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安徽省科技攻关计划(06013063A)

作品数：5 被引量：41H指数：3
相关作者：宋礼华范清林魏伟徐丙发夏毅更多>>
相关机构：安徽省生物医学研究所安徽安科生物工程(集团)股份有限公司安徽医科大学更多>>
发文基金：安徽省科技攻关计划更多>>
相关领域：生物学医药卫生更多>>

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 3篇生物学
  • 2篇医药卫生

主题

  • 3篇干扰素
  • 2篇病毒
  • 1篇蛋白
  • 1篇信号
  • 1篇信号转导
  • 1篇乙肝
  • 1篇乙肝病毒
  • 1篇热稳定
  • 1篇热稳定性
  • 1篇转导
  • 1篇酶切
  • 1篇酵母
  • 1篇接头
  • 1篇抗肝炎
  • 1篇干扰素-Α
  • 1篇肝病
  • 1篇肝炎
  • 1篇白蛋白
  • 1篇毕赤酵母
  • 1篇OAS

机构

  • 3篇安徽医科大学
  • 3篇安徽大学
  • 3篇安徽安科生物...
  • 3篇安徽省生物医...
  • 1篇安徽医科大学...

作者

  • 3篇范清林
  • 3篇宋礼华
  • 2篇徐丙发
  • 2篇魏伟
  • 1篇王中安
  • 1篇范鲁雁
  • 1篇邹文艺
  • 1篇黄辉
  • 1篇胡伟伟
  • 1篇尼钢钢
  • 1篇刘磊
  • 1篇夏毅

传媒

  • 3篇生物学杂志
  • 2篇中国药理学通...

年份

  • 1篇2013
  • 1篇2012
  • 1篇2010
  • 2篇2008
共 5 条 记 录，以下是 1-5
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排序方式：
重组人白蛋白干扰素α-2b融合蛋白的抗HBV机制被引量：4
2010年
徐丙发范鲁雁范清林魏伟宋礼华
关键词：乙肝病毒STAT1
不同接头的白蛋白干扰素在毕赤酵母中表达的研究被引量：3
2012年
毕赤酵母作为比较成熟的真核表达系统[1],它具有许多优点,表达产物直接分泌到胞外,这有利于产物的分离纯化。白蛋白干扰素在毕赤酵母中表达的研究也具有很重要的意义。研究白蛋白与干扰素之间的接头蛋白不同对表达量的影响。通过重叠PCR构建不同接头的白蛋白干扰素重组子,然后分别用salⅠ酶切线性化,通过电转仪转入毕赤酵母SMD1168,在MD板上进行培养,分别挑取10个克隆进行甲醇诱导表达,筛选出表达量最高的一个。最后在相同的条件下,分别将表达量高的进行诱导表达,表达产物通过SDS-PAGE鉴定,由于表达产物中有杂蛋白,通过酶联免疫吸附法(ELISA)测定融合白蛋白干扰素的表达量,由已知浓度的白蛋白干扰素标准曲线,可以计算出不同接头的白蛋白干扰素的表达量,这对工业化生产具有指导意义。
刘磊范清林王中安张玲邹文艺宋礼华
关键词：毕赤酵母
干扰素-α及长效干扰素抗肝炎病毒作用机制的研究进展被引量：28
2008年
干扰素-α是治疗慢性病毒性肝炎的主要药物之一,可通过影响肝细胞Jak-STAT信号通路,促进2′-5′-OAS、PKR和MxA等蛋白的生成发挥抗肝炎病毒作用。干扰素-α还可通过影响MAPK通路、IRS-1/PI3K-p70S6激酶通路等信号转导通路发挥作用。为延长其半衰期、增强疗效,目前已开发出多种长效干扰素,如聚乙二醇干扰素、人血清白蛋白融合干扰素、干扰素脂质体等,并有逐渐取代普通干扰素的趋势。开发出长效、高效的干扰素也越来越成为干扰素及病毒性肝炎治疗的重要发展方向。
徐丙发范清林魏伟宋礼华
关键词：干扰素-Α长效干扰素丙型肝炎信号转导
DNA shuffling技术提高干扰素比活性的研究被引量：1
2013年
DNA shuffling技术可以定向进化干扰素,获得比rhIFN-α2b标准品更高比活的干扰素。rhIFN-α2b基因与Infergen基因用DNaseI酶切成30～50 bp小片段,回收之后进行无引物PCR重聚和有引物PCR扩增基因。将重组基因连接到载体pUC19中,转化至DH5α并挑选阳性克隆测序。将测序正确的突变基因连接到载体pET30a中并转化至BL21(DE3)中,然后诱导蛋白表达、SDS-PAGE凝胶电泳和Western blot分析。经过表达细胞诱导、细胞裂解、包涵体变性、复性和单克隆抗体亲和层析之后,获得高纯度的重组干扰素。经测定纯化后的重组干扰素比活达到5.8×108IU/mg,比rhIFN-α2b标准品高出5倍左右。实验结果证明此实验方法对提高干扰素的比活是有效的,可以获得比标准品更高比活的干扰素。
尼钢钢范清林胡伟伟宋礼华
关键词：DNASHUFFLING干扰素酶切
重组人白蛋白干扰素α-2b融合蛋白的稳定性研究被引量：6
2008年
研究重组人白蛋白干扰素α-2b融合蛋白(rHSA-IFNα-2b)的稳定性。以抗病毒活性和纯度为主要检测指标,考察rHSA-IFNα-2b的热稳定性,酸碱稳定性以及冻融耐受性。rHSA-IFNα-2b在37℃、55℃下放置5h后生物学活性无明显降低,60℃水浴1h即可见活性降低了约40%;pH值(分别为2、3、9)改变时,生物学活性未发生明显变化;rHSA-IFNα-2b反复冻融后聚合体逐渐增加,冻融4次后聚合体含量达到17.91%,但生物学活性无明显降低。重组人白蛋白干扰素α-2b融合蛋白对热、酸碱变化稳定,但不宜冻融。
夏毅范清林邹文艺黄辉宋礼华
关键词：热稳定性
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