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国家自然科学基金(81160321): 作品数：13 被引量：35H指数：3; 相关作者：韦薇刘剑仑杨华伟蒋奕唐玮更多>>; 相关机构：广西医科大学附属肿瘤医院广西医科大学柳州市人民医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金广西壮族自治区科学研究与技术开发计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

赖氨酰氧化酶表达干扰对乳腺癌裸鼠移植瘤生长影响及机制研究被引量：3: 2013年; 目的:探讨抑制乳腺癌细胞MD-MB-231中赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)的表达对乳腺癌裸鼠移植瘤生长的影响及可能机制。方法:设计合成特异性LOX基因慢病毒干扰载体(LOX-RNAi-LV)转染乳腺癌细胞MDA-MB-231,采用荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测LOX mRNA和蛋白的表达;建立乳腺癌裸鼠原位移植模型,观察移植瘤的生长情况。采用免疫组化方法检测移植瘤组织中LOX蛋白及肿瘤增殖、转移相关蛋白Ki-67、MMP-2、MMP-9和HIF-1α的表达。结果:转染LOX-RNAi-LV的人乳腺癌细胞MDA-MB-231中LOX mRNA和蛋白的相对表达量分别为0.102±0.083和0.156±0.004,与空白对照组(0.945±0.158和0.916±0.007)相比,表达率均明显下调,抑制率分别为89.2%和83.0%。裸鼠原位接种癌细胞后6d均有肿瘤生成,40d后接种转染LOX-RNAi-LV的MDA-MB-231细胞的裸鼠移植瘤体积为(108.89±26.61)mm3,质量为(0.117±0.021)g;均明显低于空白对照组(400.15±79.81)mm3,(0.433±0.068)g,以及阴性对照组(380.15±65.81)mm3,(0.404±0.053)g,差异有统计学意义,P值均为0.000。移植瘤组织中LOX、Ki-67、MMP-2、MMP-9和HIF-1α蛋白相对表达水平分别为0.198±0.036、0.347±0.054、0.379±0.048、0.335±0.067和0.307±0.073,较空白对照组和阴性对照组明显降低,P值均<0.01。结论:干扰MDA-MB-231中LOX的表达,可抑制乳腺癌裸鼠移植瘤的生长侵袭,LOX可能通过调节Ki-67、MMP-2、MMP-9和HIF-1α蛋白的表达,在乳腺癌的侵袭转移中发挥作用。; 韦薇刘剑仑李景涛刘启鹏蒋奕唐玮杨华伟; 关键词：乳腺肿瘤赖氨酰氧化酶 RNA干扰裸鼠

串联亲和标签LOX蛋白慢病毒表达载体的构建及在乳腺癌细胞中的表达被引量：1: 2015年; 目的:为了研究赖氨酰氧化酶(Lysyl Oxidase,LOX)及其相互作用蛋白质在乳腺癌中的功能,构建带StrepⅡ/FLAG串联亲和标签的重组LOX蛋白慢病毒表达载体并在乳腺癌细胞MDA-MB-231中表达。方法:设计引物通过聚合酶链式反应获得带StrepⅡ/FLAG串联亲和标签的LOX蛋白(LOX-SF)的亲本质粒,双酶切后鉴定测序克隆至GV303表达载体,连同慢病毒包装质粒共同转染293T得到GV303/LOX-SF慢病毒,将其转染MDA-MB-231细胞,使用荧光定量PCR和蛋白质印迹实验对细胞中重组蛋白LOX-SF进行检测。结果:通过串联亲和纯化获得LOX-SF重组蛋白,使用标签抗体成功鉴定到LOX-SF重组蛋白在MDA-MB-231细胞内稳定表达。结论:GV303/LOX-SF的构建,使带StrepⅡ/FLAG融合标签的LOX蛋白在MDA-MB-231中成功表达及纯化,为筛选和研究LOX及其相互作用蛋白在乳腺癌细胞内的功能奠定了实验基础。; 刘侠刘剑仑蒋奕唐玮杨华伟韦薇; 关键词：串联亲和纯化赖氨酰氧化酶慢病毒载体相互作用蛋白质

同时性双侧原发性乳腺癌的临床病理特征、分子分型及预后分析被引量：6: 2019年; 目的分析同时性双侧原发性乳腺癌(SBPBC)的临床病理特征、分子分型及预后特点。方法 SBPBC患者44例(SBPBC组,根据肿瘤组织体积大小分为第一癌和第二癌),单侧原发性乳腺癌(UPBC)患者132例(UPBC组),对两组患者的临床病理资料、分子分型、治疗随访结果作对比分析。结果 SBPBC组44例患者中,年龄≤50岁者32例,有家族史者30例,绝经者9例(9/44); UPBC组132例患者中,年龄≤50岁者45例,有家族史者34例,绝经者81例;两组相比,P均<0. 05。SBPBC组第一癌、第二癌和UPBC组T2期患者分别为27、16和51例,SBPBC组第一癌与第二癌、UPBC组相比,P均<0. 05。SBPBC组第一癌、第二癌N2～N3期患者分别为10、3例,两者相比,P <0. 05; SBPBC组第二癌、UPBC组N0～N1期患者分别为41、106例,两者相比,P <0. 05。SBPBC组第一癌、UPBC组组织学分级为Ⅱ～Ⅲ级的患者分别为40例、121例,两者相比,P <0. 05。SBPBC组第一癌、UPBC组病理学分期为Ⅲ期+Ⅳ期的患者分别为17、37例,两者相比,P <0. 05; SBPBC组第二癌、UPBC组病理学分期为Ⅱ～Ⅳ期的患者分别为27、117例,两者相比,P <0. 05。SBPBC组第一癌、UPBC组Ki-67阳性率≥14%的患者分别为39、87例,两者相比,P <0. 05。SBPBC组第一癌乳腺导管(Luminal) A型17例、Luminal B型23例、Her-2过表达型3例、基底样型1例,第二癌Luminal A型22例、Luminal B型19例、Her-2过表达型2例、基底样型1例; UPBC组Luminal A型45例、Luminal B型46例、Her-2过表达型13例、基底样型28例; SBPBC组第一癌、第二癌与UPBC组相比,P均<0. 05。SBPBC组、UPBC组患者中位无病生存时间分别为45个月和59个月,两组相比,P <0. 05。结论与UPBC相比,SBPBC的发病年龄低且大多数发生在绝经之前,患者多有家族史,病理分级和分期较高,以浸润性导管癌为主,分子分型以Luminal B型为主,无病生存时间较短。; 韦常宏韦薇林思彤陈肖瑜陈军; 关键词：乳腺癌原发性乳腺癌双侧原发性乳腺癌

PDCD4与乳腺癌关系的研究进展被引量：2: 2016年; 程序性细胞死亡因子4(programmed cell death 4,PDCD 4)是近年来新发现的与细胞捌亡有关的肿瘤抑制基因,研究发现多种恶性肿瘤组织中PDCD4的表达呈下调或缺失,与乳腺癌的发生、发展及预后密切相关,在乳腺癌的诊断和治疗中具有重要作用,本文就PCD4与乳腺癌关系的研究现状进行综述。; 胡鑫韦薇刘剑仑; 关键词：PDCD4 乳腺肿瘤抑癌基因细胞凋亡

干扰赖氨酰氧化酶基因对乳癌 MDA-MB-231细胞生物学的影响: 2013年; 目的观察抑制赖氨酰氧化酶（LOX）基因表达后对MDA-MB-231细胞的生物学特性的影响。方法将细胞分为实验组、空白对照组和阴性对照组，采用病毒转染法，应用噻唑蓝（MTT）法、细胞集落形成实验、流式细胞仪和细胞侵袭迁移实验检测结果。结果24、48、72、96h3 组细胞抑制率分别是（12. 73 ±3. 30）% .（33.93 ± 1. 99）% ,（52. 63 ± 1.04）% ,（63. 80 ±0. 70）%;0、0、0、0;（7. 60 ±6. 27）%、（ 10. 30 ± 1. 49）%、（9.10 ±2. 69）%、（6. 03 ± 1. 21）%，差异有统计学意义（P 〈0.05）。细胞周期时相差异无统计学意义（P〉0.05）。细胞侵袭实验结果分别为47±2、100±1、88±2,差异有统计学意义（P〈0.05）;细胞迁移实验结果分别为63 ±2,118 ±2,96 ±2，差异有统计学意义（P〈0. 05） 0结论干扰LOX基因的表达可抑制MDA-MB-231细胞的生物学特性。; 李德全李景涛刘剑仑杨华伟; 关键词：乳癌 RNA干扰生物学特性

乳腺癌组织中LOX的表达变化及其与MMP-2、MMP-9、HIF-1α的关系被引量：3: 2013年; 目的观察赖氨酰氧化酶(LOX)在乳腺癌组织中的表达变化,探讨其与基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的关系。方法分别应用RT-PCR和免疫组化法检测120例乳腺癌组织、癌旁乳腺组织及30例乳腺良性病变组织中的LOX mRNA和蛋白,分析乳腺癌组织中LOX表达与淋巴结转移的关系;用免疫组化法检测上述组织中的MMP-2、MMP-9、HIF-1α蛋白,分析其在乳腺癌组织中表达与LOX的相关性。结果乳腺癌组织中LOX mRNA相对表达水平为0.44±0.08、LOX蛋白表达率为67.5%(81/120),均高于相应癌旁组织及乳腺良性病变组织(P均<0.05);伴腋窝淋巴结转移的乳腺癌组织中,LOX表达高于无腋窝淋巴结转移者(P=0.000);MMP-2、MMP-9、HIF-1α蛋白在乳腺癌中的表达阳性率为70.0%(84/120)、68.3%(82/120)、61.7%(74/120),均高于相应癌旁组织及乳腺良性病变组织(P均<0.05);相关分析显示,LOX蛋白表达与MMP-2、MMP-9和HIF-1α蛋白之间呈显著正相关(r分别为0.450、0.423、0.462,P均<0.05)。结论LOX在乳腺癌中高表达,并与淋巴结转移密切相关;它可能与MMP-2、MMP-9和HIF-1α相互作用,共同促进乳腺癌的侵袭、转移。; 韦薇刘剑仑唐玮杨华伟蒋奕刘起鹏; 关键词：赖氨酰氧化酶基质金属蛋白酶低氧诱导因子

乳腺癌组织LOX、XRCC5表达变化及其与患者临床病理参数和预后的关系被引量：2: 2018年; 目的探讨赖氨酰氧化酶(LOX)及其相互作用蛋白X射线修复交叉互补蛋白5(XRCC5)在乳腺癌发生、发展中的作用。方法选择乳腺浸润性导管癌患者170例,取手术切除的乳腺癌组织及其相应癌旁正常组织,采用免疫组化SP法检测LOX、XRCC5表达,分析LOX阳性表达与XRCC5阳性表达的关系及二者与患者临床病理参数和预后的关系。结果乳腺癌组织LOX、XRCC5阳性表达率及其相对表达量均高于癌旁正常组织(P均<0.05)。Spearman非参数相关分析显示,乳腺癌组织LOX阳性表达与XRCC5阳性表达呈正相关关系(r=0.536,P<0.01)。LOX相对表达量与乳腺癌腋窝淋巴结转移、临床分期有关(P均<0.05),与患者年龄、肿瘤直径、组织病理分级无关(P均>0.05)。XRCC5相对表达量与临床分期有关(P均<0.05),与患者年龄、肿瘤直径、腋窝淋巴结转移、组织病理分级无关(P均<0.05)。LOX阳性表达者和(或)XRCC5阳性表达者总生存率均低于LOX阴性表达者和(或)XRCC5阴性表达者(P均<0.05)。结论乳腺癌组织LOX、XRCC5表达升高,二者表达变化可协同促进乳腺癌侵袭和转移,并有可能作为乳腺癌预后评估的指标。; 柳琴韦薇张敏敏杨华伟唐玮刘剑仑; 关键词：乳腺癌赖氨酰氧化酶临床病理特征预后

乳腺癌组织LOX蛋白表达与腋窝淋巴结转移相关性分析被引量：10: 2017年; 目的赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)是稳定细胞外基质的关键酶,主要功能是调节细胞黏附、运动及基因转录等。LOX在不同类型肿瘤中可能发挥着不同的作用。本研究通过观察LOX在腋窝淋巴结阳性乳腺癌组织中的表达,分析其与细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、细胞增殖核抗原(nuclcar-associated antigen,Ki-67)、趋化因子受体4(C-X-C chemokine receptor type 4,CXCR4)及E-钙黏素(E-cadherin)的相关性,探讨LOX在乳腺癌腋窝淋巴结转移中的作用及可能机制。方法收集广西医科大学附属肿瘤医院2013-09-01-2015-12-31住院手术切除的227例乳腺癌组织及配对的正常乳腺组织(距离癌组织>5cm)标本。采用免疫组化法检测LOX蛋白在乳腺癌组织和正常乳腺组织中的表达,分析LOX蛋白表达与临床病理特征及腋窝淋巴结转移数目的关系,以及Cyclin D1、Ki-67、CXCR4和E-cadherin蛋白与LOX蛋白表达的相关性。结果 LOX蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率64.8%(147/227),显著高于癌旁正常乳腺组织的31.7%(72/227),χ~2=49.621,P<0.001。LOX蛋白表达与乳腺癌组织学分级、原发肿瘤大小、腋窝淋巴结状态、临床分期、ER、PR及HER2状态有关,χ~2值分别为8.312、6.183、10.597、7.950、19.731、5.221和16.648,P值分别为0.016、0.045、0.014、0.019、<0.001、0.022和0.001;而与年龄、月经状态、体质量指数和分子分型无明显相关性,均P>0.05。LOX蛋白表达与腋窝淋巴结转移数目呈正相关,r=0.199,P=0.003。LOX蛋白与Cyclin D1(r=0.476,P<0.001)、Ki-67(r=0.492,P<0.001和CXCR4蛋白(r=0.539,P<0.001)表达呈中度正相关,与E-cadherin蛋白表达呈中度负相关(r=-0.387,P<0.001)。结论 LOX蛋白在乳腺癌组织中表达升高,并与腋窝淋巴结转移相关。LOX蛋白过表达促进乳腺癌侵袭和转移,并可能通过上调Cyclin D1、Ki-67、CXCR4和下调E-cadherin表达促进腋窝淋巴结的转移。; 张敏敏韦薇刘剑仑杨华伟蒋奕; 关键词：赖氨酰氧化酶腋窝淋巴结肿瘤转移

串联亲和纯化技术在研究细胞内相互作用蛋白质中的应用: 2014年; 为了进一步研究蛋白质功能并建立蛋白质在细胞内的相互作用网络,各种研究相互作用蛋白质的方法应运而生,串联亲和纯化(TAP)技术就是其中之一。TAP利用基因重组技术将标签基因融合入靶蛋白基因,转入细胞系后表达带标签的靶蛋白,使用标签的特异性对靶蛋白进行纯化和相关研究,而该技术在实际运用会遇到标签选择、标签位置的选择和重组表达等一系列问题,该文介绍TAP技术在实际使用中的技术要点。; 刘侠韦薇; 关键词：串联亲和纯化相互作用蛋白质蛋白质组学

Ku蛋白与恶性肿瘤被引量：1: 2015年; Ku蛋白作为DNA结合蛋白,除了参与DNA修复外,还参与端粒维持、抗凋亡和基因转录调控等。近年发现Ku蛋白与肿瘤发生、发展密切相关,同时扮演着肿瘤抑制因子及肿瘤促进因子的双重角色。此外,Ku蛋白的表达水平和功能与肿瘤放疗的抵抗性相关,可作为放疗增敏的一个靶点。本文就Ku蛋白与恶性肿瘤的关系作一综述。; 韦薇周文婷刘剑仑; 关键词：恶性肿瘤 KU蛋白

国家自然科学基金(81160321)

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