北京市自然科学基金(7012021)
- 作品数：13 被引量：130H指数：5
- 相关作者：杜军保唐朝枢田宏赵卫红斯琴更多>>
- 相关机构：北京大学第一医院中国医学科学院北京协和医学院北京大学更多>>
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- 缺氧时肺动脉平滑肌细胞血红素氧合酶/一氧化碳系统的变化及其对Ⅰ型胶原的影响被引量：9
- 2003年
- 目的 :研究缺氧时大鼠肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)诱导型血红素氧合酶 (HO 1 ) /一氧化碳 (CO)系统的变化及其对胶原合成的影响 ,探讨血红素氧合酶 /一氧化碳 (HO/CO)系统对缺氧性肺血管重建中胶原代谢的作用及其机制。方法 :原代培养的大鼠PASMC ,用分光光度计检测PASMC培养液中CO相对含量的变化 ,Westernblot检测PASMCHO 1和转化生长因子 β3 (TGF β3 )表达的变化 ,用免疫细胞化学法分别观察PASMCHO 1、TGF β3 、Ⅰ型胶原蛋白表达的变化 ,原位杂交法检测Ⅰ型前胶原mRNA表达的变化。结果 :缺氧 2 4h诱导PASMC表达TGF β3 、Ⅰ型胶原蛋白和mRNA ,与对照组比较缺氧使HO 1蛋白表达增加 6 7.4 5 % (P <0 .0 1 )、CO含量增加35 .4 1 % (P <0 .0 5 )。ZnPP(HO 1抑制剂 )使缺氧 2 4h大鼠PASMC的CO含量降低 7.88% (P <0 .0 1 )、HO 1蛋白表达减少 2 3.9% (P <0 .0 5 )、TGF β3 蛋白表达增高 393% (P <0 .0 1 )、Ⅰ型胶原蛋白和mRNA表达均增加。Hemin(HO 1诱导剂 )使缺氧 2 4h大鼠PASMC的CO含量增加 8.83% (P <0 .0 1 )、HO 1表达增高 1 0 5 % (P <0 .0 5 )、TGF β3 蛋白表达降低 6 8.1 2 % (P <0 .0 1 ) ,Ⅰ型胶原蛋白和mRNA表达均减少。结论 :缺氧刺激下大鼠PASMCHO/CO系统上调 ,内源性CO能够抑制Ⅰ型胶原?
- 宫丽敏杜军保赵卫红田宏唐朝枢
- 关键词：缺氧肺动脉一氧化碳
- 内源性一氧化碳对低氧大鼠肺动脉胶原代谢的影响被引量：1
- 2003年
- 探讨内源性一氧化碳 (CO)对低氧大鼠肺动脉胶原代谢的作用及其机制。采用常压低氧大鼠肺动脉高压模型 ,观察血红素加氧酶 (HO)抑制剂锌原卟啉 9(ZnPP 9)对肺动脉平均压 (PAMP)和肺组织匀浆碳氧血红蛋白 (Hb CO)含量的影响 ,并用免疫组织化学和核酸原位杂交法分别观察Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达和肺动脉Ⅲ型前胶原[Proα1 (Ⅲ )胶原 ]mRNA、间质性胶原酶 (MMP 1)mRNA、金属蛋白酶组织抑制因子 1(TIMP)mRNA表达的变化。结果发现ZnPP 9使低氧大鼠PAMP明显升高 ,肺组织匀浆CO含量明显降低 ;ZnPP 9显著促进低氧大鼠肺动脉Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达 (P <0 0 1)和Proα1 (Ⅲ )胶原mRNA表达及MMP 1mRNA与TIMP 1mRNA表达 (P <0 0 1)。内源性CO可能通过抑制胶原蛋白的合成对低氧大鼠肺动脉胶原代谢发挥重要的调节作用。
- 宫丽敏杜军保石云郭志良唐朝枢
- 关键词：内源性一氧化碳低氧胶原代谢肺动脉高压
- 尾加压素对常氧及低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞周期的影响被引量：5
- 2003年
- 目的 :观察新近发现的缩血管活性肽人类尾加压素Ⅱ(humanurotensinⅡ ,hUII)对体外培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞 (PASMCs)周期的影响。方法 :体外培养大鼠肺动脉平滑肌细胞 ,加入不同浓度 (mol/L)的hUII(1 0 - 7、1 0 - 8、1 0 - 9) ,在常氧及低氧条件下孵育 1 2h,用流式细胞术碘化丙啶染色法 ,分析PASMCsDNA直方图细胞周期时项、细胞增殖指数及凋亡亚二倍体峰的改变 ,以初步观察hUII对PASMCs增殖与凋亡的影响。结果 :hUII呈浓度依赖方式促进PASMCs的增殖 ,主要表现为细胞周期S期的百分比增加 ,细胞增殖指数 (PI)增高 ,常氧作用比低氧作用更明显。hUII浓度 (mol/L)为 1 0 - 7、1 0 - 8、1 0 - 9时 ,与PASMCs常氧作用 1 2h,PI分别比对照组增加了的 1 75 %、1 35 %、1 1 8% ;低氧作用 1 2h ,PASMCsPI分别是对照组的 1 35 %、1 1 8%、1 0 3 % ,hUII浓度为 1 0 - 7mol/L时作用最明显。同时DNA直方图分析各浓度范围的hUII均未见PASMCs凋亡亚二倍体峰出现。结论 :hUII以剂量依赖方式刺激常氧及低氧PASMCsS期DNA合成速率 ,使PI增高 。
- 田宏杜军保张宝红赵卫红唐朝枢
- 关键词：肺动脉平滑肌细胞细胞周期
- 内源性一氧化碳对低氧大鼠肺动脉转化生长因子-β_3和Ⅰ型胶原表达的影响
- 2003年
- 目的 :探讨内源性一氧化碳 (CO)对低氧大鼠肺动脉胶原代谢的作用及其机制。方法 :采用常压低氧大鼠肺动脉高压模型 ,观察血红素氧合酶 (HO)抑制剂锌原卟啉 -Ⅸ (ZnPP -Ⅸ )对肺动脉平均压 (PAMP)和肺组织匀浆碳氧血红蛋白 (HbCO)含量的影响 ,并用免疫组织化学和核酸原位杂交法分别观察ZnPP -Ⅸ对肺动脉转化生长因子 - β3 (TGF - β3 )、Ⅰ型胶原蛋白的表达和肺动脉TGF - β3 mRNA、Ⅰ型前胶原mRNA和金属蛋白酶组织抑制因子 (TIMP - 1)mRNA表达的影响。结果 :ZnPP -Ⅸ使低氧大鼠PAMP明显升高 ,肺组织匀浆CO含量明显降低 ;ZnPP -Ⅸ能促进TGF - β3 蛋白表达和TGF - β3 mRNA表达 ,显著促进低氧大鼠肺动脉Ⅰ型胶原蛋白表达和Ⅰ型前胶原mRNA表达 ,上调TIMP - 1mRNA的表达。结论 :内源性CO可能通过抑制TGF - β3mRNA和TGF - β3 蛋白表达而抑制胶原蛋白的合成 ,促进胶原的降解 ,从而对低氧大鼠肺动脉胶原代谢发挥重要的调节作用。
- 宫丽敏杜军保石云唐朝枢
- 关键词：一氧化碳缺氧大鼠转化生长因子Β慢性缺氧性肺动脉高压
- 硫化氢对低氧性肺动脉高压调节作用的研究被引量：57
- 2003年
- 目的 研究硫化氢对低氧性肺动脉高压 (HPH)的调节作用。方法 Wistar大鼠随机分为对照组(n =8)、低氧组 (n =5 )、低氧 +NaHS组 (n =7)。低氧处理采用常压低氧方法 ,控制氧浓度在 (10± 0 .5 ) % ,每天 6h ,共持续 2 1d。低氧 +NaHS组每天低氧前腹腔注射NaHS 14μmol/kg。采用右心导管法测定肺动脉压 ,称量右心室游离壁和左室 +室间隔的湿重比值作为右心室肥厚指标。结果 低氧组大鼠经 3周低氧后形成明显肺动脉高压 (PH) ,伴右心室肥厚。与低氧组相比 ,低氧 +NaHS组大鼠的肺动脉压显著降低 ,右心室肥厚程度明显减轻。
- 张春雨杜军保闫辉斯琴唐朝枢
- 关键词：硫化氢低氧肺动脉高压
- 一氧化氮前体物逆转肺动脉胶原堆积的研究被引量：1
- 2003年
- 目的 :研究一氧化氮前体L -精氨酸 (L -Arg)对高肺血流量所致肺动脉高压大鼠肺动脉胶原代谢的干预作用及其机制。方法 :在大鼠行腹主动脉 -下腔静脉分流造成的肺动脉高压模型基础上 ,给予L -Arg灌胃 ,11wk后 ,采用免疫组织化学法检测大鼠肺动脉Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果 :分流组大鼠肺中、小型肺动脉中Ⅰ、Ⅲ型胶原表达与对照组比较明显增加 (P<0 01) ;分流 +L -Arg 组大鼠肺中、小型肺动脉中Ⅰ、Ⅲ型胶原表达较分流组明显降低 (P<0 01)。结论 :L -Arg 对高肺血流量所致胶原堆积具有重要的逆转作用。
- 魏冰丛柏林杜军保
- 关键词：一氧化氮L-精氨酸胶原
- 低氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞血红素加氧酶-1 mRNA表达及细胞增殖的影响被引量：2
- 2002年
- 探讨血红素加氧酶 1(HO 1)mRNA在低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)的表达及HO 1/一氧化碳 (HO 1/CO)体系对PASMC增殖的影响。应用荧光定量RT PCR法测定HO 1mRNA表达。用双波长法检测碳氧血红蛋白(HbCO)吸光值。应用免疫细胞化学方法检测细胞增殖核抗原 (PCNA)及核转录因子 κB (NF κB)的表达。发现HO 1mRNA在常氧大鼠PASMC有低水平的表达 ,低氧 12hHO 1mRNA水平是常氧时的 1 5倍 ,且HbCO产量随之显著增高 (P <0 0 1) ;低氧 2 4hHO 1mRNA表达呈回落趋势 ,HbCO产量亦有所减少 ,但两者仍高于常氧水平。低氧 12h及 2 4hPASMCPCNA核阳性反应颗粒表达较常氧时增强 (P <0 0 1,P <0 0 0 1) ,使用HO抑制剂ZnPP 9,其PCNA核阳性反应颗粒表达较单纯低氧时增加更多 (P <0 0 0 1,P <0 0 1)。低氧组核NF кB阳性染色较常氧组增强 (P <0 0 0 1) ,使用ZnPP 9,其表达则比低氧时更多 (P <0 0 1)。低氧通过诱导大鼠PASMC的HO 1mRNA基因表达 ,上调HO/CO体系活性 ,使内源性CO含量增高 ,抑制PASMC增殖 ;NF кB参与了PASMC增殖的调控机制。
- 田宏杜军保赵卫红卜定芳魏冰陈晓波唐朝枢
- 关键词：一氧化碳低氧肺动脉平滑肌细胞
- 一氧化碳/血红素氧合酶系统对缺氧性肺动脉高压肺血管结构重建的作用机制被引量：12
- 2003年
- 石琳杜军保曾和平
- 关键词：肺动脉高压缺氧一氧化碳
- 低氧性肺动脉高压大鼠肺组织硫化氢的变化被引量：24
- 2004年
- 本文旨在探讨低氧对大鼠内源性硫化氢体系的变化。采用生化反应方法测定血浆中硫化氢的含量和肺组织中硫化氢合酶的活性 ,采用定量竞争性RT PCR的方法检测肺组织中胱硫醚 γ 裂解酶 (CSE)mRNA的含量。结果显示 ,与对照组相比 ,低氧组大鼠的血浆硫化氢含量明显减少 [(1 92 2± 2 2 1 ) μmol Lvs (30 1 6± 32 4 ) μmol L ,P <0 0 1 ) ],肺组织中硫化氢合酶的活性明显下降 [(0 1 2 7± 0 0 2 3)vs (0 2 78± 0 0 99)nmol mgwettissue·min ,P <0 0 1 ],CSEmR NA的含量明显减少 [(1 0 2± 0 1 5 )× 1 0 - 6 fmolvs (2 1 7± 0 2 2 )× 1 0 - 6 fmol,P <0 0 1 ]。以上研究表明 。
- 张春雨杜军保卜定方闫辉斯琴唐朝枢
- 关键词：低氧肺动脉高压肺组织硫化氢
- 内源性硫化氢在大鼠低氧性肺动脉高压中的作用被引量：24
- 2003年
- 目的 :观察低氧性肺动脉高压 (HPH)时 ,内源性硫化氢生成的变化以及应用外源性硫化氢处理对HPH的影响 ,探讨气体分子硫化氢在HPH发病中的作用。方法 :Wistar大鼠随机分为对照组 (n =6 )、低氧组 (n =7)和低氧 +NaHS组 (n =6 )。低氧处理采用吸入氧浓度为 10 % (体积分数 )的气体 ,每天低氧 6h ,共持续 3周。低氧 +NaHS组大鼠每天低氧前腹腔注射NaHS (0 78mg·kg-1)。低氧结束后用右心导管法测定肺动脉压 ,测定右心室 /(左心室 +室间隔 ) [RV/ (LV +SP) ]比值 ,弹力纤维染色观察肺小动脉显微结构改变 ,透射电镜观察肺小动脉超微结构 ,酶促反应法测定肺动脉和肺组织中硫化氢合酶活性 ,定量RT PCR方法测定肺组织中胱硫醚 γ 裂解酶(CSE)基因表达水平。结果 :与对照组相比 ,低氧组大鼠平均肺动脉压升高 4 5 .6 % (P <0 .0 1) ,RV/ (LV +SP)比值增加 4 1% (P <0 .0 1) ;光镜下肺小动脉相对中膜厚度 (RMT)和相对中膜面积 (RMA)分别增加 4 1%和 39% (P <0 .0 1) ;电镜下肺小动脉内皮细胞增生 ,平滑肌细胞呈合成表型改变 ;硫化氢合酶活性在肺动脉和肺组织中分别降低 5 2 %和 5 4 % (P <0 .0 1) ,而且与平均肺动脉压均呈明显负相关 ;肺组织中硫化氢合酶基因表达水平下调 5 3%(P <0 .0 1)。与低氧组相比 ,低氧
- 张春雨杜军保卜定方闫辉汤秀英斯琴唐朝枢
- 关键词：内源性硫化氢低氧肺动脉高压
