东莞市科技局科研立项(2007108101100)
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 相关作者：颜其贵陈进会韩国全王志彪万莉更多>>
- 相关机构：四川农业大学东莞出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：东莞市科技局科研立项四川省教育厅重点项目长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒M基因研究进展被引量：4
- 2010年
- 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的猪的严重繁殖障碍和呼吸道疾病。PRRSV为动脉炎病毒属的不分节段的单股正链RNA病毒,含有8个开放阅读框(ORFs),其中ORF6编码的非糖基化膜蛋白(M)为其优势结构蛋白,是PRRSV中较保守的蛋白,具有良好的免疫原性,可作为疫苗候选基因研究和建立诊断方法。论文阐述了PRRSV M基因的研究进展,并对基于M基因工程疫苗和检测技术等进行综述。
- 王小玉陈进会颜其贵任玉鹏韩国全
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征M基因疫苗
- PRRSV SCQ株M蛋白基因截断片段原核表达及间接ELISA检测方法的初步建立
- 2011年
- 通过PCR方法从重组质粒pMD18-T-M扩增得到缺失N端跨膜区的M蛋白基因片段dM(de-letingM),克隆至高效原核表达载体pGEX-4T-1,得到重组M蛋白。以纯化的重组M蛋白作为抗原,建立检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体的间接ELISA方法,并确立ELISA最佳工作条件。经重复性试验、交叉试验、阻断试验等试验验证,结果表明该方法重复性好、特异性强、敏感度高;与美国IDEXX公司试剂盒相比较,特异性和敏感性分别为96.3%和93.5%,无显著性差异。用建立的方法检测临床血清样品168份,总阳性率为39.9%。
- 陈进会余霞颜其贵万莉马磊王志彪
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒原核表达间接ELISA
- 携Hsp70的PRRSV ORF5与ORF6基因重组质粒构建及在Cos-7细胞中的表达被引量：2
- 2011年
- 为构建高效猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRS)DNA疫苗,利用Hsp70作为免疫佐剂增强免疫功能的特点,构建了含PRRSVORF5,ORF6基因的融合表达载体pCI-ORF5-ORF6A,以及携带HSP70基因的融合表达载体pCI-ORF5-ORF6B-Hsp70,转染Cos-7细胞。IFA检测结果显示,两个融合表达载体均能在Cos-7细胞中表达;Western blot检测证实转染质粒pCI-ORF5-ORF6A和pCI-ORF5-ORF6B-Hsp70在42.7 Ku,112.2 Ku分别表达出特异性条带。结果显示所构建的重组质粒能在Cos-7细胞内进行良好的表达,且表达的蛋白具有免疫原性。
- 左兰颜其贵刘彬李双江
- 关键词：PRRSVHSP70COS-7细胞
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒SCQ株M蛋白基因截断片段原核表达载体构建及其表达的初步研究
- 2010年
- 为表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)M蛋白主要抗原表位基因序列,参照GenBank中发表的PRRSV SCQ株M蛋白基因设计并合成一对特异性引物,通过PCR方法从重组质粒pMD18-T-M扩增得到缺失N端跨膜区的M蛋白基因片段dM(deleting M),将其与pMD19-T simple vector连接,经测序正确后克隆至高效原核表达载体pGEX-4T-1,得到重组表达载体pGEX-4T-1-dM,并将其转化大肠杆菌Rosetta(DE3),经IPTG于37℃诱导,PRRSV M基因获得表达。经SDS-PAGE分析,所表达的融合蛋白分子量约为35 kDa。以纯化的重组蛋白作为抗原,经Western Blot分析结果表明该重组蛋白可被PRRSV阳性血清所识别,可用于PRRSV的检测。
- 陈进会冯迎春颜其贵黄伟韩国全万莉雷燕王志彪
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒原核表达
