国家教育部博士点基金(20124601110004)
- 作品数：3 被引量：4H指数：2
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- 相关机构：海南大学漯河市农业科学院教育部更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
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- 转hpa5Xm烟草的获得及其对TMV抗病性分析
- 从棉花角斑病菌(Xanthomonas citri subsp.malvacearum)中克隆并鉴定出的hpa Xm是一类新的harpin蛋白,本研究首次将来自棉花角斑病菌的hpa Xm基因采用农杆菌介导法导入模式生物三...
- 李乐刘悦谢琳琳刘文波林春花郑服丛缪卫国
- 关键词：转基因烟草TMV抗性
- 文献传递
- 棉花角斑病菌遗传驯化体系的建立被引量：2
- 2016年
- Xanthmonas citri subsp.malvacearum（Xcm）是棉花角斑病的病原,由于缺乏适合的遗传驯化体系,难于对其特定的基因进行研究,所以建立高效的基因缺失突变系统,是迫切需要解决的问题。采用去甲基化氮胞苷（5-AZA）驯化野生菌株Xcm 8号小种菌株V8和V8无细胞胞外物（CFEs）驯化重组质粒p K18mobsac B：：N1012及p K18mobsac B：：m762这2种驯化方法,以来自V8的hpa Xm N和hpa Xm为靶基因验证其有效性。结果表明,成功获得了△hpa Xm N和△hpa Xm突变体;虽然2种驯化方式都能获得转化子,但驯化菌株的电转化效率是驯化质粒的10~100倍。遗传驯化体系的建立消除了Xcm V8由于限制修饰系统引起的转化障碍,实现了特定基因的定点突变,为后续获得Xcm V8其他基因缺失突变体奠定了基础。
- 王清梁鹏李响刘文波林春花郑服丛缪卫国
- 关键词：V8驯化定点突变
- hpaXm和hpaXm-IP基因对棉花角斑病菌V8表型及HR的影响
- 2020年
- 试验前期通过构建相应敲除载体,采用电转化的方法,分别获得Xanthmonas.citri subsp.malvacearum(简称Xcm)菌株的hpaXm基因缺失突变菌株V8ΔhpaXm和hpaXm-IP基因缺失突变菌株V8ΔhpaXm-IP。通过特殊生长平板及烟草接种试验表明,与V8菌株相比,突变菌株胞外多糖产量以及胞外纤维素酶、脂酶活性不变,V8ΔhpaXm菌株的胞外淀粉酶活性显著降低;3种菌株都不能产生胞外蛋白酶;突变菌株在烟草上形成的坏死斑面积变小。表明hpaXm和hpaXm-IP基因与病菌胞外淀粉酶活性及病菌激发烟草过敏反应的能力有关,与胞外多糖、纤维素酶、蛋白酶和脂酶产生无关。同时预示了hpaXm-IP可能具有牵引HpaXm蛋白泌出的能力,且HpaXm蛋白不是V8菌株中唯一激发烟草HR的活性物质,hpaXm及hpaXm-IP可能会影响V8菌株的致病性,但不是必然的。
- 王清张勇跃孟凡奇刘志坚缪卫国
- 关键词：细菌病害表型胞外酶
- 2种harpin内源表达对短短芽孢杆菌HAB-5菌株抑制和促生能力的影响被引量：2
- 2015年
- 采用化学方法分别将来自水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae)、棉花角斑病菌(X.citri subsp.malvacearum)hrp基因簇中的hpa1_(Xoo)、hpa_(Xm)基因转化至生防菌短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevs)HAB-5菌株,测定2种harpin蛋白对短短芽孢杆菌抑菌和促生能力的影响,以期获得更高效的生防菌株。结果表明,获得转入hpa1_(Xoo)的突变体581个,转入hpa_(Xm)的突变体有650个;经PCR及PCR Southern Blot验证,确定hpa1_(Xoo)、hpa_(Xm)基因均成功转化至HAB-5菌株中;经SDS-PAGE电泳,在分子量大小约39、41 ku处可见明显条带,表明hpa1_(Xoo)、hpa_(Xm)基因分别编码的融合蛋白GST-harpin Xoo、GST-harpin Xm在突变体菌株中得到表达;与出发菌株HAB-5菌株相比,转化后的突变体在菌落形态、拮抗活性上均发生了改变,且突变体总蛋白可在烟草叶片上激发过敏性反应,而HAB-5菌株总蛋白不能激发过敏性反应;突变体菌株对番茄种子的促生作用显著提高,且转入hpa_(Xm)基因的菌株效果更佳,使胚芽、胚根的生长分别提高100.77%、69.14%。可见,harpin能够在短短芽孢杆菌HAB-5菌株中得到表达,且转化后的突变体表现出良好的促生效果。
- 汪惠谢琳琳刘文波林春花缪卫国郑服丛
- 关键词：过敏性反应
- HarpinXoo-induced hypersensitive response shares the characteristics of programmed cell death and alters the expression of programmed cell death-related genes in tobacco
- Harpin proteins encoded by hrp genes are bacterial protein elicitors that can stimulate hypersensitive respons...
- 谢琳琳LIU YueWANG HuiLIU Wen-boDI Rong缪卫国郑服丛
- 关键词：HARPINHRPCDTOBACCO
- 文献传递
