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国家自然科学基金(31000632)

作品数：1 被引量：6H指数：1
相关作者：张永泽张洁段相林樊玉梅更多>>
相关机构：河北师范大学更多>>
发文基金：中国博士后科学基金博士科研启动基金国家自然科学基金更多>>
相关领域：生物学更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇印迹
  • 1篇真核
  • 1篇真核表达
  • 1篇铁蛋白
  • 1篇轻链
  • 1篇免疫
  • 1篇免疫印迹
  • 1篇克隆
  • 1篇核表达
  • 1篇分子
  • 1篇分子克隆
  • 1篇PCDNA3

机构

  • 1篇河北师范大学

作者

  • 1篇樊玉梅
  • 1篇段相林
  • 1篇张洁
  • 1篇张永泽

传媒

  • 1篇生物技术

年份

  • 1篇2014
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
铁蛋白轻链真核表达载体的构建被引量：6
2014年
目的:为进一步研究铁蛋白轻链(ferritin light chain,FTL)的表达对细胞内信号转导途径的影响提供平台。方法:利用PCR扩增技术得到小鼠552 bp的FTL基因编码序列,并在基因的C端引入Flag标签,将此序列插入到真核表达载体pcDNA3多克隆位点区域中限制性内切酶HindⅢ和BamHⅠ之间,得到带有Flag标签的FTL基因的真核表达载体pcDNA3-FTL-Flag。分别经酶切和测序鉴定。用脂质体lipofectamineTM2000将构建成功的pcDNA3-FTL-Flag及其对照空载体pcDNA3分别转染到RAW264.7细胞中,提取蛋白后利用Western blot方法检测细胞中带有Flag标签的FTL蛋白表达。结果:重组质粒酶切鉴定得到预期片段,测序结果显示所构建的小鼠FTL基因的cDNA序列正确,并在细胞内检测到分子量约为21kDa的蛋白的强烈表达信号。结论:实验成功构建小鼠FTL基因的真核表达载体pcDNA3-FTL-Flag。
张洁张永泽柳彩芝段相林樊玉梅
关键词：PCDNA3分子克隆免疫印迹
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