国家自然科学基金(30270541)
- 作品数：4 被引量：18H指数：3
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- 氧化低密度脂蛋白对大鼠主动脉平滑肌细胞尾加压素Ⅱ受体表达的影响被引量：8
- 2006年
- 目的探讨氧化低密度脂蛋白（ox—LDL）和尾加压素Ⅱ（UⅡ）对大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的相互作用及ox—LDL对UⅡ受体表达的影响。方法应用MTT法测定不同浓度的ox-LDL（0．01、0．1、1、10、50μg／ml）和UⅡ（10、50nmol／L）对大鼠VSMC增殖的作用；应用竞争RT-PCR和放射性配体受体结合试验分别从mRNA和受体功能水平分析不同浓度ox-LDL孵育下VSMC表达GPR14的变化。并设生理盐水对照组。结果ox-LDL 0．01μg／ml与UⅡ10nmol／L可协同促进VSMC增殖，使MTT值增至对照的162％±29％（0．528±0．036VS0．308±0．026，P〈0．01）；而在0．1μg／ml时MTT值减弱为对照的153％±22％（0．461±0．017vs0．308±0．026，P〈0．05）；至1μg／ml时二者协同作用消失，MTT值降为对照的123％±13％（0．400±0．015VS0．308±0．026．P〉0．05）。在浓度为50μg/ml时ox-LDL则表现为细胞毒性，抑制细胞增殖，MTT值下降至对照的59％（0．195±0．017VS0．308±0．026，P〈0．01），而UⅡ则可部分拮抗其细胞毒性，使MTT值增至对照的68％。竞争PCR显示ox-LDL0．1μg／ml可使VSMC GPR14 mRNA表达上调25％（P〈0．04）。而1．50μg／ml可浓度依赖性下调GPR14 mRNA表达，最大效应于50μg／ml时可使GPR14 mRNA下调73％（P〈0．01），此效应具有时间依赖性，于12h达最大效应，并持续至24h。ox-LDL 0．1μg／ml孵育12h可使大鼠^125I—UⅡ与VSMC最大结合力（Bmax）升高18％（P〈0．01），而ox—LDL50μg／ml可使Bmax下降低69％（P〈0．01）。结论UⅡ和ox—LDL可在一定浓度范围内协同促进VSMC增殖；低浓度ox-LDL可使VSMC表达GPR14水平上调，而高浓度则可使该受体下调。
- 王志坚丁文惠史力斌卜定方任自文唐朝枢
- apoE基因敲除小鼠主动脉尾加压素Ⅱ受体GPR14表达的变化被引量：5
- 2005年
- 目的观察apoE敲除小鼠主动脉组织尾加压素Ⅱ受体-GPR14表达的变化,以探讨UⅡ及其受体系统在动脉粥样硬化发病中的作用。方法取不同周龄(18、28和38周)的apoE基因敲除及同龄对照C57BL/6J小鼠(各亚组n=6只),取主动脉,提取mRNA,行竞争RT-PCR。结果apoE敲除小鼠GPR14表达分别较同龄对照增加54.2%(18周,P<0.05)、50.0%(28周,P<0.05)、97.0%(38周,P<0.01)。取28周apoE基因敲除及同龄对照小鼠(各8只)主动脉行[125I]-尾加压素Ⅱ放射性配基实验,apoE基因敲除组最大结合力(Bmax)较对照组增大64%(P<0.01),而解离常数Kd值无明显变化(P>0.05)。结论尾加压素Ⅱ/GPR14通路可能参与动脉粥样硬化的发病过程。
- 王志坚丁文惠史力斌孟磊任自文卜定方张勇刚唐朝枢
- 关键词：动脉硬化
- 尾加压素Ⅱ对大鼠胸主动脉球囊损伤后血管重塑的作用被引量：5
- 2008年
- 目的:探讨尾加压素Ⅱ(UII)在血管损伤后重塑过程中的作用。方法:建立大鼠胸主动脉球囊拉伤模型,随机分为4组(n=5),分别为假拉伤组、拉伤组、UII组(胸主动脉球囊拉伤并持续泵入UII1.0nmol·kg-1·h-1)和urantide组(胸主动脉球囊拉伤并持续泵入urantide10nmol·kg-1·h-1)。于第21d取胸主动脉,分别检测血管形态改变、UII表达、平滑肌细胞增殖和胶原表达。结果:①术后第21dUII组收缩压高于拉伤组[(140.0±10.0)mmHgvs(132.0±3.4)mmHg,P>0.05],明显高于urantide组[(140.0±10.0)mmHgvs(128.0±2.4)mmHg,P<0.05]。②胸主动脉球囊损伤后,损伤血管局部UII表达增强。③同拉伤组比,UII组进一步促进了内膜的增生,管腔面积狭窄率明显增加(0.13±0.05vs0.07±0.02,P<0.05);细胞增殖指数明显增加(0.74±0.16vs0.40±0.11,P<0.01);胶原表达也明显增加(以IOD计量,318±127vs78±26,P<0.01)。④同拉伤组比,urantide组管腔面积狭窄率没有减轻(0.09±0.03vs0.07±0.02,P>0.05);细胞增殖指数明显增加(0.73±0.15vs0.40±0.11,P<0.01);胶原表达增多但无统计学意义(以IOD计量,200±79vs78±26,P>0.05)。结论:大鼠胸主动脉损伤后局部UII表达增强;外源性UII促进新生内膜平滑肌细胞增殖和胶原表达,加重了损伤血管的狭窄,提示UII参与了损伤后修复的过程;10nmol·kg-1·h-1urantide不能抑制损伤后血管重塑的进程,拮抗UII的机制尚有待进一步探讨。
- 李康丁文惠史力斌张丽芳韩晓宁唐朝枢
- 关键词：URANTIDE血管平滑肌细胞胶原
- 尾加压素Ⅱ对大鼠损伤血管基质金属蛋白酶的影响
- 2009年
- 目的观察外源性尾加压素II(UⅡ)及其拮抗剂Urantide对大鼠胸主动脉球囊拉伤模型损伤动脉基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、MMP-2和组织基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)的影响。方法构建大鼠胸主动脉球囊拉伤模型,分为4组:假拉伤组、单纯拉伤组、拉伤术后持续皮下给予UII(1nmol·kg-1·h-1)的UII组、拉伤术后持续皮下给予Urantide(10nmol·kg-1·h-1)的Urantide组。21d后,采用RT-PCR方法检测各组UII受体G蛋白偶联受体-14(GPR-14)的表达,免疫组化和明胶酶谱法检测MMP-1、MMP-2、TIMP-2的表达水平与活性。结果①单纯拉伤组血管GPR-14mRNA相对表达量(0.66±0.09)明显高于假拉伤组(0.42±0.06),为其1.6倍(P<0.05);②与单纯拉伤组相比,UII组GPR-14mRNA相对表达量增高(0.93±0.06,P<0.05),MMP-1表达降低(8.3±1.8vs3.3±0.8,P<0.05),MMP-2活性高至其1.25倍(137±24vs172±8,P<0.05),TIMP-2表达降低(14.8±2.4vs4.0±0.8,P<0.05);③与单纯拉伤组相比,Urantide组GPR-14mRNA相对表达量降低(0.37±0.08,P<0.05),MMP-1表达差异无统计学意义,MMP-2活性高至其1.29倍(177±21,P<0.05),TIMP-2表达降低(6.6±1.2,P<0.05)。结论大鼠胸主动脉损伤后局部GPR-14mRNA水平上调,外源性应用UⅡ后,GPR-14mRNA水平进一步上调,MMP-1表达下降,TIMP-2表达减少,MMP-2活性升高。应用Urantide(10nmol·kg-1·h-1)能抑制GPR-14mRNA的水平上调,但对MMP-1的表达无明显影响,未能表现出拮抗胶原沉积的作用,甚至对MMP-2/TIMP-2平衡有类UⅡ的作用,其意义有待进一步研究。
- 张丽芳丁文惠史力斌李康柯元南唐朝枢
- 关键词：尿紧张素类基质金属蛋白酶类冠状动脉再狭窄血管内膜
