国家自然科学基金(30270512)
- 作品数：3 被引量：11H指数：2
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- 鼻咽癌人源抗独特型单链抗体诱导的免疫应答被引量：1
- 2010年
- 目的观察鼻咽癌人源抗独特型单链抗体G22ScFv在小鼠体内诱导的免疫应答,探讨其作为鼻咽癌疫苗的可能性。方法在大肠杆菌中诱导表达G22ScFv并进行纯化,以纯化的G22ScFv免疫BALB/c小鼠,采用间接ELISA及竞争抑制ELISA检测免疫小鼠特异性体液免疫应答水平;流式细胞术检测免疫小鼠脾T淋巴细胞表型的变化。结果纯化的融合蛋白纯度达95%以上,且具有良好的反应原性。经ELISA检测,G22ScFv免疫后,小鼠产生了Ab3,且小鼠脾脏CD4+、CD8+T淋巴细胞数量升高。结论G22ScFv可诱导机体产生体液免疫和细胞免疫应答,为鼻咽癌人源抗独特型抗体疫苗的临床应用奠定了基础。
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- 关键词：鼻咽癌免疫应答
- 人工激活胚胎的性染色体分析和IGF-Ⅱ表达研究被引量：6
- 2005年
- 目的观察钙离子载体A23187联合嘌呤霉素激活胚胎的性染色体和胰岛素样生长因子-Ⅱ(insulin-like growthfactor-Ⅱ,IGF-Ⅱ)表达。方法收集体外成熟周期(in vitromaturation and intracytoplasmicsperminjection,IVM-ICSI)和卵母细胞单精子显微注射(intracytoplasmic sperminjection,ICSI)中受精失败的卵母细胞95枚,采用钙离子载体A23187和嘌呤霉素激活。应用荧光原位杂交技术分析来源于2PN2PB胚胎的性染色体;免疫组化检测IGF-Ⅱ的表达,并与正常胚胎、孤雌胚胎相比较。结果钙离子载体A23187联合嘌呤霉素能有效地激活ICSI后22h未受精卵母细胞,激活胚胎能发育到囊胚阶段。激活胚胎的性染色体为5枚XX,8枚XY。激活胚胎的IGF-Ⅱ表达与正常胚胎相近,明显较孤雌胚胎增强。结论钙离子载体A23187联合嘌呤霉素是一种安全、有效的激活方式,有希望成为ICSI受精失败的有效补救措施。
- 鹿群陈子江高选李媛颜军昊马水英李梅
- 关键词：胚胎性染色体钙离子载体A23187嘌呤霉素人工受精
- 鼻咽癌人源抗独特型基因工程抗体的原核表达及鉴定被引量：4
- 2008年
- 目的构建鼻咽癌人源抗独特型单链抗体原核表达载体,对其产物做初步鉴定,为鼻咽癌疫苗制备奠定基础。方法采用分子克隆技术,PCR扩增G22ScFv基因,并将其克隆到原核表达载体pET25b(+)上,将重组子转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,表达的蛋白经His-tag纯化试剂盒纯化后复性。SDS-PAGE及Western blot分析融合蛋白。结果构建的原核表达载体pET25b(+)-G22经测序检测,序列正确。在大肠杆菌中G22ScFv以包涵体形式获高效表达,SDS-PAGE及Western blot鉴定表达的目的蛋白Mr为25kD,同时证实载体构建及表达均正确。目的蛋白经试剂盒纯化后电泳分析纯度达95%以上。结论利用基因重组技术,在原核细胞中表达出重组G22ScFv并得到纯化,为研究鼻咽癌疫苗打下了基础。
- 汪静李官成童永清张志杰
- 关键词：抗独特型抗体鼻咽癌原核表达单链抗体
