国家自然科学基金(10075001)
- 作品数：4 被引量：23H指数：3
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- 脉冲电泳技术介导玉米转基因研究被引量：9
- 2003年
- 本研究采用脉冲电泳技术进行外源基因转化玉米种胚并直接成苗,分析了不同参数对种子出苗率的影响,通过除草剂抗性初步筛选,再进行PCR检测,结果表明不同电泳时间对种子出苗率影响显著,外源DNA浓度对种子出苗率影响不显著,确定了除草剂对玉米幼苗(3～4叶期)适宜筛选浓度为50μg/ml,T0代植株除草剂处理存活率与外源基因导入率呈显著相关(r=0.9623),且与外源DNA浓度呈二次曲线关系,近似于正态分布,外源质粒DNA浓度为300μg/ml时,外源基因导入率达最大值,为11.36%。
- 董琼珠程备久朱苏文李培金
- 关键词：脉冲电泳转基因玉米种子
- 脉冲电泳不同参数对介导GFP基因转化玉米种胚效果的研究
- 2005年
- 利用脉冲电泳介导绿色荧光蛋白(GFP)基因导入玉米种胚;以GFP基因在种胚中瞬时表达作为外源基因导入种胚细胞的标记,分析了外源DNA浓度、电泳时间、电压、电流转换时间等脉冲电泳转化参数对种胚发芽率和外源基因导入率的影响。结果表明:脉冲电泳时间对种胚发芽率和外源GFP基因导入率影响最大;通过脉冲电泳可将外源基因导入胚芽细胞,其GFP基因导入种子的频率与各电泳参数均呈二次曲线关系,300μg ml外源DNA浓度、120min电泳时间、5V电压、2s电流转换时间可作为脉冲电泳介导玉米种胚转化较适宜的参数。
- 朱苏文丁勇邓云龙
- 关键词：GFP基因转基因
- 转基因玉米的脉冲电泳技术检测及遗传分析被引量：5
- 2006年
- 采用脉冲电泳技术将外源Bar基因和B.t基因转化玉米种胚并直接成苗,对T0代、T1代经除草剂筛选的抗性植株进行PCR检测。结果表明,T1代转基因植株频率明显低于T0代PCR阳性植株率,T0代植株的PCR阳性率与T1代转基因植株频率呈显著正相关(r=0.9874)。T1代表现为PCR阳性的植株Southern杂交结果显示脉冲电泳法介导的外源基因在受体中多为单拷贝,且能从T1代遗传到T2代,外源基因在T2代呈典型的孟德尔分离方式。
- 董琼珠程备久朱苏文
- 关键词：玉米种子脉冲电泳转基因
- 利用脉冲电泳技术转化玉米获得转基因植株的研究被引量：11
- 2004年
- 本研究采用脉冲电泳技术将外源Bar基因和B.t基因转化玉米种胚并直接成苗,通过除草剂抗性初步筛选,再进行PCR检测、Southern杂交验证,探讨了脉冲电泳介导外源基因直接转化玉米种胚的有效性,结果表明:脉冲电泳技术介导玉米转基因是有效可行的,其T0代植株PCR阳性率与T1代植株转化率分别为11.36%和1.04%。在外源基因的转化中,处于不同启动子下的B.t基因和Bar基因共转化频率为90.9%。T1代PCR表现为阳性的植株Southern杂交结果显示脉冲电泳法介导的外源基因在受体中多为单拷贝,且已遗传给后代,并获得稳定表达。
- 董琼珠蔡丽琼朱苏文李培金程备久
- 关键词：脉冲电泳玉米种子BAR基因
