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shRNA敲减ECEL1基因对肝癌细胞基因表达谱的影响: 目的　　研究ECEL1基因敲减对肝癌细胞基因表达谱的影响。　　方法　　1.人肝癌细胞(BEL-7404)分为2组，实验组(KD组)：人肝癌细胞(BEL-7404)+ECEL1基因shRNA慢病毒感染;对照组(NC组)：人...; 陈琼; 关键词：肝癌基因表达谱信号通路; 文献传递

肝纤维化发病机制中细胞和分子机制的研究进展被引量：7: 2015年; 关于肝纤维化形成的复杂的细胞和分子联系已经有了相当多的研究进展。最近的数据表明,纤维化进程的终止和纤维分解途径的恢复可以逆转晚期肝纤维化甚至肝硬化。因此,需要更好地阐明参与肝纤维化的细胞和分子机制。HSC(肝星状细胞)的激活是肝纤维化发生的中心事件,此外还有产生基质的其他细胞来源,包括肝门区的成纤维细胞,纤维细胞和骨髓来源的肌纤维母细胞。这些细胞与其邻近细胞通过多种联系聚集产生纤维疤痕并造成持续性损伤。阐明不同类型的细胞的相互作用,揭示细胞因子对这些细胞的影响,理清活化HSC基因表达的调控,将有助于我们探索新的肝纤维化治疗靶点。此外,不同的病因有不同的致病途径,弄清这一点有助于针对特异性疾病治疗方法的发现。本文概述了肝纤维化的细胞和分子机制的最新研究进展,可能为未来治疗方法带来新的突破。; 盛婷傅念阳学风吴青刘瑛; 关键词：肝脏肝纤维化肝硬化细胞外基质

环氧合酶2抑制剂对非酒精性脂肪性肝病大鼠模型回肠Acsl基因家族表达的影响被引量：1: 2020年; 目的研究环氧合酶2(COX-2)抑制剂对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠模型回肠Acsl基因家族表达的影响及意义。方法将45只SD大鼠随机分为3组:正常对照组(n=15只,普通饲料)、NAFLD模型组(n=15,高脂饲料)、尼美舒利组(n=15,高脂饲料+尼美舒利)。所有SD大鼠喂养到第12周处死。采集下腔静脉血,检测其总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)。肝组织行HE染色和油红O染色,评价各组大鼠肝组织脂肪变性程度。实时荧光定量PCR法检测回肠Acsl家族各基因的表达情况。计量资料多组间比较采用方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果与正常对照组大鼠比较,NAFLD模型组血清TC、TG值均明显增加,肝脏脂肪变性明显(P值均<0.05);尼美舒利组与NAFLD模型组比较,血清TC、TG值均明显下降,肝脏脂肪变性程度减轻(P值均<0.05);与正常对照组大鼠相比,NAFLD模型组大鼠回肠COX-2的表达明显升高(P<0.05);与NAFLD模型组大鼠相比,尼美舒利组回肠COX-2的表达明显降低(P<0.05);与正常对照组相比,NAFLD模型组回肠Acsl3、Acsl5基因的表达明显增加(P值均<0.05);与NAFLD模型组相比,尼美舒利组Acsl3、Acsl5基因的表达明显降低(P值均<0.05)。结论COX-2抑制剂尼美舒利对NAFLD大鼠回肠Acsl基因家族表达有调控作用,提示COX-2抑制剂可能通过Acsl基因抑制NAFLD的进展。; 郭珊易世杰阳学风曹婷傅念周克兵龙建武; 关键词：环氧化酶2 非酒精性脂肪性肝病

姜黄素对非酒精性脂肪肝细胞自噬的影响: 目的：非酒精性脂肪性肝病作为一种常见的代谢性疾病，严重威胁着人类的生命健康。自噬(autophagy)通过“自我清除”的方式，双层膜结构的自噬小泡包裹细胞内产生的一些损坏性蛋白或细胞器后，然后将其送入酵母和植物体内的液泡...; 廖梦君; 关键词：姜黄素非酒精性脂肪肝病细胞自噬

Roles of Long-chain Acyl Coenzyme A Synthetase in Absorption and Transport of Fatty Acid被引量：1: 2016年; Long-chain acyl coenzyme A synthetase(ACSL) is a member of the synthetase family encoded by a multigene family;it plays an important role in the absorption and transport of fatty acid.Here we review the roles of ACSL in the regulating absorption and transport of fatty acid,as well as the connection between ACSL and some metabolic diseases.; Fan GaoXue-feng YangNian FuYang HuYan OuyangKai Qing无; 关键词：ABSORPTION

神经酰胺诱导肿瘤细胞凋亡的机制研究进展被引量：6: 2015年; 神经酰胺(ceramide,Cer)作为一种神经鞘磷脂分子,不仅是细胞膜的组成成分,而且可以作为各种信号转导途径的第二信使,参与细胞增殖、分化、衰老和凋亡等生命活动的调节。Cer的合成、代谢及信号转导在肿瘤发生发展甚至耐药和抵抗放射治疗中有着密切的关系。Cer可以被诸如肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factorα,TNF-α)、激素、电离辐射和化疗药物等细胞外信号和受体激活,其主要可以通过内源性凋亡途径和外源性凋亡途径诱导肿瘤细胞凋亡的发生。在肿瘤细胞凋亡发生过程中,Cer通过激活Jun氨基末端激酶(JNKs)、有丝分裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节蛋白激酶(MAPK/ERK)和P38等信号通路以及蛋白激酶、组织蛋白酶D、蛋白磷酸酶1(Protein phosphatase1,PP1)和蛋白磷酸酶2A(Protein phosphatase2A,PP2A)等效应分子介导肿瘤细胞凋亡。本文综述近年来有关Cer在应激反应级联以及肿瘤细胞凋亡中的作用的研究进展。; 周璇阳学风; 关键词：神经酰胺细胞凋亡 P38

Effect of Autophagy Over Liver Diseases被引量：1: 2016年; In recent years, increasingly evidences show that autophagy plays an important role in the pathogenesis and development of liver diseases, and the relationship between them has increasingly become a focus of concern. Autophagy refers to the process through which the impaired organelles, misfolded protein, and intruding microorganisms is degraded by lysosomes to maintain stability inside cells. This article states the effect of autophagy on liver diseases （hepatic fibrosis, fatty liver, viral hepatitis, and liver cancer）, which aims to provide a new direction for the treatment of liver diseases.; Dong-qian YiXue-feng YangDuan-fang LiaoQing WuNian FuYang HuTing Cao; 关键词：AUTOPHAGY

利用CRISPR/Cas9慢病毒载体构建敲除大鼠肝星状细胞COX-2基因的细胞模型: 2021年; 目的通过构建CRISPR/Cas9慢病毒载体,转染HSC-T6细胞,获得能稳定表达Cas9蛋白的HSC-T6细胞和COX-2基因缺陷的HSC-T6-COX-2-/-细胞,为后期的功能研究提供良好的工具和手段,为临床上治疗肝纤维化提供新策略。方法设计合成COX-2基因特异性的sgRNA(COX-2-sgRNA-1、COX-2-sgRNA-2、COX-2-sgRNA-3),并将其连接至GV371载体上,提取重组后的质粒,将其与包装质粒共同转染到293T细胞,形成慢病毒颗粒,荧光法检测病毒滴度。按照MOI值计算病毒最适用量,先将Lenti-Cas9-puro转染至HSC-T6细胞,嘌呤霉素筛选得到HSC-T6-Cas9细胞,再用Lenti-COX-2-sgRNA-EGFP转染至HSC-T6-Cas9细胞获得HSC-T6-COX-2-/-细胞,通过Cruiser酶切检测及Western Blot等方法在基因和蛋白水平上进行敲除验证。计量资料多组间比较采用方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果通过测序验证COX-2-sgRNA表达载体构建成功。重组表达质粒和包装质粒共同转染到293T细胞,形成慢病毒颗粒,荧光法检测病毒滴度均在1×108以上。成功构建能稳定传代的Cas9蛋白的HSC-T6细胞和COX-2基因缺陷的HSC-T6-COX-2-/-细胞模型。HSC-T6-Cas9细胞中LV-Cas9-Puro mRNA相对表达量(541.93±105.76)高于CON组细胞(1.00±0.02),差异具有统计学意义(t=12.995,P<0.01)。通过Cruiser酶切检测及Western Blot试验,结果提示CRISPR/Cas9慢病毒表达载体能在靶点起作用,其中COX-2-sgRNA-2敲除作用最明显,并且COX-2蛋白表达水平较CON组和NC组相比显著下降(P值均<0.05),提示COX-2-sgRNA有活性。结论成功构建了针对COX-2靶基因的CRISPR/Cas9慢病毒载体,获得稳定的COX-2基因敲除的HSC-T6-COX-2-/-细胞。; 彭敏曹婷阳学风易世杰傅念周克兵龙建武; 关键词：慢病毒感染基因敲除技术

肝脏不同类型细胞衰老对肝纤维化发生发展的影响被引量：7: 2018年; 细胞衰老是细胞在受到某些特定刺激后而被激活的一种基本细胞应答程序,是生物机体的基本特征。肝纤维化是由各种致病因子所致肝内结缔组织异常增生,导致肝内弥漫性细胞外基质过度沉积的病理过程,可发展为肝硬化、肝癌。研究表明细胞衰老与肝纤维化的进展密切相关,针对肝内各种类型细胞衰老对肝纤维化的调控作用进行了综述。; 郭珊阳学风; 关键词：肝硬化细胞衰老

ECEL1基因敲减对肝癌细胞增殖的影响: 目的：研究ECEL1基因对肝癌细胞增殖的影响，为肝癌防治提供新的靶点。　　方法：(1)人肝癌细胞感染ECEL1基因RNAi慢病毒，同时设置对照组，然后在荧光显微镜观察细胞感染效率。(2)qPCR检测ECEL1基因敲减后的...; 王峻峰; 关键词：肝癌细胞增殖

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国家自然科学基金(81373465)

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