连翘酯苷发生抗病毒作用的机制之一。
- 张羽璐李华伟庄英华高飞苑嗣纯王惠川吴国娟
- 关键词：连翘酯苷鸡传染性支气管炎病毒干扰素-ΑJAK/STAT信号通路
- 马兜铃酸Ⅰ诱导肾小管上皮细胞凋亡的检测被引量：5
- 2011年
- 本试验旨在培养小鼠肾小管上皮细胞(renal tubular epithelial cells,RTECs),探讨马兜铃酸Ⅰ(aristolochic acidⅠ,AAⅠ)诱导小鼠肾小管上皮细胞的凋亡情况。AAⅠ与RTECs反应后,从细胞形态学、DNA Ladder、流式细胞仪3个方面检测AAⅠ诱导RTECs的凋亡情况。AAⅠ作用后,随着浓度的增高,上皮细胞失去上皮细胞表型,在20～80μg/mL作用24h后,细胞都出现晚期凋亡的特征;在20μg/mL AAⅠ的作用下早期凋亡的比率随作用时间的延长而增高。AAⅠ可诱导小鼠原代RTECs产生凋亡,凋亡随着作用时间的延长和药物浓度的增大而加剧。
- 彭晓兰董晓凯廖芳芳高磊张中文吴国娟
- 关键词：肾小管上皮细胞细胞凋亡
- 连翘酯苷对体外培养细胞的毒性研究被引量：1
- 2009年
- 探讨了连翘酯苷对体外培养细胞的毒性,以期为人们更好地研究利用连翘酯苷提供实验依据。实验采用细胞病变法观察连翘酯苷对猪肾细胞(PK-15)、猴肾细胞(Marc-145)、鸡胚肾细胞(CEK)、鸡外周血淋巴细胞(PBL)等4种细胞的形态损伤;用MTT法检测连翘酯苷作用这4种细胞后的细胞活性和细胞数量的变化。根据这两种方法的结果计算出连翘酯苷对这4种细胞的半数致死量。实验结果显示高剂量的连翘酯苷可致细胞发生病变,而低剂量组的细胞形态优于对照组。经SPSS16.0统计,连翘酯苷对PK-15、Marc-145、CEK3种细胞的半数致死量分别为137.8、87.1、384.4μg/mL,对PBL应用到中华人民共和国兽药典(2000年版)规定药量的10倍剂量,结果未发现致死性。因此,适当合理的连翘酯苷用量对体外培养的细胞没有毒性,反而有一定的维持细胞形态的营养作用和刺激细胞增殖的作用。
- 武聚富张中文况玲沈红陆彦吴国娟
- 关键词：连翘酯苷细胞培养毒性
- PRRSV和PCV-2共感染小鼠疾病模型的建立被引量：1
- 2010年
- 45只6周龄昆明小鼠,随机分为3组:单次攻毒组(A组)、连续攻毒组(B组)和正常对照组(C组)各15只。A组于试验1 d先后接种PRRSV和PCV-2,B组于1,3,5 d接种PRRSV和PCV-2,C组于1 d接种MEM细胞培养液,各组于试验后7,14,21,28,35 d随机选3只采血后处死,采用体质量测定、抗体ELISA、荧光定量PCR、肉眼和显微病理观察等4项检测指标进行模型鉴定。结果显示,与C组相比,A组和B组小鼠体质量增率减慢;肺脏出现典型的间质性肺炎病变;腹股沟淋巴结肿大,淋巴细胞坏死;脾脏淋巴细胞缺失,被膜散在出血;肝静脉淤血;抗体检测均呈阳性;荧光定量PCR检测证实,C组不存在病毒复制,A、B组小鼠被检组织均存在病毒复制,相对病毒含量在淋巴结中较其他组织差异显著(P<0.01)。结果表明,试验已成功建立PRRSV和PCV-2共感染昆明小鼠疾病模型。
- 马元元张中文周旭平裴兆柱刘钧许承扬吴国娟
- 关键词：小鼠PRRSV共感染
- 鸡传染性支气管炎病毒M41型的扩繁及在鸡胚肾细胞上的适应性研究被引量：4
- 2011年
- 探明鸡传染性支气管炎病毒(Avian Infectious Bronchitis Virus,IBV)感染鸡胚肾细胞(Chicken Embry-o Kidney Cells,CEK cell),并且实现其增殖为目的。将IBV稀释液注射到SPF鸡胚尿囊腔内,培养鸡胚扩繁,观察记录结果;并培养CEK细胞,采用100倍半数组织培养感染量的IBV进行染毒实验;应用Reed-Muench法计算半数鸡胚感染量为10-6.68/0.1 mL;用Real time PCR检测IBV在感染细胞中的含量,以确定IBV在CEKcells中已经感染且增殖成功。结果表明,接种10日龄的SPF鸡胚可以收集更多的、约8 mL的尿囊液毒;反复盲传至7代的IBV可使CEK cells产生明显的细胞病变效应;通过实时荧光定量PCR和RT-PCR检测,最终确定IBV-M41型扩繁成功并且能够在CEK细胞上繁殖,为下一步实验提供了参考。
- 李华伟武聚富庄英华高飞吴国娟
- 关键词：传染性支气管炎病毒PCR适应性
- 血浆中连翘酯苷高效液相色谱检测方法的建立被引量：3
- 2009年
- 为建立测定血浆中连翘酯苷含量的高效液相色谱方法,将血浆样品经去蛋白处理,以乙腈-水-醋酸（18∶82∶0.41）为流动相,流速为1 mL/min,检测波长为332 nm,柱温为25℃,进样量为10μL,经Angilent ZORBAX SB-C18（5μm×4.6mm×250 mm）色谱柱分离,进行色谱分析。结果表明,本方法连翘酯苷的血浆浓度在0.05-200μg/mL内线性关系良好,精密度和重复性试验RSD均小于5%。本方法简便、灵敏、重现性高,可用于连翘酯苷的药动学和相对生物利用度的研究。
- 周旭平陆彦张中文沈红吴国娟
- 关键词：连翘酯苷高效液相色谱血浆
- 鸡传染性支气管炎病毒荧光定量PCR标准曲线的建立被引量：6
- 2009年
- 笔者针对传染性支气管炎病毒(IBV)M41株中编码核衣壳蛋白的N基因设计并合成一对引物,通过构建重组阳性标准质粒的方法,成功建立SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法检测IBV的标准曲线。该方法所建立的曲线可检测到初始模板中5×102copies/μL的病毒核酸,与常规PCR相比敏感性大大提高。笔者建立的荧光定量PCR检测方法具有灵敏度高、特异性强、重复性好等特点,可用于传染性支气管炎的临床诊断和健康带毒鸡群的检测。
- 武聚富张中文毛东有沈红陆彦况玲吴国娟
- 关键词：传染性支气管炎病毒荧光定量PCR病毒检测
- Smad7和组蛋白去乙酰化酶1在小鼠马兜铃酸肾病中的表达被引量：2
- 2012年
- 目的探讨Smad7、组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)在小鼠马兜铃酸肾病(AAN)中的表达及两者在马兜铃酸肾病发生、发展中的作用。方法将32只体重(20±2)g的SPF(无菌)雄性昆明小鼠随机分为4组,其中3组为实验组,灌胃给予不同剂量的马兜铃酸(AA)Ⅰ,分别为4 mg/(kg.d)、8 mg/(kg.d)、16mg/(kg.d)。另设对照组,PBS灌胃。应用免疫组织化学、免疫印迹法及RT-PCR技术,检测AAN小鼠和正常对照组中Smad7和HDAC1的表达情况。结果 HDAC1阳性着色主要分布于细胞核上,且在AAN中的表达强度明显高于正常对照组。免疫印迹法检测和RT-PCR提示,Smad7在AAN中的表达低于对照组,而HDAC1的表达显著高于对照组。结论在AAN中Smad7低表达以及HDAC1高表达,提示Smad7和HDAC1可能在AAN的发生、发展中起重要作用。
- 彭晓兰董晓凯廖芳芳高磊张中文吴国娟
- 关键词：马兜铃酸肾病SMAD7组蛋白去乙酰化酶1免疫组织化学免疫印迹法小鼠
- 马兜铃酸Ⅰ致小鼠肾脏损伤的研究被引量：1
- 2011年
- 本研究旨在观察马兜铃酸Ⅰ对小鼠肾脏超微结构及其相关生理指标的影响,初步阐明马兜铃酸Ⅰ对肾脏的损伤作用,为探讨发病机理提供理论依据。将20g左右的雄性昆明鼠随机分成4组,每日分别用低、中、高3个浓度的马兜铃酸Ⅰ溶液灌胃,对照组用等体积饮用水替代。第30天时观察各组的肾脏组织病理学变化,并检测血液和尿液中相关生理指标。随着给药剂量的增加,小鼠体质量呈加速下降趋势,初期尿量增多,后期尿量减少甚至出现无尿、肾性糖尿,而血清中TGF-β1的含量逐渐上升,小鼠红细胞、血红蛋白、单核细胞减少。与对照组相比,在皮质到皮髓交界处,试验组表现为近曲小管上皮细胞损伤,纤维化随着剂量的加大由皮质向髓质逐渐深入。电镜下观察可见细胞器损伤以及细胞核变异。马兜铃酸I对小鼠明显的剂量依赖性的损伤作用,主要导致肾小管间质病变,并改变其正常的超微结构。
- 董晓凯张中文彭晓兰廖芳芳高磊吴国娟
- 关键词：肾脏TGF-Β1病理学变化小鼠
