上海市自然科学基金(R14079)
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
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- 相关机构：同济大学附属东方医院同济大学更多>>
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- SGC-7901胃癌细胞株皮质肌动蛋白基因干扰稳定细胞株的构建
- 2014年
- 目的 构建针对cortactin基因干扰的胃癌SGC-7901稳定细胞株.方法 设计3条针对皮质肌动蛋白（cortactin）基因的短发卡RNA（shRNA）序列以及l条对照序列,退火后插入到PLKO.1慢病毒质粒载体中,质粒构建完成后和辅助质粒psPAX2,PCMV-VSVG共转染HEK293T细胞,包装成慢病毒颗粒,感染胃癌SGC-7901细胞株,并使用嘌呤霉素筛选.最终筛选出3个细胞株,提取该3株细胞的RNA和蛋白质分别进行实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）和Western blot检测cortactin基因的mRNA和蛋白的表达.结果 在3株不同的稳定细胞株中,PLKO.1＋shRNA3细胞株cortactin基因的mRNA和蛋白质表达下降最为明显,约为对照组的10％.结论 成功构建出针对cortactin基因干扰的胃癌SGC-7901稳定细胞株.
- 魏军李杨尤天庚所广军赵中辛
- 关键词：短发卡RNA胃癌
- 自然杀伤细胞在异纲（罗非鱼/小鼠）胰岛移植的作用
- 2014年
- 目的 观察自然杀伤（NK）细胞在异纲（罗非鱼/小鼠）胰岛移植免疫排斥中的作用.方法 胶原酶消化分离罗非鱼胰岛.链脲霉素小鼠腹腔内注射,建立药物性糖尿病小鼠模型.消化分离罗非鱼胰岛后,移植入糖尿病小鼠肝脏内,作为移植组（18只）；设立生理盐水注射组（12只）（简称盐水组）为对照组.动态观察移植后两组小鼠血糖的变化.并对移植物进行病理检查和对NK细胞免疫组织化学检测.结果 移植后1、12h时,移植组的血糖水平明显下降,浓度分别为（9.34±3.05） mmol/L及（7.80±2.10） mmol/L,与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）.但在移植后24h时血糖浓度为（28.13±1.56） mmol/L,与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.实验组在移植后12h,病理检查可见移植物周围有轻度的炎性反应,各级血管处可见明显的凝血反应,有炎性细胞的聚集,胰岛结构仍完整；在移植后24 h,可见移植物周围有明显的炎性细胞浸润.免疫组织化学检查显示在移植物周围有少量的NK细胞浸润.移植后3d,病理检查可见移植物周围可见大量炎性细胞浸润及纤维化表现.对照组在移植后的病理检查始终未发现移植部位周围有任何炎性细胞聚集.结论 罗非鱼胰岛肝脏内移植能短暂的降低糖尿病小鼠血糖,血液介导的即刻炎性反应是导致胰岛早期死亡的原因,NK细胞参与了这个排斥反应.
- 靳晓丽杨永康周主青朱哲尤天庚赵中辛胡皚娜
- 关键词：罗非鱼自然杀伤细胞
