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国家自然科学基金(30270532)
作品数:
2
被引量:3
H指数:2
相关作者:
张宗明
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王尧尧
裘法祖
黄昌州
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2009
1篇
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钙池操纵的钙通道抑制剂对大鼠肝细胞钙池操纵的钙通道电流的影响
被引量:2
2005年
目的探讨钙池操纵的钙通道(SOC)抑制剂(2APB)对大鼠肝细胞SOC电流(Isoc)的影响。方法急性分离大鼠肝细胞,应用全细胞膜片钳记录技术测定大鼠肝细胞Isoc,并观察2APB对该电流的影响。结果在急性分离的大鼠肝细胞记录到Isoc,从其电流电压(IV)曲线可以看出该Isoc的反转电位为-2.5mV左右。在钳制电位为-100mV时,该Isoc为(-664.52±140.44)pA(n=8);20、40、60、80、100μmol/L的2APB分别使Isoc由给药前的(-664.52±140.44)pA下降至给药后的(-564.80±111.01)、(-490.11±73.97)、(-362.01±55.91)、(-295.64±50.03)、(-232.12±46.47)pA,给药前后比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);2-APB的抑制作用呈浓度依赖性增强,其EC50为(64.63±10.56)μmol/L。结论2APB对急性分离的大鼠肝细胞Isoc具有显著的抑制作用,这对于进一步深入进行肝细胞钙超载的发生机制和防治具有重要意义。
黄昌州
张宗明
裘法祖
关键词:
大鼠肝细胞
急性分离
钙通道电流
给药
抑制剂
人TRPC1基因真核表达载体的构建及肝细胞表达
被引量:2
2009年
目的构建人TRPCI基因真核表达载体,并观察其在人肝细胞株(HL-7702)中的表达。方法提取细胞总RNA,逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)得到TRPCI基因的编码序列,经纯化回收后克隆入表达载体pGM.T中,酶切及琼脂糖凝胶电泳分析鉴定,最后转染HL-7702细胞,通过电泳和噻唑蓝(MTT)比色法检测基因表达与细胞生长。结果扩增片段长度为455bp,重组质粒pGM—T.TRPCI经酶切鉴定条带位置正确,证明表达载体成功构建。电泳结果显示转染重组质粒后的HL-7702细胞表达TRPCI增强。MTT检测发现转染前后肝细胞生长未受到明显影响(t值分别为0.43、-0.40、-2.01、-1.60、-0.41和-0.72,P值均〉0.05)。结论成功构建人TRPCI基因的真核表达载体pGM—T—TRPCI,并在人肝细胞株HL-7702中稳定表达。
张振亚
张宗明
潘丽洁
税朝祥
王尧尧
关键词:
肝细胞
真核表达载体
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