广州市科技计划项目(2008A1-E4151)
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
- 相关作者：陈嘉昌朱振宇彭焕玉王侦李明更多>>
- 相关机构：中山大学附属第三医院中山大学南方医科大学更多>>
- 发文基金：广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- PS-TaqMan PCR检测巯基嘌呤甲基转移酶基因多态性被引量：2
- 2010年
- 目的为临床开展巯基嘌呤类药物的个体化用药需要,发展一种适合临床实验室检测TPMT的基因多态性的方法。方法改进TaqMan错配扩增突变检测法(TaqMAMA),建立引物特异性TaqMan聚合酶链反应(PS-TaqManPCR),检测245例临床样本的TPMT*3C突变,结果用双向测序方法验证。结果 PS-TaqManPCR能够准确检测TPMT*3C突变,TMPT*1/*3C基因型频率是2.4%。结论成功发展PS-TaqManPCR作为临床检测TPMT基因多态性的方法 ,该方法可靠、高通量且效率高,适合临床实验室对样本大规模检测的需要。
- 邱耕符蓉王莹陈嘉昌何蕴韶
- 关键词：巯基嘌呤甲基转移酶单核苷酸多态性实时荧光定量PCR
- MS-HRM检测游离甲基化SEPT9在结直肠癌早期诊断中的应用被引量：6
- 2012年
- 目的建立一种稳定的甲基化敏感高分辨率熔解曲线(MS-HRM)定量检测血浆游离甲基化SEPT9的方法,并初步探讨利用此方法进行结直肠癌早期诊断的可行性。方法按照不同比例混合甲基化和未甲基化DNA建立标准品,复管反应作出标准熔解曲线,定量检测36例结直肠癌患者血浆样本和20例正常人血浆样本甲基化SEPT9,并与Methylight进行比较。梯度稀释其中1例结直肠癌血浆游离DNA,分析其甲基化程度与DNA量是否独立。随机取2例结直肠癌样本重复甲基化修饰至MS-HRM分析,以排除修饰不完全对实验结果的影响。结果 SEPT9 MS-HRM法可检出混合甲样本中1%的甲基化,其检测灵敏度达1%。36例结直肠癌患者血浆中检测到25例(69.44%)有不同程度SEPT9基因甲基化,20例正常人血浆样本有2例(10%)呈现1%～5%甲基化。不同DNA量甲基化程度恒定,初步确定检测范围可达皮克级DNA。2例独立重复检测样本检测结果基本符合初次实验结果。结论 MS-HRM法检测游离的甲基化SEPT9简单易行,快速,稳定,敏感性高,检测样本范围广,有望为结直肠癌筛查开拓一个新平台。
- 王侦陈嘉昌何琼彭焕玉朱振宇陈华云李明
- 关键词：结直肠癌甲基化高分辨率熔解曲线
