广东省自然科学基金(5300419)
- 作品数：8 被引量：108H指数：4
- 相关作者：曾耀英肇静娴曾祥凤叶燕霞李莉平更多>>
- 相关机构：暨南大学广东省农业科学院中山大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 去铁胺对T淋巴细胞体外增殖、活化以及细胞周期的影响
- 2012年
- 分别采用MTT法、CFSE染色结合流式细胞术、双色荧光抗体染色结合流式细胞术、PI染色法检测去铁胺(DFO)对小鼠T淋巴细胞的药物毒性、对T淋巴细胞增殖、对Con A刺激下的小鼠T细胞CD69表达和淋巴细胞周期的影响。研究结果表明:DFO对淋巴细胞的毒性T细胞体外增殖、活化和细胞周期无影响;不同浓度的DFO(5、10、20、40μmol/L)能显著抑制受Con A刺激48 h和72 h后的T淋巴细胞增殖;低浓度的DFO(5、10μmol/L)对小鼠T淋巴细胞CD69的表达没有影响,高浓度(20、40μmol/L)的DFO可抑制T淋巴细胞CD69的表达;Ph能将T淋巴细胞抑制在G0/G1期。说明DFO除可通过抑制T淋巴细胞活化外,可能还通过其他机制抑制T淋巴细胞增殖,且DFO可以将淋巴细胞周期抑制在G0/G1期,可望发展成为一种新的免疫抑制干预药物。
- 陆晓宇曾耀英陈中键陈克明叶燕霞袁曦
- 关键词：去铁胺淋巴细胞流式细胞术
- 漆黄素对巨噬细胞和T淋巴细胞的免疫调节作用被引量：7
- 2010年
- 目的探讨漆黄素(Fisetin,FIS)对小鼠巨噬细胞吞噬功能、NO的释放及对T淋巴细胞体外活化、增殖的影响。方法无菌制备小鼠巨噬细胞悬液及淋巴细胞悬液;荧光微球结合流式细胞术(FCM)分析FIS对巨噬细胞吞噬作用的影响;Griess试剂盒检测巨噬细胞NO的释放;双色荧光抗体染色结合FCM,检测CD3+T细胞CD69的表达水平;CFSE标记技术检测T细胞增殖的情况。结果 2.5μmol/L,5μmol/L,10μmol/LFIS均能明显抑制巨噬细胞的吞噬微球的能力;FIS能抑制LPS和IFN-γ刺激的巨噬细胞的NO的产生(P<0.05);FIS对ConA刺激的T细胞表达CD69有抑制作用,并能有效抑制ConA诱导的T细胞增殖(P<0.01),且均呈剂量依赖性。结论 FIS能显著抑制小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力和分泌NO的能力,并能够抑制T细胞的活化和增殖,有望发展成为一种新的免疫抑制药物。
- 陈真曾耀英叶燕霞
- 关键词：漆黄素一氧化氮增殖
- 红景天苷对小鼠腹腔巨噬细胞体外增殖、凋亡、吞噬、ROS和NO产生的影响被引量：50
- 2011年
- 目的:研究红景天苷(Sal)对小鼠腹腔巨噬细胞体外增殖、凋亡、吞噬、胞内活性氧簇(ROS)及分泌一氧化氮(NO)的影响,初步探讨其对小鼠腹腔巨噬细胞的免疫调节作用。方法:无菌分离小鼠腹腔巨噬细胞,并制备单细胞悬液,以不同终浓度(80μmol/L、160μmol/L及320μmol/L)的Sal和巨噬细胞共培养4 h,再以脂多糖(LPS)和γ-干扰素(IFN-γ)进行共刺激。利用MTT比色法检测Sal对巨噬细胞体外增殖的影响。用放线菌酮(CHX)诱导巨噬细胞凋亡,用Sytox G reen染色结合荧光酶标仪检测Sal对CHX诱导巨噬细胞凋亡的影响。用流式细胞术(FCM)检测Sal对巨噬细胞吞噬功能的影响。用2-7-二氯氢化荧光素乙二脂(H2DCFDA)染色法结合荧光酶标仪检测Sal对胞内ROS产生的影响;用G riess反应检测Sal对巨噬细胞分泌NO的影响。结果:MTT比色法检测显示,终浓度为80、160、320μmol/L的Sal均可显著促进LPS+IFN-γ刺激巨噬细胞增殖(P<0.05)。荧光酶标仪检测Syto xG reen染色法的结果显示,160μmol/L的Sal可抑制CHX诱导的巨噬细胞凋亡(P<0.01)。FCM结果显示,各浓度的Sal均能促进单纯药物组和实验药物组LPS+IFN-γ刺激巨噬细胞的吞噬功能(P<0.05)。用荧光酶标仪检测DH2DCFDA染色结果表明,各浓度的Sal对LPS+IFN-γ刺激的巨噬细胞胞内ROS的产生均具有显著的抑制作用(P<0.01)。Griess反应检测NO含量的结果显示,各浓度的Sal对LPS+IFN-γ刺激巨噬细胞产生NO均具有促进作用(P<0.05)。结论:Sal对LPS和IFN-γ刺激的巨噬细胞增殖具有显著的促进作用,对CHX诱导的巨噬细胞凋亡具有显著的抑制作用,对静息态和活化态的巨噬细胞的吞噬功能均有增强作用,并能减少LPS和IFN-γ活化的巨噬细胞胞内ROS的产生;但能促进LPS和IFN-γ活化的巨噬细胞NO的分泌。
- 叶莎莎曾耀英尹乐乐
- 关键词：红景天苷腹腔巨噬细胞增殖凋亡
- 喘可治注射液对人外周血单个核细胞Th1/Th2细胞因子谱的影响被引量：43
- 2006年
- 目的:通过研究喘可治注射液对人外周血单个核细胞(PBMCs)Th1/Th2细胞因子谱的影响,探讨喘可治注射液的免疫调节作用机制。方法:以流式微球分析(CBA)法检测不同处理情况下,人外周血单个核细胞分泌Th1(IFN-γ、TNF-α、IL-2)和Th2(IL-4、IL-6、IL-10)细胞因子水平。结果:健康人PBMCs体外培养12小时后,上清中细胞因子主要为TNFα和IL6,喘可治使Th1和Th2细胞因子全面升高;喘可治对PDB加离子霉素诱导的PBMCs分泌Th1和Th2细胞因子具有抑制作用,并能抑制流感病人异常升高的INF-γ、TNF-α、IL-6和IL-10分泌。结论:喘可治注射液上调健康人PBMCs分泌Th1和Th2细胞因子,对异常活化的PBMCs分泌的Th1和Th2细胞因子则具有下调作用。
- 肇静娴曾耀英王青俞瑜王通
- 关键词：喘可治外周血单个核细胞TH1/TH2细胞因子
- 人绒毛膜促性腺激素在HIV-1感染中作用的体外研究
- 2006年
- 李莉平曾耀英曾祥凤狄静芳林长乐肇静娴
- 关键词：人绒毛膜促性腺激素HIV-1感染体外研究人类病毒传播率早孕期
- 妊娠水平孕酮体外对HIV-1感染和复制的影响
- 2006年
- 目的:研究相当于妊娠后外周血和胎盘局部浓度的孕酮(P4)体外对HIV-1感染及复制的影响。方法:检测终浓度为10-6mol/L(相当于妊娠妇女外周血水平)和10-5mol/L(相当于母胎界面局部浓度)的P4对HIV-1介导细胞融合的影响;ELISA法检测感染HIV的MT-2细胞培养上清p24抗原含量来探讨对HIV-1复制的影响;流式细胞术检测对淋巴细胞活化后CD69表达的影响和3H-TdR掺入法检测对淋巴细胞增殖的影响。结果:10-5mol/L的P4可以明显抑制HIV-1介导的细胞融合,并且降低感染细胞培养上清中p24抗原含量,两种浓度对淋巴细胞的活化和增殖都有抑制作用。结论:相当于妊娠后母胎界面局部浓度的P4体外可以抑制HIV-1感染和复制,其机制与抑制淋巴细胞活化和增殖有关。
- 李海仙曾耀英肇静娴曾祥凤李孝建
- 关键词：妊娠孕酮人类免疫缺陷病毒细胞融合
- 穿琥宁粉针剂体外抗HIV-1作用被引量：3
- 2006年
- 目的:探讨穿琥宁粉针剂在体外是否具有抗H IV作用.方法:采用荧光染料Calc ien AM标记H IV感染的慢性H9细胞(H9/H IV-1ⅢB)与不同稀释浓度的穿琥宁药物作用后,与靶细胞MT-2细胞混合培养,观察MT-2和H9/H IV-1ⅢB融合细胞的变化;MTT法检测穿琥宁对H IV感染细胞的保护作用;H IV-1P24抗原试剂盒检测药物作用后的细胞培养上清P24抗原含量的变化.结果:穿琥宁粉针剂能够抑制MT-2和H9/H IV-1ⅢB细胞融合(其抑制融合的EC50为5.49 mg/L,选择指数SI为327.6);能够保护H IV感染细胞的死亡(EC50为64.57 mg/L,SI为27.85)和减少HIV-1 P24抗原的表达(EC50为194.67 mg/L,SI为9.23).结论:穿琥宁粉针剂在体外具有抗HIV-1的作用.
- 曾祥凤曾耀英李海仙林长乐赵令斋李莉平肇静娴
- 关键词：穿琥宁粉针剂艾滋病病毒细胞融合钙黄绿素
- 根皮素对小鼠T淋巴细胞体外活化、周期、Ca^(2+)离子内流以及凋亡的影响被引量：5
- 2009年
- 目的:研究根皮素(Ph)对小鼠T淋巴细胞中期活化、细胞周期、Ca2+离子内流以及凋亡的影响,探讨将其发展为免疫干预药物的可能性。方法:双色荧光抗体染色结合流式细胞术(FCM)分析Ph对多克隆刺激剂(ConA)刺激下的小鼠T淋巴细胞CD25表达的影响;PI染色法检测Ph对T淋巴细胞周期的影响;Fluo-4/AM染色结合FCM分析Ph对T淋巴细胞Ca2+离子内流的影响;calcein/Co2+技术检测Ph对T淋巴细胞线粒体通透性转换(MPT)的影响,并用DIOC6(3)染色检测其对线粒体膜电势(MMP)的影响。结果:Ph(40,60,80μmol/L)对ConA刺激的T淋巴细胞CD25表达有显著的抑制作用(P<0.01);Ph能抑制T淋巴细胞Ca2+离子内流(P<0.01);细胞周期分析显示,Ph能将T淋巴细胞抑制在S期;且Ph能够诱导和加速MPT,并导致MMP的显著下降。结论:Ph对小鼠T淋巴细胞活化和Ca2+内流具有显著的抑制作用,并能将细胞抑制在S期,能通过线粒体途径诱导T淋巴细胞凋亡,可望发展成为一种新的免疫抑制药物。
- 陆晓宇曾耀英叶燕霞曾祥凤肇静娴
- 关键词：淋巴细胞流式细胞术
