陕西省国际科技合作计划(2007-kw-06)
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 相关作者：李冬民吕社民任娟王飞苗张富军更多>>
- 相关机构：西安交通大学更多>>
- 发文基金：陕西省自然科学基金国家自然科学基金陕西省国际科技合作计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 核受体免疫组织化学染色时抗原修复方法的选择被引量：5
- 2010年
- 目的探讨不同抗原修复法对DA.1U大鼠肝组织内核受体检测结果的影响。方法应用微波修复法、高压修复法、酶修复法和高压加酶修复法对DA.1U大鼠肝组织切片进行修复,然后进行免疫组化染色。结果DA.1U大鼠肝组织内核受体LXR-α、LXR-β、PPAR-γ和FXR经高压抗原修复后,染色阳性强度较其他修复方法明显增强,而且定位较佳。结论在核受体免疫组化染色中高压抗原修复法染色效果优于其他抗原修复法。
- 张富军任娟王飞苗吕社民李冬民
- 关键词：核受体免疫组织化学抗原修复
- 组蛋白去乙酰化酶3真核表达载体的构建和鉴定
- 2011年
- 目的利用pEGFP-N1真核表达载体构建组蛋白去乙酰化酶3真核表达载体pEGFP-Hdac3,并鉴定其在大鼠肝癌细胞系CBRH-7919中的表达。方法利用大鼠肝脏cDNA为模板,聚合酶链反应(PCR)获取目的基因Hdac3;用HindⅢ、BamH I双酶切真核表达载体pEGFP-N1和目的基因Hdac3,用T4 DNA连接酶连接纯化后的酶切产物;连接产物转化DH5α大肠杆菌感受态细胞并挑选阳性克隆,并通过PCR、双酶切、DNA测序鉴定构建的重组质粒。利用测序正确的重组体转染CBRH-7919细胞,检测Hdac3和PPAR-γ的mRNA表达。结果利用基因克隆技术获得组蛋白去乙酰化酶3的真核表达载体pEGFP-Hdac3重组质粒。PCR,双酶切,DNA测序证实目的基因H-dac3已成功插入pEGFP载体中。用重组质粒转染大鼠肝癌细胞系CBRH-7919后Hdac3 mRNA表达显著升高、而PPAR-γmRNA表达明显降低。结论本研究成功构建了蛋白去乙酰化酶3的真核表达载体pEGFP-Hdac3。
- 王璇任娟张伯翔于涛蓝茜李玥吕社民李冬民
- 关键词：组蛋白脱乙酰基酶类
