国家自然科学基金(31372445)
- 作品数：7 被引量：16H指数：3
- 相关作者：罗俊滕蔓党露张改平宿靖伟更多>>
- 相关机构：河南农业大学河南科技大学河南省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金青年科技基金NSFC-广东联合基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 马立克氏病病毒河南分离株Meq基因的克隆与序列分析被引量：1
- 2014年
- 【目的】了解马立克氏病病毒（Marek’s disease virus,MDV）河南分离株Meq基因的分子特性,为中原地区MDV流行情况提供较详细的信息,为更好地防控MD奠定基础。【方法】应用PCR方法分别扩增了17株MDV河南省野毒分离株的Meq基因片段,克隆测序后,将各毒株Meq基因序列与vv＋MDV 648A株、vvMDV RBIB株、vMDV GA株、mMDV疫苗株CVI988株和814株的Meq基因序列进行比对分析。【结果】17株分离株中除HNGS201和HNLC503的Meq基因扩增产物较预期稍大外,其余15个的片段长度为1 020bp,与预期长度相符;MDV河南分离株之间及其与参考毒株Meq基因的核苷酸同源性为99.0%～100%,部分毒株Meq基因的氨基酸序列有10个位点的氨基酸存在规律性突变;MDV河南分离株和参考株共组成3个进化分支,其中强毒株GA、RB1B和648A位于一个分支,分离株HNGS201、HNLH304、HNLC503与mMDV毒株CVI988和814位于同一分支,其余14株分离株位于另一个较大的分支。【结论】河南省可能流行着不同毒力的MDV,一些mMDV毒株的Meq蛋白存在59个或60个氨基酸的插入。
- 余祖华滕蔓丁轲闵亚杰禹乐乐宿靖伟程相朝罗俊
- 关键词：马立克氏病病毒MEQ基因克隆
- 马立克病病毒与禽网状内皮增生病病毒的混合感染及在传代过程中的重组被引量：3
- 2016年
- 旨在了解国内鸡群马立克病病毒(MDV)和禽网状内皮增生病病毒(REV)的混合感染及自然重组状况,探讨两种病原的基因重组对MDV病原学特性的潜在影响及危害。利用PCR扩增、序列测定及间接免疫荧光试验(IFA),对来自河南商品蛋鸡群的17个MDV分离株进行研究。结果表明,其中两个毒株HNGS206和HNXZ103的病毒基因组中存在REV—LTR的重组插入。进一步的IFA结果显示,HNGS206和HNXZ103并非MDV与REV的自然重组流行毒株,这两个毒株基因组中LTR的插入发生于临床病例鸡混合感染后的病毒分离及传代培养过程中。结果提示,虽然目前国内鸡群中MDV和REV的混合感染较为普遍,但MDV与REV自然重组毒株的流行状况仍需要进一步的流行病学监测。
- 宿靖伟滕蔓罗俊迟佳琦余祖华禹乐乐胡博张改平
- 关键词：马立克病病毒禽网状内皮增生病病毒流行病学基因重组
- 马立克氏病病毒编码的miR-M12-5p对鸡HVCN1基因表达的靶向调控被引量：5
- 2016年
- 为研究miR-M12-5p在马立克氏病病毒(Marek’s disease virus,MDV)感染过程中的调控作用,利用生物信息学方法对其候选靶基因进行预测分析,发现4个miR-M12-5p的结合靶点。体外双荧光素酶报告试验结果表明,miR-M12-5p可结合宿主鸡的氢离子电压门控通道1(HVCN1)基因mRNA的3'-UTR相应位点并发生特异性相互作用。实时荧光定量PCR分析进一步证实,miR-M12-5p能够在体内下调HVCN1基因的表达水平。上述结果表明,miR-M12-5p可以靶向调控宿主基因HVCN1的表达。
- 李会珍滕蔓党露冯丽丽马圣明赵朴罗俊张改平
- 关键词：马立克氏病病毒靶基因
- 马立克病病毒超强毒株GX0101感染宿主部分病毒基因表达水平及致病阶段分析被引量：3
- 2016年
- 旨在探讨马立克病病毒（MDV）超强毒株GX0101对宿主的感染过程及致病阶段,即＂Cornell模型＂,为进一步使用该毒株研究MDV的致病或致瘤机制奠定基础。用GX0101接种1日龄SPF鸡,建立了感染宿主的动物模型;然后用RT-qPCR分析10个具有代表性的MDV蛋白编码基因在感染不同时间点的动态基因转录水平。结果显示,GX0101感染发病鸡的临床症状及剖检病变与典型的马立克病一致;MDV编码的结构蛋白基因gB、gE和UL6、非结构蛋白基因UL42和UL52、立早期基因ICP4、水平传播相关基因UL13以及磷酸化蛋白基因pp38具有相似的转录水平和趋势,均在GX0101感染后7d上升至第一个峰值,10d降至低谷,14d又逐渐升高并在21d达到第二个峰值,30~60d逐渐下降并处于较低的转录水平;MDV编码的原癌基因meq和毒力相关基因RLORF6在GX0101感染7d即持续升高,并在14~60d的试验周期内较长时间处于高转录水平。结合作者此前研究及本文结果分析,GX0101感染宿主的＂Cornell模型＂：早期增殖性-限制性感染期为1~7d,潜伏感染期约为10d前后,晚期溶细胞性感染及免疫抑制期发生于14~21d,而T细胞转化及淋巴瘤形成阶段可能在14d前后就已经开始。
- 马圣明滕蔓余祖华党露李会珍丁轲邓瑞广罗俊
- 关键词：马立克病病毒超强毒株实时荧光定量PCR
- 河南土鸡群马立克病病毒流行毒株的分离鉴定及分子进化分析被引量：5
- 2018年
- 本研究旨在分离鉴定河南鸡群马立克病病毒（Marek’s disease virus，MDv）流行毒株，了解当前MDV分子进化特征并为鸡马立克病（MD）的有效防控提供参考。根据MDV基因组设计了meq、gE、gI、gB、pp38以及132～bp重复序列基因的特异性引物，应用PCR扩增和DNA测序分析对河南焦作土鸡群8份MD疑似病例进行了确诊，并通过鸡胚成纤维细胞（CEF）盲传培养和间接免疫荧光试验（IFA）分离鉴定了3个流行毒株，分别命名为HNJZ101、HNJZ102和HNJZ103。结果显示，3个MDV分离株均为血清1型（MDV1）毒株，未发生禽网状内皮增生症病毒（REV）共感染，并且132-bp重复序列基因均为双拷贝。meq、gE和gI基因核苷酸序列比对分析发现，临床病例样本及3个MDV新分离株的meq基因与国内外温和毒或疫苗毒株的meq基因核苷酸序列同源性仅为64．7％～78．8％，但与MDV强毒株的同源性高达98．9％～100．0％；gE和gJ基因的核苷酸序列同源性均较高，分别为99．1％～99．9％和99．3％～100．0％。系统发生树分析结果表明，HNJZ101、HNJZ102和HNJZ103与绝大多数此前分离的河南毒株及国内MDV强毒株同处于一个大的进化分支。研究结果表明，3个分离株HNJZ101、HNJZ102和HNJZ103很可能是当前河南土鸡群中流行的致病性MDV—1毒株，其确切的致病型及导致免疫失败的原因仍有待进一步深入研究。
- 马圣明滕蔓李会珍党露党露郅玉宝郅玉宝邓瑞广
- 关键词：马立克病病毒病毒分离MEQ进化分析
- miR-M7-5p靶向调控马立克病病毒原癌基因meq的表达被引量：1
- 2014年
- 马立克病病毒(MDV)基因组编码数十个miRNA,并且可能在MDV的感染及致病过程中发挥重要作用。此前研究发现,MDV-1编码的miR-M7-5p在病毒感染宿主发病的过程中具有高水平表达特征,为探讨miR-M7-5p对MDV可能具有的自我调控作用,利用生物信息学方法对MDV编码的蛋白基因进行了扫描分析,预测发现了10个潜在的miR-M7-5p结合靶点,其中包括MDV的原癌基因meq。双荧光报告试验表明miR-M7-5p与meq基因的3′-UTR在体外能够相互作用,qRT-PCR进一步证实miR-M7-5p在体内能够下调meq基因mRNA的转录。结果表明,miR-M7-5p能够自我调控病毒原癌基因meq的表达,在MDV致瘤过程中可能发挥重要作用。
- 赵朴滕蔓罗俊迟佳琦宿靖伟党露邓瑞广张改平
- 关键词：马立克病病毒MICRORNA自我调控原癌基因MEQ
- 河南鸡群马立克氏病病毒流行毒株的分子进化分析被引量：2
- 2015年
- 为了解鸡马立克氏病病毒流行毒株的分子特征，对2012－2014年河南省发病鸡群的临床病料进行了采集，并对MDV 132 bp重复序列进行了PCR扩增，同时对meq、gE、gI基因进行了克隆和序列测定。结果表明，9份病料中均可扩增出与132 bp双拷贝大小相符的PCR主产物；meq、gE、gI基因的核苷酸序列同源性与国内外参考毒株相比，分别为98．5％～100％，98．8％～100％和98．0％～100％；基于这些基因构建的系统发生树的分析结果表明，与美国、澳大利亚、日本以及印度的MDV分离株相比，目前，河南省鸡群中流行的MDV与此前分离的河南流行株进化关系较近，并且与其他国内分离株共同形成一个较大的独立进化分支。
- 宿靖伟罗俊王新卫迟佳琦禹乐乐党露赵朴滕蔓张改平
- 关键词：马立克氏病病毒MEQGI进化分析
