国家自然科学基金(30270613)
- 作品数：16 被引量：160H指数：6
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- PPAR-γ作用及其相关信号转导途径被引量：98
- 2006年
- 过氧化物酶增殖物激活受体(peroxisomeproliferater-activatedreceptor,PPAR)是一类配体激活的核转录因子超家族成员,包括PPAR-α、PPAR-β/δ和PPAR-γ三种表型,其中以PPAR-γ的研究最为深入。PPAR-γ通过JAK-STAT、激活蛋白-1(AP-1)、NF-κB、活化T细胞核因子信号通路(NFAT)来抑制炎症反应;通过抑制泡沫细胞(foamcell)的分化、炎症反应以及细胞增殖来抑制动脉粥样硬化的发生发展;通过磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、瘦素、脂链素等信号通路来参与糖稳态的调节;通过细胞周期的调控来影响肿瘤生长;参与脂肪细胞分化并与肥胖密切相关。明确这些相关信号通路以及相关细胞因子的作用,可对相关疾病机制及防治进一步提供有力依据和干预途径。
- 陈永熙王伟铭周同陈楠
- 关键词：PPAR-Γ信号转导疾病
- 过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂对TGF-β_1诱导肾成纤维细胞细胞外基质表达的影响被引量：7
- 2006年
- 目的:研究过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂对转化生长因子β1(TGFβ1)致肾间质纤维化作用的影响,探讨其抗肾间质纤维化的潜在作用。方法:体外培养大鼠肾成纤维细胞株(NRK/49F),利用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)观察PPARγ配体15dPGJ2及其激动剂曲格列酮和齐格列酮对TGFβ1诱导的α平滑肌肌动蛋白(αSMA)、结缔组织生长因子(CTGF)、纤维连结蛋白(FN)和Ⅲ型胶原(ColⅢ)mRNA表达的影响,利用WesternBlot方法观察PPARγ激动剂对TGFβ1诱导的FN蛋白表达的影响。结果:TGFβ1能显著增加NRK/49F细胞CTGF、FN和ColⅢmRNA表达,并呈剂量依赖和时间依赖效应。与TGFβ1刺激组相比,10μM15dPGJ2、曲格列酮和齐格列酮预处理组αSMA、CTGF、FN和ColⅢmRNA表达量显著减少,FN蛋白表达量显著下降。结论:PPARγ激动剂可抑制TGFβ诱导的肾间质成纤维细胞CTGF表达和细胞外基质(ECM)合成。
- 刘峰王伟铭陈楠
- 关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体Γ转化生长因子-Β细胞外基质
- TGF-β诱导CTGF表达的信号转导途径及与纤维化形成被引量：13
- 2003年
- 转化生长因子—β(transforming growth factor-β,TGF-β)是一种具有多重生物学效应的细胞因子,参与了多种组织器官纤维化的形成。结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)是一种富含半胱氨酸的多肽,是介导TGF-β致纤维化作用的重要下游因子之一。TGF—β可通过多种信号途径诱导CTGF表达,本文就这一领域的研究进展及与纤维化形成的关系做一简要综述。
- 赵青陈楠周同
- 关键词：转化生长因子-Β结缔组织生长因子信号转导纤维化
- 过氧化物酶体增殖物激活受体辅调节因子与肾脏损伤的关系
- 2007年
- 过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARs)作为一类核转录因子,能与其特异性配体结合,进而在转录水平上调节多种基因的表达。近年来研究发现,PPARs的辅调节因子,包括辅激活因子和辅抑制因子,能够通过不同的机制促进或抑制PPARs的转录活性,调节其目的基因的表达。并且还是很多细胞内信号通路和翻译后修饰作用的对象,在肾脏疾病的进展中发挥重要重要。选择不同的辅调节因子的激活剂或抑制剂来调节相关基因的转录活性,将会成为治疗一些肾脏疾病如肾小球硬化、肾小球肾炎、糖尿病肾病及肾小管间质疾病的新的治疗手段和方法。
- 靳远萌王伟铭陈楠
- 关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体辅激活因子肾脏损伤
- 蛋白酶体抑制剂对肾间质成纤维细胞增殖、凋亡及其相关蛋白的影响
- 2009年
- 目的探讨蛋白酶体抑制剂MG-132对转化生长因子β1（TGF-β1）诱导下的大鼠肾间质成纤维细胞（NRK-49F）增殖、凋亡及其相关蛋白的影响。方法用5μg／L的TGF-β1作用于NRK-49F。不同浓度（0-5μmol／L）MG-132预处理NRK-49F细胞后，MTT法检测细胞增殖；应用流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡率；DNA凝胶电泳法观察细胞的凋亡情况；Western印迹检测p53、p27、p21、caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白的变化。结果TGF-β1（5μg／L）可促进NRK-49F细胞增殖，而MG-132（0．25-5μmol／L）呈剂量依赖性地抑制这种效应，使细胞生长停滞在G1期。TGF-β1（5μg／L）单独不能诱导NRK-49F的凋亡（3．880％±0．365％比4．723％±1．582％），而MG-132（0．10、0．25、0．50、0．75、1．00、2．50μmol／L）预处理可呈剂量依赖性地促进细胞凋亡（调亡率分别为8．8％、18．7％、22．8％、31．3％、37．7％、38．9％）。MG-132（2．5μmol／L）＋TGF-β1组及MG-132（2．5μmol／L）组在DNA电泳中呈典型的梯状条带现象。Western印迹结果显示，MG-132可剂量依赖性地激活TGF-β1诱导的细胞周期及凋亡相关蛋白p53蛋白表达，促进caspase-3的活性片段产生，Bcl-2表达下调，并能使Bax和p21表达上调，但对p27没有明显的影响。结论MG-132可抑制TGF-β1诱导的肾间质成纤维细胞增殖，并促其凋亡。该作用可能与MG-132对细胞周期及凋亡相关蛋白p53、p21、caspase-3、Bcl-2和Bax的调节有关，提示泛素蛋白酶体抑制剂可能成为将来防治。肾间质纤维化的一个潜在的治疗手段。
- 朱冰冰靳远萌韩琳陈慧王伟铭陈楠
- 关键词：转化生长因子Β1成纤维细胞细胞增殖蛋白酶体抑制剂
- 罗格列酮对脂多糖诱导肾小管上皮细胞趋化因子分泌的影响及可能机制被引量：1
- 2010年
- 目的 探讨罗格列酮（RGL）对脂多糖（LPS）诱导人近端肾小管上皮细胞（HK-2）趋化因子分泌的影响及可能机制.方法 用RGL（10 μmol/L）预处理HK-2细胞2 h后加入LPS（1 mg/L）,与单纯LPS组、单纯RGL组及未加任何刺激（CON）组进行比较.用实时定量PCR方法 检测细胞中白细胞介素8（IL-8）和单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）mRNA表达水平;用ELISA法检测细胞培养上清中IL-8和MCP-1蛋白水平.通过RNAi技术沉默肾小管上皮细胞过氧化物酶体增殖蛋白激活性受体γ（PPARγ）,观察RGL的作用是否依赖于PPARγ.用 Western印迹法检测细胞核中NF-κB蛋白水平;用EMSA方法 检测NF-κB DNA结合活性.结果 在HK-2细胞中,与CON组相比,单纯LPS刺激使IL-8、MCP-1 mRNA分别升高（4.30±0.45）倍和（4.80±1.29）倍（均P＜0.05）,使培养上清中IL-8、MCP-1分别升高（1.39±0.18）和（2.11±0.47）倍（均P＜0.05）;与LPS组相比,RGL预处理组IL-8和MCP-1在mRNA水平分别下降66.37%和71.88%（均P＜0.05）,在蛋白水平分别下降41.68%和47.87%（均P＜0.05）.在PPARγ沉默的HK-2细胞中,RGL预处理2 h后再加LPS刺激,IL-8和MCP-1mRNA仅分别下降18.16%、16.83%,培养上清中IL-8和MCP-1仅分别下降11.39%、11.86%,与单纯LPS组相比差异无统计学意义.RGL预处理2 h不能抑制LPS诱导的NF-κB核易位,但可显著降低NF-κB DNA结合活性.结论 RGL以PPARγ依赖的方式抑制LPS诱导HK-2细胞分泌IL-8和MCP-1,其机制可能与降低NF-κB DNA结合活性有关.
- 卢颖周桥仲芳郝旭李聪王伟铭陈楠
- 关键词：脂多糖类趋化因子CCL2罗格列酮
- 白细胞介素1β对肾小管上皮细胞过氧化物酶体增殖蛋白激活性受体γ及辅调节因子表达的影响被引量：1
- 2009年
- 目的探讨白细胞介素1β（1L-1β）介导的炎性反应中过氧化物酶体增殖蛋白激活性受体γ（PPAR-γ）及其辅调节因子的表达变化，分析其相互作用机制。方法体外培养人肾小管上皮细胞（HK-2），应用IL-1β作用于HK-2细胞，收集细胞总mRNA、胞核蛋白和细胞培养上清液。应用实时定量PCR、Western印迹法、ELISA法、凝胶电泳迁移率实验（EMSA）法分别从mRNA水平、蛋白质水平、DNA结合活性水平检测PPARγ及其辅调节因子（包括辅激活因子和辅抑制因子）和单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）的表达变化。结果不同浓度的IL-1β（0～20μg／L）刺激24h后，PPARγ、辅激活因子SRC-1、SRC-2和PGC-1 mRNA表达水平均呈总体下调趋势（P〈0．05），同时辅抑制因子NCoR呈显著上调趋势（P〈0．05）。以10μg／L作为IL-1β最佳刺激浓度，SRC-2和PGC-1的mRNA水平在刺激1h后就分别显著下调了57％（P〈0．01）和48％（P〈0．01）；SRC-1的mRNA水平在刺激2h后显著下调了43％（P〈0．05），而PPARγ在刺激4h时下调了55％（P〈0．01）；NCoR在刺激8h后出现显著上调（为对照组的2．17倍，P〈0．05），之后又缓慢下降，至24h仍高于对照组，但差异无统计学意义。Western印迹结果显示，PPARγ的蛋白表达在IL-1β（10μg／L）刺激4h后出现显著下降。ELISA结果显示MCP-1的分泌水平呈持续增高，8h后达到最高值[（160．56±2．8）ng／L，P〈0．011，至24h仍为（50．82±1．25）ng／L（P〈0．01）。EMSA结果显示PPARγ的DNA结合活性呈总体减弱趋势，至24h达到最低值，而NF—κB的DNA结合活性均呈总体增强趋势，至24h达到高峰。结论在肾脏炎性反应进程中，IL-1β诱导的NF—κB炎性通路激活可引起PPARγ及辅激活因子的表达下调，MCP-1和辅抑制因子的表达上调。不仅PPARγ，其辅调节因子也积极参与肾脏炎性反应。
- 靳远萌陈慧朱冰冰韩琳王伟铭陈楠
- 关键词：白细胞介素1PPARΓ单核细胞化学吸引蛋白质1
- omapatrilat对5/6肾切除大鼠肾小管间质病变的影响被引量：6
- 2005年
- 目的 观察血管肽酶抑制剂omapatrilat对5／6肾切除大鼠肾衰模型肾小管间质 病变的影响,探索防治肾小管间质纤维化的新途径。方法建立5／6肾切除肾衰大鼠模型,随 机分成手术对照组、Omap 10 mg组(omapatrilat 10 mg·kg-1·d-1)和Omap 40 mg组(omapatrilat 40 mg·kg-1·d-1),另设假手术组和正常对照组。12周后观察比较各组间大鼠尾部动脉收缩压、 肾功能、肾小管间质纤维化水平(HE、Masson、PAS和PASM染色,半定量分析)。结果(1)omapatrilat 能明显降低5／6肾切除肾衰竭大鼠血压水平[(153.67±9.69)mmHg比(192.00±10.45)mmHg, P<0.01],且Omap 40 mg组降压效果明显优于Omap 10 mg组[(142.50±11.14)mmHg比 (153.67+9.69)mmHg,P<0.05];(2)omapatrilat能改善5／6肾切除肾衰竭大鼠肾功能[Scr(61.00±15.50) μmol／L比(97.00±34.10)μmol／L,P<0.01:BUN(19.38±3.65)mmol／L比(30.23±9.31)mmol／L, P<0.01 1:(3)omapatrilat可减轻肾小管间质纤维化程度(2.0±0.63比2.83±0.55,P<0.05),但 40 mg和10 mg两剂量组差异无统计学意义。结论 omapatrilat能明显降低5／6肾切除大鼠血 压水平.显著改善其肾功能及延缓肾小管间质纤维化进展。
- 戴胜川王伟铭章斌陈楠
- 关键词：OMAPATRILAT肾小管间质病变肾切除大鼠血管肽酶抑制剂MASSON动脉收缩压
- 丝裂原活化蛋白激酶类和蛋白激酶C在转化生长因子β1诱导肾小管细胞结缔组织生长因子表达中的作用被引量：2
- 2007年
- 目的了解转化生长因子β1（TGF-β1）诱导肾小管细胞结缔组织生长因子（CTGF）表达的机制，特别是蛋白激酶C（PKC）和丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）在CTGF基因表达中的作用及其对Smad磷酸化的影响。方法分别应用PKC抑制剂G06850以及MAPK的3个组成成分ERK、JNK和p38MAPK的抑制剂PD98059、U0126、SP600125和SB203580阻断相应通路，观察其对TGF．131诱导的CTGF表达以及Smad2／Smad3磷酸化的影响。结果TGF-β1（5μg／L）以时间依赖方式诱导HK-2细胞中Smad2／Smad3的磷酸化，从基础值0．87±0．09上升至2h时高峰2．350±0.11。PKC抑制剂G06850（5μmol／L）和ERK抑制剂PD98059（10μmol／L）、U0126（10μmol／L）可部分抑制TGF-β1诱导的CTGF表达，而p38MAPK抑制剂SB203580（20μmol／L）和JNK抑制剂SP600125（10μmol／L）对TGF-β1诱导的CTGF的表达无影响。PKC抑制剂G06850（5μmol／L）可减少TGF-β1诱导的Smad2／Smad3磷酸化，而ERK抑制剂PD98059（10μmol／L）和U0126（10μmol／L）对Smad2／Smad3的磷酸化没有影响。结论在肾小管上皮细胞中，TGF-β1诱导CTGF的表达需要PKC和Ras／MEK／ERK的参与。PKC以Smad依赖的方式参与肾小管上皮细胞中TGF-β1诱导的CTGF的表达，而Ras／MEK／ERK对CTGF表达的调节不依赖于Smads。
- 陈楠邢静萍王伟铭
- 关键词：转化生长因子Β蛋白激酶C结缔组织肾小管上皮细胞
- 过氧化物酶体增殖物激活受体与肾脏病研究新进展被引量：3
- 2005年
- 刘峰陈楠
- 关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体肾脏病核转录因子
